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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

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文献类型

16 篇 会议
8 篇 期刊文献

馆藏范围

24 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

24 篇 农学
- 24 篇 兽医学

主题

11 篇 感染性克隆
8 篇 猪繁殖与呼吸综合...
6 篇 prrsv
5 篇 病毒复制
5 篇 基因组
5 篇 反向遗传操作
4 篇 马动脉炎病毒
4 篇 体外转录
3 篇 猪繁殖与呼吸综合...
3 篇 基因表达调控
3 篇 猪繁殖与呼吸障碍...
3 篇 rna
3 篇 非翻译区
2 篇 欧洲型prrsv
2 篇 反向遗传系统
2 篇 全长基因组cdna克...
2 篇 酶切位点
2 篇 基因组序列
2 篇 重叠序列
2 篇 orf

机构

6 篇 南京农业大学
6 篇 中国农业科学院上...
6 篇 中国农业科学院上...
3 篇 中国动物卫生与流...
3 篇 中国农业科学院上...
2 篇 中国农业科学院上...
2 篇 中国农业大学
2 篇 扬州大学
2 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国动物卫生与流...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...

作者

24 篇 袁世山
11 篇 王金勇
9 篇 高飞
8 篇 孙志
6 篇 姚火春
6 篇 余丹丹
6 篇 yuan shi-shan
5 篇 张建武
4 篇 陆嘉琦
4 篇 刘萍
4 篇 韦祖樟
3 篇 吕健
3 篇 gao fei
2 篇 wang jin-yong
2 篇 庄金山
2 篇 yu dan-dan
2 篇 袁海峰
2 篇 lu jia-qi
2 篇 liu ping
2 篇 秦爱健

语言

24 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室"

共 24 条记录，以下是11-20 订阅

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详细简洁

排序：

PRRSV感染性克隆的反向遗传操作：结构蛋白编码基因重叠区的分离

PRRSV感染性克隆的反向遗传操作：结构蛋白编码基因重叠区的分离

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：余丹丹孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)基因组部分阅读框之间存在重叠序列现象,这种复杂和极端紧凑的结构,使得如点突变、缺失、插入和构建嵌合体等一系列的感染性克隆分子操作变得困难。本研究通过将 PRRSV 感染性克隆 ORF

关键词：感染性克隆反向遗传操作 PRRSV 结构蛋白编码基因重叠区

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猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：余丹丹孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232

通过将PRRSV感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORFl6/7和ORF7/3’UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作，构建了一系列突变的全长质粒，随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明：1)各突变全长质粒均能够进行病毒拯救... 详细信息

通过将PRRSV感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORFl6/7和ORF7/3’UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作，构建了一系列突变的全长质粒，随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明：1)各突变全长质粒均能够进行病毒拯救，并产生明显细胞病变;2)突变病毒具遗传稳定性;3)病毒空斑形态及生长曲线与亲本毒株近似。表明PRRSV ORF间重叠碱基的安排方式对病毒的感染性是非必需的，获得的诸多突变病毒为进一步研制PRRSV基因标识疫苗、研究PRRSV各编码蛋白功能奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重叠序列病毒感染性编码蛋白

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：吕健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到... 详细信息

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到pBlueScript II SK(+)载体中,并且利用相关的重叠区酶切位点将其构建成为全长克隆。在扩增5'端时,运用5'RACE获得了基因组5'最末端序列,在亚克隆入pBlueScript IISK(+)并且在5'端上游引入T7启动子序列。选取一个克隆在3'端ORF6下游引入Mlu I位点,以期作为感染性分子克隆的筛选标志。最终获得了含有PRRSV JX0612株基因组全长cDNA的重组质粒pJX0612和含有分子标志Mlu I的基因组全长cDNA克隆pJX0612-M。转染MARC-145细胞后得到拯救病毒,而且分子标志稳定存在。本研究中构建的基因组全长感染性cDNA克隆为探寻病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：感染性克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV JX0612 细胞转染全长克隆基因组序列反向遗传操作无名高热

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

根据马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)Bucyrus株全基因组序列,设计并合成EAV特异引物,进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntII-TOPO中,建立了初级cDNA克隆。在扩增5'末端时,引入NotI酶切位点和T3启动子序列;在3'末段PolyA尾引入XhoI酶切位点,后者用于cDNA模板线性化。将扩增片断在PCR BluntII-TOPO中依次连接,最后亚克隆到质粒pBluescript II KS(+)中,获得了EAV全长cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明:该毒株基因组全长为12704个核苷酸,与EAV Bucyrus分离株的同源性为99.1%,全长基因组中有104个核苷酸发生突变,相应的导致编码区内34个氨基酸改变。本试验构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获取具有感染性的EAV分子克隆并研究动脉炎病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：基因组 RNA 马动脉炎病毒动脉炎病毒属

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

本研究旨在建立马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)的反向遗传操作系统。根据 GeneBank 相关 EAV 基因序列,设计合成特异引物,应用 RT-PCR 技术, 扩增了 EAV Bucyrus 株6段首尾重叠的全基因组 cDNA 片断。将扩增的各个 cDNA 重

关键词：马动脉炎病毒酶切位点基因组

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，... 详细信息

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，建立了EAV初级cDNA克隆。在扩增5’末端时，引入NotⅠ酶切位点和T3启动子序列;在基因组3’末段：PolyA尾引入XhoⅠ酶切位点，后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片断在PCR BluntⅡ-TOPO中依次连接，最后亚克隆到质粒pBluescript Ⅱ KS(+)中，获得了EAV全长基因组cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明：该毒株基因组全长为12704个核苷酸，与EAV Bucyrus分离株的同源性为99.1％;全长基因组中有104个核苷酸发生突变，相应地导致编码区内34个氨基酸的改变。本试验构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获取具有感染性的EAV分子克隆并研究动脉炎病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：马动脉炎病毒感染性克隆基因组序列

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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆5’非翻译区序列缺失突变分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆5’非翻译区序列缺失突变分析

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：高飞姚火春王金勇余丹丹袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 南京农业大学动物医学院江苏南京 210095 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232

对单股正链RNA病毒的研究发现：基因组5’非翻译区(5’UTR)在病毒的复制，转录，翻译过程中发挥了至关重要的作用。对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)5'UTR的研究意义重大。因此本研究在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上，通过突变... 详细信息

对单股正链RNA病毒的研究发现：基因组5’非翻译区(5’UTR)在病毒的复制，转录，翻译过程中发挥了至关重要的作用。对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)5'UTR的研究意义重大。因此本研究在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上，通过突变PCR获得了病毒基因组5’UTR系列缺失的全长突变体克隆：pCBCM1，pCBCM3，pCBCM5，7，9，45，69，100，随后将上述突变体体外转录成RNA之后转染MARC-145细胞，进行病毒感染性、复制和转录分析，以鉴定特定的缺失区的调控功能。结果显示：病毒5’UTR起始的第1个碱基是保持病毒感染性非必需的核苷酸;前45个碱基对病毒基因组的复制是非必需的。Northern Blot结果显示pCBCM1亚基因组mRNA可以进行高效率的转录，而其余突变体的亚基因组转录受到严重抑制。由此证明，PRRSV 5’UTR的完整性对病毒意义重大，碱基的少量以及大部分缺失会对病毒产生极大的影响。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征感染性克隆体外转录反向遗传系统病毒感染

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JX143株感染性克隆的构建

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JX143株感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：吕健孙志张建武刘维全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室中国农业大学生物学院

目的确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机理、以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法根据PRRSV基因组序列设计特异... 详细信息

目的确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机理、以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到pBlueScriptⅡSK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记MluⅠ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143-M。结果全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒。通过比较亲本毒与拯救病毒的病毒滴度、多步生长曲线和利用拯救病毒vJX143进行动物回归试验,结果发现病毒学及生物学特性没有显著差异。结论PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆高致病性猪蓝耳病动物回归试验

来源：评论

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基因组RNA Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程的影响

基因组RNA Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程的影响

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：袁海峰高飞姚火春王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院

许多单股正链 RNA 病毒的基因组末端含有 poly(A)尾,这对病毒基因组 RNA 的感染性起着非常重要的作用。对于猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)基因组 poly(A)尾的研究甚少,仅有报道称将其缺失造成 PRRSV 基因组丧失感染性,

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒复制过程 RNA Poly 基因组

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Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组感染性的影响

Poly(A)尾对猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组感染性的影响

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：袁海峰姚火春高飞王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院

许多单股正链RNA病毒的基因组末端含有一段poly(A)尾,这对病毒基因组RNA的感染性起着非常重要的作用。本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,通过突变PCR获得poly(A)尾长度分别为0、5、8、9、10... 详细信息

许多单股正链RNA病毒的基因组末端含有一段poly(A)尾,这对病毒基因组RNA的感染性起着非常重要的作用。本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,通过突变PCR获得poly(A)尾长度分别为0、5、8、9、10、22、35的全长突变体克隆,经体外转录转染MARC-145细胞,观察细胞病变(CPE),对于能产生CPE的,抽提细胞上清中的病毒RNA,通过G-Tailing法鉴定子代病毒基因组的poly(A)尾长度。结果表明:***(A)尾影响PRRSV基因组的感染性,且最小长度为10;***基因组poly(A)尾在感染细胞过程中能被修复。

关键词：基因组 RNA 子代病毒感染性克隆 PRRSV 体外转录猪繁殖与呼吸综合征病毒

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