检索结果-内蒙古大学图书馆

2007年中国部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学分析

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中国农业科学 2009年第8期42卷 2949-2957页

作者：张建武庄金山刘长龙王小敏袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室

【目的】对采集自上海、江西、山东、江苏、河南和湖南等省的257份进行了PCV2的检测,确定中国PCV2感染情况及分子特征。【目的】设计一对针对PCV2ORF2的引物,利用PCR对其进行PCV2基因组的检测,对PCV2阳性的样品,进行了ORF2的克隆、序列... 详细信息

【目的】对采集自上海、江西、山东、江苏、河南和湖南等省的257份进行了PCV2的检测,确定中国PCV2感染情况及分子特征。【目的】设计一对针对PCV2ORF2的引物,利用PCR对其进行PCV2基因组的检测,对PCV2阳性的样品,进行了ORF2的克隆、序列测定和分析。【结果】结果显示PCV2阳性率为24.51%(63/257),并能从健康猪群中检测的阳性;各PCV2分离株间ORF2核苷酸序列同源性为84.4%～100%,氨基酸同源性为82.5%～100%,与所属群的不同而不同。【结论】中国有2个群的PCV2毒株在流行,以PCV2b群为主(70.97%,22/31),但也有PCV2a群毒株(29.03%,9/31)的流行,同时PCV2流行的基因型没有明显的地域间差异。部分毒株符合高致病性PCV2的特征,暗示中国已存在高致病性PCV2的流行。

关键词：猪圆环病毒2型开放阅读框架2 基因型

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中国兽医学报 2009年第2期29卷 139-142页

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海200232

根据马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)Bucyrus株全基因组序列设计并合成EAV特异引物,进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片段PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中,建立了EAV初级cDNA克隆。在扩增5′末端时,引入NotⅠ酶切位点和T3启动子序列;在基因组3′末段PolyA尾引入XhoⅠ酶切位点,后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片段在PCR BluntⅡ-TOPO中依次连接,最后亚克隆到质粒pBluescriptⅡKS(+)中,获得了EAV全长基因组cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明:该毒株基因组全长为12 704个核苷酸,与EAVBucyrus分离株的同源性为99.1%;全长基因组中有104个核苷酸发生突变,相应地导致编码区内34个氨基酸的改变。

关键词：马动脉炎病毒全长cDNA克隆感染性克隆

猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列测定与分析

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猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列测定与分析

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：郑浩余丹丹孙志高飞袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫重点实验室

将猪源JEV SH0601株基因组RNA分五段进行RT-PCR并克隆入pCRⅡ-Blunt-TOPO和pBluescript载体中,测定了全长cDNA序列,并根据E蛋白基因序列对SH0601株进行了遗传分型。cDNA序列分析结果表明:SH0601株基因组全长10977nt,与GenBank中的Beijing-1、P3、SA14和SA14-14-2株基因组全长相比,在3′NTR的10701nt处多一碱基"G",与上述四株病毒的全长核苷酸的同源率都达97.2%以上,而与国外猪源分离株KV1899和JEV/sw/Mie/41/2002全长核苷酸的同源率仅达88.7%,但SH0601株与六株病毒的全长氨基酸同源率均达97.0%以上。以E蛋白基因序列对SH0601作进化分析,该分离株属基因型Ⅲ型。

关键词：乙型脑炎病毒 JEV SH0601 基因组猪源分离株序列测定与分析

猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列分析

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猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列分析

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

将猪源JEV SH0601株基因组RNA分五段进行RT-PCR并克隆入pCRⅡ-Blunt-TOPO和pBluescript载体中,测定了全长cDNA序列,并根据E蛋白基因序列对SH0601株进行了遗传分型。cDNA序列分析结果表明:SH0601株基因组全长10977nt,与GenBank中的Beijing-1、P3、SA14和SA14-14-2株基因组全长相比,在3'NTR的10701nt处多一碱基"G",与上述四株病毒的全长核苷酸的同源率都达97.2%以上,而与国外猪源分离株KV1899和JEV/sw/Mie/41/2002全长核苷酸的同源率仅达88.7%,但SH0601株与六株病毒的全长氨基酸同源率均达97.O%以上。以E蛋白基因序列对SH0601作进化分析,该分离株属基因型Ⅲ型。

关键词：猪乙型脑炎病毒病毒基因组基因型

猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：吕健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到... 详细信息

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到pBlueScript II SK(+)载体中,并且利用相关的重叠区酶切位点将其构建成为全长克隆。在扩增5'端时,运用5'RACE获得了基因组5'最末端序列,在亚克隆入pBlueScript IISK(+)并且在5'端上游引入T7启动子序列。选取一个克隆在3'端ORF6下游引入Mlu I位点,以期作为感染性分子克隆的筛选标志。最终获得了含有PRRSV JX0612株基因组全长cDNA的重组质粒pJX0612和含有分子标志Mlu I的基因组全长cDNA克隆pJX0612-M。转染MARC-145细胞后得到拯救病毒,而且分子标志稳定存在。本研究中构建的基因组全长感染性cDNA克隆为探寻病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：感染性克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV JX0612 细胞转染全长克隆基因组序列反向遗传操作无名高热

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

根据马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)Bucyrus株全基因组序列,设计并合成EAV特异引物,进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntII-TOPO中,建立了初级cDNA克隆。在扩增5'末端时,引入NotI酶切位点和T3启动子序列;在3'末段PolyA尾引入XhoI酶切位点,后者用于cDNA模板线性化。将扩增片断在PCR BluntII-TOPO中依次连接,最后亚克隆到质粒pBluescript II KS(+)中,获得了EAV全长cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明:该毒株基因组全长为12704个核苷酸,与EAV Bucyrus分离株的同源性为99.1%,全长基因组中有104个核苷酸发生突变,相应的导致编码区内34个氨基酸改变。本试验构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获取具有感染性的EAV分子克隆并研究动脉炎病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：基因组 RNA 马动脉炎病毒动脉炎病毒属

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

本研究旨在建立马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)的反向遗传操作系统。根据 GeneBank 相关 EAV 基因序列,设计合成特异引物,应用 RT-PCR 技术, 扩增了 EAV Bucyrus 株6段首尾重叠的全基因组 cDNA 片断。将扩增的各个 cDNA 重

关键词：马动脉炎病毒酶切位点基因组

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，... 详细信息

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，建立了EAV初级cDNA克隆。在扩增5’末端时，引入NotⅠ酶切位点和T3启动子序列;在基因组3’末段：PolyA尾引入XhoⅠ酶切位点，后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片断在PCR BluntⅡ-TOPO中依次连接，最后亚克隆到质粒pBluescript Ⅱ KS(+)中，获得了EAV全长基因组cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明：该毒株基因组全长为12704个核苷酸，与EAV Bucyrus分离株的同源性为99.1％;全长基因组中有104个核苷酸发生突变，相应地导致编码区内34个氨基酸的改变。本试验构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获取具有感染性的EAV分子克隆并研究动脉炎病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：马动脉炎病毒感染性克隆基因组序列

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学研究

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学研究

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：张建武庄金山袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海 200232

[目的]对来自“猪高热综合症”爆发地的组织样品进行多种病毒的检测，确定引起“猪高热综合症”的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。 [方法]利用(RT-)PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪血凝性脑... 详细信息

[目的]对来自“猪高热综合症”爆发地的组织样品进行多种病毒的检测，确定引起“猪高热综合症”的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。 [方法]利用(RT-)PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)以及瘟病毒的检测，对PRRSV阳性的进行ORF5的序列测定并分析。 [结果]检测到16份PRRSV北美型阳性样品，PCV2阳性样品2份，其他病毒未检测均为阴性。PRRSV ORF5序列分析表明分离到的PRRSV株可分为2个群。 [结论] 1)PRRSV与肆虐我国养猪业的“猪高热综合症”有直接关系;2)2006年PRRSV流行株主要是以JX0612株为代表，但不同遗传特征的PRRSV也在流行。

关键词：猪高热综合症猪繁殖与呼吸综合症病毒分子流行病学遗传进化