检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：袁海峰姚火春高飞王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院

许多单股正链RNA病毒的基因组末端含有一段poly(A)尾,这对病毒基因组RNA的感染性起着非常重要的作用。本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,通过突变PCR获得poly(A)尾长度分别为0、5、8、9、10... 详细信息

许多单股正链RNA病毒的基因组末端含有一段poly(A)尾,这对病毒基因组RNA的感染性起着非常重要的作用。本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,通过突变PCR获得poly(A)尾长度分别为0、5、8、9、10、22、35的全长突变体克隆,经体外转录转染MARC-145细胞,观察细胞病变(CPE),对于能产生CPE的,抽提细胞上清中的病毒RNA,通过G-Tailing法鉴定子代病毒基因组的poly(A)尾长度。结果表明:***(A)尾影响PRRSV基因组的感染性,且最小长度为10;***基因组poly(A)尾在感染细胞过程中能被修复。

关键词：基因组 RNA 子代病毒感染性克隆 PRRSV 体外转录猪繁殖与呼吸综合征病毒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒5’非翻译区序列的反向遗传操作

猪繁殖与呼吸综合征病毒5’非翻译区序列的反向遗传操作

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：高飞姚火春孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院

在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2的基础上,利用突变PCR技术成功构建了在病毒基因组5端非编码区(5UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并在此基础上将北美株病毒的5UTR替换为欧洲株的5UTR,成功构... 详细信息

在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2的基础上,利用突变PCR技术成功构建了在病毒基因组5端非编码区(5UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并在此基础上将北美株病毒的5UTR替换为欧洲株的5UTR,成功构建了全长克隆pTLV8。以体外转录的RNA转染MARC-145细胞,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),pTLV8未产生。对这两株突变病毒进行RT-PCR和Northern Blot试验,分别对病毒基因组RNA复制和亚基因组mRNA转录水平进行分析;同时,还对产生CPE的pTLNd4进行了病毒学试验,结果表明它与亲本病毒无论从分子生物学水平或病毒学水平都无明显差异,而pTLV8虽未产生CPE,但用RT-PCR在病毒传代细胞中检测到了基因组RNA,说明替换欧洲型5UTR的突变病毒丧失了复制能力与感染性,但目前仍然能够提供病毒RNA合成所需要的顺式调控因子。本研究为进一步解析5UTR的调控机制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF 亚基因组欧洲型感染性克隆 PRRSV 全长克隆反向遗传操作 UTR RNA 体外转录细胞病变病毒基因组非翻译区

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基因组RNA Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程的影响

基因组RNA Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程的影响

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：袁海峰高飞姚火春王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院

许多单股正链 RNA 病毒的基因组末端含有 poly(A)尾,这对病毒基因组 RNA 的感染性起着非常重要的作用。对于猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)基因组 poly(A)尾的研究甚少,仅有报道称将其缺失造成 PRRSV 基因组丧失感染性,

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程 RNA Poly 基因组

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)3’末端非翻译区中调控序列的研究

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)3’末端非翻译区中调控序列的...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：孙志王金勇张建武秦爱健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室扬州大学兽医学院

以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3'UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒感染性的影响,旨在界定调控PRRSV3... 详细信息

以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3'UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3'UTR突变对病毒感染性的影响,旨在界定调控PRRSV3'UTR的启动子序列及二级结构,即复制过程中的最小调控元件。以空斑和Northern Blot来研究拯救后重组病毒的复制、转录和生长特性,发现重组病毒感染动力学与亲本病毒无可见差别。结果表明PRRSV3'UTR的5'端可耐受一定数目的核苷酸的缺失(41nt)与插入(23nt)突变,但进一步9nt缺失造成保守的环结构突变后就使病毒失去了感染性。证明了这是3'UTR中控制PRRSV复制过程的的必需序列及二级结构,为进一步解析PRRSV复制过程的调控元件奠定了基础。

关键词： PRRSV)3 感染性克隆 UTR 顺式调控元件猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非翻译区

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒3’末端非翻译区病毒复制过程调控作用的研究

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒3’末端非翻译区病毒复制过程调控作...

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：孙志王金勇张建武秦爱健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室扬州大学兽医学院

以北美株 PRRSV 感染性克隆 pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3’UTR 中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长 PRRSV 突变体克隆,解析3’UTR 突变对病毒感染性的影响,旨在

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 PRRSV 非翻译区病毒复制

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