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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张赛奇王米杨锐乐薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所/中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫学病重点实验室

葛芪复方是经典方剂的重组,依据中兽医辩证施治的理论,是治疗脾虚腹泻的重要方剂,此方能够清热燥湿、止泻止痢、升举阳气,在治疗胃肠道系统疾病方面能起到积极作用,对腹泻有一定的防治作用。本研究首先建立小鼠大肠杆菌腹泻模型,通过葛... 详细信息

葛芪复方是经典方剂的重组,依据中兽医辩证施治的理论,是治疗脾虚腹泻的重要方剂,此方能够清热燥湿、止泻止痢、升举阳气,在治疗胃肠道系统疾病方面能起到积极作用,对腹泻有一定的防治作用。本研究首先建立小鼠大肠杆菌腹泻模型,通过葛芪复方煎液灌服给药来评价该复方对于小鼠腹泻的治疗作用效果,为临床开发治疗仔猪大肠杆菌病药物提供参考和依据。通过预先腹腔注射大肠杆菌菌悬液方式建立小鼠大肠杆菌性腹泻病理模型,然后设计0.3mL/10g药物组、0.2mL/10g药物组、0.1mL/10g药物组、模型对照组和空白对照组,连续灌服给药7d,观察复方对腹泻小鼠的防治效果。结果表明,给药后高、中剂量组小鼠平均增重、白细胞计数、单核细胞百分比及中性粒细胞百分比、脾和胸腺脏器指数与空白对照组无显著差异,与模型对照组差异明显(P<0.05)。十二指肠组织病理学观察各剂量组没有发现明显病变,模型对照组肠粘膜绒毛肿胀变粗。由此说明该复方能够有效防治小鼠大肠杆菌性腹泻,其中0.3mL/10g为适宜的给药剂量。

关键词：葛芪复方大肠杆菌腹泻

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UPLC-MS法研究复方嘧啶混悬液在肉鸡体内的生物等效性

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中国家禽 2014年第24期36卷 23-26页

作者：张晓晓张丽芳薛飞群费陈忠林析赵娟王春梅肖遂王霄旸张可煜王米郑文丽中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

为研究进口兽药复方磺胺嘧啶混悬液（参比）与国产复方混悬液（受试）是否等效，建立了同时检测磺胺嘧啶（SD）与甲氧苄啶（TMP）的超高液相色谱质谱联用方法（UPLC—MS），将甲氧苄啶的类似物二甲氧苄啶（DVD）作为内标，甲醇作为血浆... 详细信息

为研究进口兽药复方磺胺嘧啶混悬液（参比）与国产复方混悬液（受试）是否等效，建立了同时检测磺胺嘧啶（SD）与甲氧苄啶（TMP）的超高液相色谱质谱联用方法（UPLC—MS），将甲氧苄啶的类似物二甲氧苄啶（DVD）作为内标，甲醇作为血浆的前处理溶剂，来检测血药浓度，并用软件DAS3．0计算药动学参数，并对AUCt、AUCi的对数值进行方差分析、双单侧t检验等统计学处理，以80％－125％为等效标准，药峰浓度（Cmax）以70％～143％为等效区间来评价进口兽药与国产兽药的生物等效性。结果显示：SD参比制剂的Cmax为（36．01±6．25）μg／mL，AUCt为（204．50±57．46）μg·h／mL，AUCi为（220．15±59．51）μg·h／mL，受试试剂的Cmax为（33．08±9．05）μg／mL，AUCt为（201．20±54．14）μg·h／mL，AUCi为（220．39±62．86）μg·h／mL；TMP参比制剂的Cmax为（0．64±0．20）μg／mL，AUCt为（2．86±1．23）μg·h／mL，AUCi为（2．96±1．31）μg·h／mL，受试试剂的Cmax为（0．62±0．26）μg／mL，AUCt为（2．74±1．24）μg·h／mL，AUCi为（2．87±1．33）μg·h／mL。经方差分析和双单侧t检验，参比制剂与受试制剂中的sD与TMP均具有生物等效。

关键词：超高效液相色谱质谱联用生物等效性复方磺胺嘧啶混悬液等效区间

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荧光光谱法在半抗原-载体蛋白偶联物鉴定中的应用

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中国兽医杂志 2014年第7期50卷 81-83页

作者：张丽芳李伟岭江兆玲王米郑文丽薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部寄生虫病学重点开放实验室上海闵行区200241

对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物进行荧光光谱鉴定。结果显示,对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物的荧光光谱与其半抗原和载体蛋白相比均发生变化,苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白... 详细信息

对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物进行荧光光谱鉴定。结果显示,对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物的荧光光谱与其半抗原和载体蛋白相比均发生变化,苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物合成成功。研究表明,荧光光谱法是一种鉴定半抗原-载体蛋白偶联物的可行的方法。

关键词：荧光光谱半抗原-载体蛋白偶联物

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3-甲基喹噁啉-2-羧酸的制备及其细胞毒性

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中国兽医学报 2014年第7期34卷 1118-1123页

作者：张可煜郑海红班曼曼郑文丽李涛费陈忠薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 河南省动物卫生监督所河南郑州450008

通过贝鲁特反应和还原、脱羧反应在体外合成制备3-甲基喹噁啉-2-羧酸,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究3-甲基喹噁啉-2-羧酸对多种细胞的生长抑制作用,利用单细胞电泳研究其对细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对细... 详细信息

通过贝鲁特反应和还原、脱羧反应在体外合成制备3-甲基喹噁啉-2-羧酸,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究3-甲基喹噁啉-2-羧酸对多种细胞的生长抑制作用,利用单细胞电泳研究其对细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对细胞周期的改变。结果显示,体外成功合成制备出3-甲基喹噁啉-2-羧酸,而3-甲基喹噁啉-2-羧酸几乎没有抗菌效果,对多种细胞的生长抑制作用较弱,在剂量检测范围内细胞抑制率不到30%,但在一定剂量下能导致细胞DNA损伤,主要表现为尾长和尾部DNA含量显著升高;并且3-甲基喹噁啉-2-羧酸也能改变Chang细胞的细胞周期,表现为S期阻滞。结果表明,3-甲基喹噁啉-2-羧酸具有一定的细胞毒性。

关键词： 3-甲基喹噁啉-2-羧酸合成 DNA损伤细胞周期

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纳川珠利对鸡的亚慢性毒性试验

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中国兽医科学 2014年第3期44卷 326-330页

作者：范超薛飞群费陈忠林洋张可煜张丽芳王霄旸孟新宇王米郑文丽王春梅肖遂李涛冯丽珍中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫病学重点开放实验室上海200241 郑州市兽药饲料监察所河南郑州450003 郑州华信学院河南郑州451150

为进一步评估纳川珠利在靶动物临床应用中的安全性,在80只浦东黄羽肉鸡标准饲料中全程添加0、3、15、30mg/kg纳川珠利,观察它对鸡的临床表现和血液学指标的影响。结果显示,纳川珠利对鸡无不良临床反应;对鸡的血液生化指标无显著影响;试... 详细信息

为进一步评估纳川珠利在靶动物临床应用中的安全性,在80只浦东黄羽肉鸡标准饲料中全程添加0、3、15、30mg/kg纳川珠利,观察它对鸡的临床表现和血液学指标的影响。结果显示,纳川珠利对鸡无不良临床反应;对鸡的血液生化指标无显著影响;试验期间各组之间体重增重变化的差异无统计学意义(P>0.05);剖检时肉眼未见明显异常,但肝指数、脾指数和肺指数显著减小(P<0.05);用药后第28天,药物处理组红细胞浓度和红细胞压积显著增加(P<0.05),推测药物对育成期雏鸡的红细胞成熟分化可能有一定的促进作用。结果表明,纳川珠利对靶动物鸡的整体毒性较低,临床应用是安全的。

关键词：纳川珠利亚慢性毒性血液生化指标鸡

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饲料中氟腺呤含量HPLC检测方法的建立

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畜牧与兽医 2014年第6期46卷 23-26页

作者：吴昊张丽芳肖文龙张可煜薛飞群严明江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理与毒理实验室江苏南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点实验室中国农业科学院兽药安全评价及兽药残留重点开放实验室上海200241

建立了检测饲料中氟腺呤含量的高效液相色潽法。饲料中氟腺呤经甲醇提取,液液分配净化后,以40%乙腈溶液为流动相,在C18色谱柱上,紫外检测器（波长261 nm）下分离检测。方法的检测限为0.007 2 mg/mL,定量限为0.018 mg/mL。该方法线性关... 详细信息

建立了检测饲料中氟腺呤含量的高效液相色潽法。饲料中氟腺呤经甲醇提取,液液分配净化后,以40%乙腈溶液为流动相,在C18色谱柱上,紫外检测器（波长261 nm）下分离检测。方法的检测限为0.007 2 mg/mL,定量限为0.018 mg/mL。该方法线性关系良好,在添加浓度范围内,氟腺呤的平均回收率为85.7%-99.2%,相对标准偏差为1.9%-3.8%。经验证该方法快速简便,准确性和重现性良好。

关键词：高效液相色谱饲料氟腺呤检测

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超高效液相色谱法测定鸡组织中妥曲珠利及其代谢物的残留量

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中国家禽 2013年第21期35卷 31-35页

作者：江兆玲薛飞群张崇肖遂费陈忠王霄旸郑文丽王春梅王米张可煜李涛张丽芳中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

为建立同时检测鸡肌肉、肝脏和肾脏中妥曲珠利及其代谢物妥曲珠利砜和妥曲珠利亚砜残留量的超高效液相色谱方法，采用乙腈作提取溶剂，过固相萃取小柱净化，超高效液相色谱仪进行检测。结果显示，3种药物在3种组织的线性、精密度、准确... 详细信息

为建立同时检测鸡肌肉、肝脏和肾脏中妥曲珠利及其代谢物妥曲珠利砜和妥曲珠利亚砜残留量的超高效液相色谱方法，采用乙腈作提取溶剂，过固相萃取小柱净化，超高效液相色谱仪进行检测。结果显示，3种药物在3种组织的线性、精密度、准确性、特异性和稳定性良好。其中，3种药物的回收率均在81．6％～110．0％，日内相对标准偏差均小于19．0，日间相对标准偏差均小于18．3％。妥曲珠利、妥曲珠利砜和妥曲珠利亚砜在肌肉和肝脏中的检测限分别为10、10和15μg／kg，在肾脏中检测限分别为25、25和37．5μg／kg，在3种组织中定量限分别为50、50和75μg／kg，经稳定性试验表明样品稳定、方法可靠。本研究建立了同时检测鸡肌肉、肝脏和肾脏组织中妥曲珠利及其代谢物的超高效液相色谱检测方法，该方法准确可靠，重现性好，完全能满足残留检测的要求。

关键词：妥曲珠利妥曲珠利砜妥曲珠利亚砜残留测定超高效液相色谱

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硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放度的测定

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南方农业学报 2013年第2期44卷 312-317页

作者：陆泳良王霄旸郭沛费陈忠薛飞群方炳虎华南农业大学兽医学院广州510642 中国农业科学院上海兽医研究所/中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

【目的】建立硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放度的测定方法,为控制肠溶缓释颗粒剂的质量及提高硝唑沙奈(NTZ)治疗畜禽肠道疾病的效果提供参考依据。【方法】采用转篮法[转速75r/min,温度(37.0±0.5)℃,释放介质前2h为750mL2%十六烷基... 详细信息

【目的】建立硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放度的测定方法,为控制肠溶缓释颗粒剂的质量及提高硝唑沙奈(NTZ)治疗畜禽肠道疾病的效果提供参考依据。【方法】采用转篮法[转速75r/min,温度(37.0±0.5)℃,释放介质前2h为750mL2%十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)0.1mol/mLHCl溶液,后加入250mL2%CTAB0.2mol/mL磷酸盐缓冲溶液,pH6.8,总体积1000mL]进行硝唑沙奈肠溶缓释颗粒的溶出试验,分别在不同时间点取样,以高效液相色谱—紫外检测(HPLC-UV)法测定峰面积,计算硝唑沙奈的体外累积释放度,并对释药模型进行拟合。【结果】硝唑沙奈及替唑尼特在2%CTAB0.1mol/mLHCl和2%CTAB磷酸盐缓冲液(pH6.8)两种介质中的理论塔板数均大于3000,分离度均大于2.0。精密度试验、重复性试验、稳定性试验、回收率试验、释放度均一性试验等均表明,HPLC-UV法适用于硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放度的测定。硝唑沙奈肠溶缓释颗粒在前2h内的累积释放量<10.0%,至24h时释放度大于90.0%,符合药品释放度检测要求。硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放的最佳拟合模型为Higuchi模型。【结论】HPLC-UV法是测定硝唑沙奈肠溶缓释颗粒体外释放度的有效方法,具有准确可靠、重复性良好、回收率高的特点。

关键词：硝唑沙奈肠溶缓释颗粒释放度高效液相色谱-紫外检测法 Higuchi模型

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脱二氧喹烯酮的制备及其细胞毒性研究

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动物医学进展 2013年第11期34卷 60-65页

作者：张可煜班曼曼郑文丽王米郑海红薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 河南省动物卫生监督所河南郑州450008

脱二氧喹烯酮为喹烯酮主要代谢物之一,了解脱二氧喹烯酮的安全性对喹烯酮的安全性评价具有重要意义。为评价脱二氧喹烯酮的药效及安全性,本研究探索体外合成制备脱二氧喹烯酮,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究脱二氧喹烯酮... 详细信息

脱二氧喹烯酮为喹烯酮主要代谢物之一,了解脱二氧喹烯酮的安全性对喹烯酮的安全性评价具有重要意义。为评价脱二氧喹烯酮的药效及安全性,本研究探索体外合成制备脱二氧喹烯酮,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究脱二氧喹烯酮对Vero、HepG2、Chang Liver和L-02等多种细胞生长的抑制作用,利用单细胞电泳研究其对Chang Liver和L-02细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对Chang Liver和L-02细胞周期的改变。结果显示,体外成功合成制备出脱二氧喹烯酮,而脱二氧喹烯酮对各种细胞都具有较弱的生长抑制作用,其剂量检测范围内细胞抑制率均不到50%,但在较高剂量下脱二氧喹烯酮能导致细胞DNA损伤,主要表现为尾长和尾部DNA含量显著升高;并且脱二氧喹烯酮还改变Chang Liver细胞周期,表现为S期阻滞。说明脱二氧喹烯酮具有一定的细胞毒性。

关键词：脱二氧喹烯酮合成 DNA损伤细胞周期

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新三嗪化合物纳川珠利的小鼠亚急性毒性试验

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中国兽医科学 2013年第1期43卷 84-90页

作者：费陈忠张萍林洋李涛薛飞群张可煜张丽芳王霄旸孟新宇王米郑文丽中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫病学重点开放实验室上海200241 安信农业保险股份有限公司上海松江支公司上海201600 郑州市兽药饲料监察所河南郑州450003

为评价新三嗪类抗球虫药物纳川珠利的安全性,选用100只昆明小鼠,连续30d分别灌服4.8、19.2、76.8mg/kg的药物,以纯水和空白溶剂为对照,通过临床观察、血液学分析、血液生化检测、脏器系数和病理学检查,系统地评估了该化合物对小鼠的亚... 详细信息

为评价新三嗪类抗球虫药物纳川珠利的安全性,选用100只昆明小鼠,连续30d分别灌服4.8、19.2、76.8mg/kg的药物,以纯水和空白溶剂为对照,通过临床观察、血液学分析、血液生化检测、脏器系数和病理学检查,系统地评估了该化合物对小鼠的亚急性毒性作用。结果显示,试验期间无小鼠死亡,在开始用药1周内,高剂量组小鼠有轻微临床毒性症状,2周后症状消失。试验过程中各组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05),长期高剂量给药后小鼠心和肝的脏器系数明显改变(P<0.05),血液红细胞、碱性磷酸酶、肌酐明显增高和葡萄糖、胆固醇、尿酸显著降低(P<0.05),高剂量组肝、肾小部分发生轻微水样变性、点状坏死等病理改变,停药15d后,碱性磷酸酶和尿酸水平与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。提示纳川珠利长期大剂量使用可能存在肝、肾等轻微损伤的风险,但损伤是可逆的,停药后短期可逐渐恢复,临床使用相对安全。

关键词：三嗪化合物亚急性毒性小鼠

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