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2005年～2010年猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株的遗传变异分析

2005年～2010年猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株的遗传变异分析

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：范培虎危艳武郭龙军黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

2006年我国南方猪高热病爆发以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在全国各地广泛流行,为了揭示该病的发生规律,根据GenBank登录的PRRSV基因序列设计引物,采用RT-PCR法对2005年～2010年间送检的282份病料进行了PRRSV核酸检测,阳... 详细信息

2006年我国南方猪高热病爆发以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在全国各地广泛流行,为了揭示该病的发生规律,根据GenBank登录的PRRSV基因序列设计引物,采用RT-PCR法对2005年～2010年间送检的282份病料进行了PRRSV核酸检测,阳性检出率为18.8%(53/282);对9份阳性样品进行了ORF5～7基因片段扩增和测序,这9个毒株ORF5序列相似性为95.0%～99.2%,氨基酸序列相似性为92.0%～99.0%;与GenBank登录的PRRSV CH-1a、VR2332、HB-2、LV株等ORF5序列相似性依次为93.4%～95.5%、87.6%～89.4%、91.2%～92.7%、63.0%～64.0%;氨基酸序列的相似性依次为91.0%～94.0%、85.6%～88.6%、89.6%～92.0%、54.7%～58.2%。与国内已发表的27株PRRSV ORF5序列进行遗传进化树分析,2005～2010年流行毒株同属于一个基因亚群;对GP5蛋白潜在糖基化位点与数目分析,5个糖基化位点有3株,4个糖基化位点有5株,3个糖基化位点有1株;糖基化位点分布在第30～55位点氨基酸之间,以第44、55位点比较保守,其它3个位点变异幅度较大。表明我国流行的PRRSV毒株变异幅度较大,GP5糖基化位点不同可能与毒力存在一定联系。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因遗传变异

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猪流行性腹泻病毒的分子流行病学研究

猪流行性腹泻病毒的分子流行病学研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：陈建飞王承宝时洪艳陈小金张志榜冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

自2006年初起,猪流行性腹泻病毒(PEDV)开始在免疫猪群中再度出现。开放阅读框3(ORF3)是PEDV基因组中的唯一辅助基因。12株PEDV野毒株和一株疫苗株的全长ORF3基因被测序。PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)的ORF3基因包含一个672或675个核苷... 详细信息

自2006年初起,猪流行性腹泻病毒(PEDV)开始在免疫猪群中再度出现。开放阅读框3(ORF3)是PEDV基因组中的唯一辅助基因。12株PEDV野毒株和一株疫苗株的全长ORF3基因被测序。PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)的ORF3基因包含一个672或675个核苷酸开放阅读框,编码一个223或224个氨基酸长的多肽。然而,由于在245位～293位缺失49个核苷酸,CV777疫苗株和CH/GSJIII/07株包含一个由276个核苷酸组成的开放阅读框。根据ORF3基因的系统发育关系,中国PEDV野毒株和PEDV参考株被分为3个群。中国PEDV野毒株(除CH/GSJIII/07外)和韩国毒株有着密切的亲缘关系,而与疫苗株的遗传关系不同。然而,CH/GSJIII/07和两个疫苗株的亲缘关系近,它可能是从疫苗株演化而来。利用套式RT-PCR方法可以将中国PEDV野毒株感染(除CH/GSJIII/07外)与疫苗株区分开。

关键词：猪流行性腹泻病毒系统发育关系 ORF3基因新基因型套式RT-PCR

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猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染的检测及TTV遗传变异分析

猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染的检测及TTV遗传...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测,TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1和TTV2混合感染阳性检出率为18.2%;PCV1与PCV2阳性检出率分别为41.1... 详细信息

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测,TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1和TTV2混合感染阳性检出率为18.2%;PCV1与PCV2阳性检出率分别为41.1%和37.5%,PCV1和PCV2混合感染阳性检出率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达到75.0%。此外,对2株TTV1基因组克隆测序,与GenBank下载的6个TTV1序列比对,其相似性为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组克隆测序,与GenBank下载的4条TTV2序列比对,其相似性为84.7%～90.4%;TTV1与TTV2之间序列比对,其相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520 nt～2 594 nt和720 nt～2 170 nt之间;TTV1基因保守区位于1 nt～520 nt和2 595 nt～2 800 nt;TTV2基因保守区位于1 nt～719 nt和2 171 nt～2 800 nt。表明我国猪群中有TTV与PCV混合感染存在,这两种病毒混合感染引起相关疾病可能存在一定依存度;TTV1和TTV2基因型变异幅度较大,具有遗传变异多样性特点。

关键词： TTV PCV 混合感染遗传变异分析

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猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平吴洪丽张朝霞温士刚姜凤娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状,统称为猪圆环病毒病。我国猪群中PCV2抗体阳性率达80%以上,发病率为25%～40%,死淘率10%左右。病毒感染猪后破坏免疫系统,产生免疫抑制,增强了对多种病原体的易感性,引发难以控制的严重疾病。

关键词：猪圆环病毒 PCV 灭活疫苗断奶仔猪多系统衰竭综合征猪呼吸道疾病综合征母源抗体研制与应用

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猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染的检测及TTV遗传变异分析

猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染的检测及TTV遗传...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测,TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1和TTV2混合感染阳性检出率为18.2%;PCV1与PCV2阳性检出率分别为41.1%和37.5%,PCV1和PCV2混合感染阳性检出率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达到75.0%。此外,对2株TTV1基因组克隆测序,与GenBank下载的6个TTV1序列比对,其相似性为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组克隆测序,与GenBank下载的4条TTV2序列比对,其相似性为84.7%～90.4%;TTV1与TTV2之间序列比对,其相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520nt～2594nt和720nt～2170nt之间;TTV1基因保守区位于1～520nt和2595nt～2800nt;TTV2基因保守区位于1～719nt和2171nt～2800nt。表明我国猪群中有TTV与PCV混合感染存在,这两种病毒混合感染引起相关疾病可能存在一定依存度;TTV1和TTV2基因型变异幅度较大,具有遗传变异多样性特点。

关键词： TTV PCV 混合感染遗传变异分析

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猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)的研制与应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平吴洪丽张朝霞温士刚姜凤娟中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等症状,统称为猪圆环病毒病。我国猪群中PCV2抗

关键词：猪圆环病毒灭活疫苗断奶仔猪多系统衰竭综合征猪呼吸道疾病综合征母源抗体研制与应用

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猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外生物学特性研究

猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救病毒的体外...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c三个基因型,还有PCV2d基因型新报道,这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的相关疾病日益严重,流行毒株基因不断发生变异,根据病毒基因组差异分为PCV2a、PCV2b和PCV2c三个基因型,还有PCV2d基因型新报道,这些不同基因型PCV2毒株的致病性差异有待阐明。采用感染性克隆技术构建了不同基因型代表性毒株,对拯救的毒株进行体外生物学特性试验。本研究构建了4个不同基因型的PCV2感染性分子克隆,经转化细胞后拯救4个克隆毒株,经核酸序列分析、病毒形态学观察、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)等证实属于不同基因型的PCV2毒株;拯救的毒株均通过细胞连续传10代,病毒增殖能力稳定,毒价均可达到105.0TCID50/ml;用具有中和病毒活性的单克隆抗体(1D2株)进行抗原捕获ELISA检测,拯救的PCV2a/rCL毒株与该单抗产生特异性反应,另3个克隆毒株(PCV2b/rYJ、rJF和PCV2d/rBDH)与该单抗均无反应,表明它们属于不同基因型代表毒株。这表明我国猪群中PCV2流行毒株存在不同基因型,其病毒抗原特性各异,构建和拯救了4个代表不同基因型PCV2克隆毒株,为进一步研究其致病性差异奠定了基础。

关键词： PCV2 不同基因型感染性克隆病毒拯救生物学特性

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：危艳武刘长明范培虎吴洪丽温士刚陆月华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株,命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化,用PRRSB-HBR株第125代培养物,毒价为10TCID/mL,经肌... 详细信息

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株,经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株,命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化,用PRRSB-HBR株第125代培养物,毒价为10TCID/mL,经肌肉注射和滴鼻途径接种35日龄健康试验猪18头,同时设3头未接种病毒作为空白对照组。病毒接种后试验猪未出现明显体温上高、食欲下降、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿、体表淋巴结肿大等症状;接种后第3 d检测到病毒血症,7 d～14 d达到高峰,28 d后转为阴性。不同时间迫杀试验猪检测各脏器病毒抗原结果表明,接种后1周～2周感染猪多数组织呈阳性反应,3周～6周病毒集中在脾、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结等。病理切片观察到,接种后1周～2周感染猪存在轻度显微病变。用第125代细胞毒感染猪后,尽管在临床上未显示明显症状,但病毒感染后毒血症、脏器病毒抗原分布、病理学观察等指标仍显示存在一定毒力,用于活疫苗研制仍有待进一步驯化致弱。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株细胞传代毒致病性

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株的培育及动物感染试验

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：危艳武刘长明范培虎吴洪丽温士刚陆月华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株,命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化,用PRRSB-HBR株第125代培养物,毒价为107.5TCID50/mL,... 详细信息

从临床病例分离到一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆获得一株增殖性能稳定的毒株,命名为PRRSV-HBR。为了检测该毒株细胞传代过程中的毒力变化,用PRRSB-HBR株第125代培养物,毒价为107.5TCID50/mL,经肌肉注射和滴鼻途径接种35日龄健康试验猪18头,同设3头未接种病毒作为空白对照组。病毒接种后试验猪未出现明显体温上高、食欲下降、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿、体表淋巴结肿大等症状;接种后第3d检测到病毒血症,7d～14d达到高峰,28d后转为阴性。不同时间迫杀试验猪检测各脏器病毒抗原结果表明,接种后1w～2w感染猪多数组织呈阳性反应,3w～6w病毒集中在脾、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结等。病理切片观察到,接种后1w～2w感染猪存在轻度显微病变。用第125代细胞毒感染猪后,尽管在临床上未显示明显症状,但病毒感染后毒血症、脏器病毒抗原分布、病理学观察等指标仍显示存在一定毒力,用于活疫苗研制仍有待进一步驯化致弱。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株细胞传代毒致病性

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禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展

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动物医学进展 2010年第9期31卷 93-96页

作者：邓小芸祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江畜牧兽医职业学院黑龙江双城150111

禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,AL... 详细信息

禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中均普遍存在,使得鸡群处于免疫力低下的状态,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,并容易造成继发感染,使疫病的诊断和防控难度加大。另外,REV可以整合到MDV和鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)基因组中,从而导致商品化疫苗受到污染,并可用做将外源基因插入到鸡和哺乳动物细胞内的表达载体;基于REV传统检测方法的基础上,新型的分子生物学检测技术如PCR、实时荧光PCR、LAMP提高了诊断REV的敏感性和特异性。

关键词：禽网状内皮组织增生症流行感染基因重组检测技术

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