检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2010年第5期32卷 24-26页

作者：杨峰昆张丽芳费陈忠薛飞群王从丛韩春周中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241 南京农业大学动物医学院江苏南京210018 河北科技大学化学与制药工程学院河北石家庄050018

选用超声法、渗漉法以及水煎法提取白头翁药效组分,超声法和渗漉法采用L9(34)正交设计。在试验前进行柔嫩艾美耳球虫卵囊毒力测定试验,建立鸡感染模型。通过比较存活率、相对增重率、盲肠病变值、卵囊值和抗球虫指数(ACI)以及药效指数... 详细信息

选用超声法、渗漉法以及水煎法提取白头翁药效组分,超声法和渗漉法采用L9(34)正交设计。在试验前进行柔嫩艾美耳球虫卵囊毒力测定试验,建立鸡感染模型。通过比较存活率、相对增重率、盲肠病变值、卵囊值和抗球虫指数(ACI)以及药效指数来判定白头翁提取物的抗球虫效果。结果发现每只鸡感染8万孢子化卵囊效果较理想;超声提取物UEb、UEc、UEd组相对增重率较高,分别为99.6%、101.6%、100.6%,均明显高于感染对照;所有提取物中超声提取物UEb的ACI最高,为165.6,感染对照ACI值仅为77.9。

关键词：白头翁提取物鸡球虫病药效试验

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两种三嗪类新化合物抗鸡球虫病的药效学研究

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中国动物传染病学报 2012年第6期20卷 51-55页

作者：张德鹏薛飞群张可煜王霄旸范超费陈忠中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

为确证两种新三嗪类化合物40967和40968对鸡柔嫩艾美耳球虫病的防治效果、有效剂量和与现有药物地克珠利的交叉耐药性,采用抗鸡柔嫩艾美尔球虫笼养试验模型和抗球虫活性指数、病变记分减少率、最适抗球虫活性百分率等指标,评价两新化合... 详细信息

为确证两种新三嗪类化合物40967和40968对鸡柔嫩艾美耳球虫病的防治效果、有效剂量和与现有药物地克珠利的交叉耐药性,采用抗鸡柔嫩艾美尔球虫笼养试验模型和抗球虫活性指数、病变记分减少率、最适抗球虫活性百分率等指标,评价两新化合物的药效。结果显示,新三嗪类化合物40967的添加剂量3 mg/kg以上,40968的添加剂量10 mg/kg以上时,对敏感株的抗球虫活性可以稳定在高效水平;40967和40968在1 mg/kg和3 mg/kg剂量水平时显示与地克珠利有不同程度的交叉耐药性,但当用药剂量提高到10 mg/kg时40967与地克珠利显示无交叉耐药。该结果为球虫病的防治和新三嗪类药物的开发提供依据。

关键词：鸡球虫病抗球虫药新三嗪类化合物防治效果

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鸡球虫病药物防治的研究现状

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中国动物传染病学报 2011年第5期19卷 71-75页

作者：常晓辉薛飞群张丽芳中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

鸡球虫病是一种对养鸡业造成严重危害的寄生性原虫病,其防治已成为养鸡业的重要课题。目前,对鸡球虫病的防治主要还是依赖药物。本文综述了鸡球虫病药物防治的研究现状,主要阐述了聚醚类载体抗生素、化学合成类抗球虫药研究情况,同时分... 详细信息

鸡球虫病是一种对养鸡业造成严重危害的寄生性原虫病,其防治已成为养鸡业的重要课题。目前,对鸡球虫病的防治主要还是依赖药物。本文综述了鸡球虫病药物防治的研究现状,主要阐述了聚醚类载体抗生素、化学合成类抗球虫药研究情况,同时分析了目前药物防治存在的问题,诸如耐药性、药物残留、防治费用支出较大等,最后简单综述了制定合理给药程序、开发中草药、应用疫苗免疫等解决方案与对策。

关键词：鸡球虫病抗球虫药合理给药中草药疫苗

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鸡粪中洛克沙胂和阿散酸对蔬菜及土壤中总砷残留的研究

鸡粪中洛克沙胂和阿散酸对蔬菜及土壤中总砷残留的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会

作者：姚秀娟王米孟新宇贺培益薛飞群江善祥中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】研究鸡粪中洛克沙胂和阿散酸对蔬菜及土壤中总砷残留的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙胂和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中种植生菜和菠菜,采用盆栽试验模拟不同污染程度的土壤,共设四个剂量组,每个剂量... 详细信息

【目的】研究鸡粪中洛克沙胂和阿散酸对蔬菜及土壤中总砷残留的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙胂和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中种植生菜和菠菜,采用盆栽试验模拟不同污染程度的土壤,共设四个剂量组,每个剂量组6个重复,每盆装土3kg,每kg土壤中分别添加鸡粪0g、5g、10g和20g,并应用氢化物-原子吸收分光光度法对各样品中总砷含量进行了测定。【结果】测得土壤pH为7.86,砷本底含量为8.44mg/kg。蔬菜和土壤样品校正曲线分别为y=0.0376x+0.0112,r=0.9978和y=0.0225x+7E-17,r=0.9974,回收分别为96.76-107.78%和95.56-108.89%,均符合定量分析方法学认证要求。添加鸡粪均能够提高两种蔬菜及土壤中总砷含量,与0g/kg鸡粪添加量相比,其它3个剂量组样品总砷含量呈显著(p<0.05)或极显著差异(p<0.01),不论添加含哪种砷鸡粪,生菜可食部分总砷残留量大于菠菜;在不可食部分中,添加含洛克沙砷鸡粪组,生菜总砷残留量大于菠菜,而添加含阿散酸鸡粪组规律则相反;在土壤中,均是添加含洛克沙胂鸡粪组总砷残留量高。我国食品卫生标准(GB4810-1994)规定蔬菜砷限量标准为:As≤0.5mg/kg(鲜重计)。生菜和菠菜可食部分换算成鲜重砷含量为0.062mg/kg,,生菜不可食部分中经换算成鲜重总砷最大含量为0.373mg/kg,低于0.5mg/kg,总砷含量符合食品卫生标准:菠菜不可食部分鸡粪添加量为20g/kg组经计算换算成鲜重为0.511 mg/kg和0.683 mg/kg,大于0.5mg/kg,超过我国食品卫生标准。国家土壤质量(GB15618-1995)二级标准规定pH≥7.5的水田土壤砷限制值为:As≤20 mg/kg,在本实验测得的土壤中总砷含量范围为7.01-9.04 mg/kg,最高含量也远低于20 mg/kg。【结论】蔬菜和土壤中总砷含量均与鸡粪添加量呈显著性相关,且随着鸡粪添加量的增加,总砷含量升高,与0g/kg鸡粪添加量组相比,其它3组差异达到显著甚至极显著水平。生菜与菠菜相比,生菜更容易富集砷。蔬菜可食部分和土壤中总砷含量均未超过我国相关的标准,但是菠菜最高鸡粪添加量组超过我国食品卫生标准,所以含砷高的畜禽粪便在蔬菜种植中应该慎重应用。

关键词：砷有机胂洛克沙胂阿散酸残留盆栽试验

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崇明岛养殖场土壤中四环素类抗生素残留的检测

崇明岛养殖场土壤中四环素类抗生素残留的检测

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会

作者：郑文丽李倩薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】为了解兽药及其代谢物在养殖场附近环境土壤中残留情况,以崇明岛养猪场为主要检测对象,采集崇明岛前卫村猪场附近的土壤,考察土壤中6种四环素类抗生素(土霉素、四环素、金霉素、4-差向土霉素、4-差向四环素、4-差向金霉素)残留... 详细信息

【目的】为了解兽药及其代谢物在养殖场附近环境土壤中残留情况,以崇明岛养猪场为主要检测对象,采集崇明岛前卫村猪场附近的土壤,考察土壤中6种四环素类抗生素(土霉素、四环素、金霉素、4-差向土霉素、4-差向四环素、4-差向金霉素)残留状况,评估和预测可能存在的兽药污染及其危害,初步建立环境兽药浓度的检测技术。【方法】建立了固相萃取的前处理方法,超高效液相色谱串联质谱的检测方法。土壤的前处理采用EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取,用MAX小柱纯化和富集,用2%甲酸水(含15%甲醇)洗脱进一步减小天然有机质的影响。采用乙腈和0.2%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,10min内分离6种抗生素。【结果】土壤中土霉素、四环素、金霉素、4-差向土霉素、4-差向四环素及4-差向金霉素残留量分别在检测限下至18.766、48.042、37.398、11.028、39.946、46.736mg/kg。检出的高浓度都在表层土壤中。【结论】猪养殖过程中喂食了四环素类抗生素,随粪便排出可在周围土壤中检测到。

关键词：固相萃取超高效液相色谱质谱四环素类抗生素

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用Hep G2细胞微核与RAPD方法评价喹烯酮及其主要代谢物的遗传毒性

用Hep G2细胞微核与RAPD方法评价喹烯酮及其主要代谢物的遗传毒性

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：张可煜王米费陈忠薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】喹烯酮作为我国广泛使用的喹噁啉药物之一其安全性问题已受到人们广泛关注。为进一步了解和评价喹烯酮及其主要代谢物脱二氧喹烯酮和喹噁啉-2-羧酸可能存在的遗传毒性及对喹烯酮临床应用的影响。【方法】运用细胞阻滞微核和RAP... 详细信息

【目的】喹烯酮作为我国广泛使用的喹噁啉药物之一其安全性问题已受到人们广泛关注。为进一步了解和评价喹烯酮及其主要代谢物脱二氧喹烯酮和喹噁啉-2-羧酸可能存在的遗传毒性及对喹烯酮临床应用的影响。【方法】运用细胞阻滞微核和RAPD方法评价喹烯酮及其代谢物脱二氧喹烯酮、喹噁啉-2-羧酸对Hep G2细胞的遗传毒性。细胞阻滞微核实验中喹烯酮和脱二氧喹烯酮和喹噁啉-2-羧酸设2.5、5、1 5、30.μmol/L 4个剂量组及1μg/ml丝裂霉素C阳性对照组,阴性对照为0.5%DMSO培养基,药物接触24h后在含3μg/ml细胞松弛素B的培养基中培养24h后收获细胞,用冷的高渗KCl处理后加入固定液(甲醇:冰醋酸为3:1)混匀滴片,自然干燥,10%Giemsa染色10min,镜检分析。RAPD分析中设5、15、30μmol/L 3个药物剂量组,以38条随机引物(GC含量≥60%),扩增产物取10μL于2%的琼脂糖也泳,分析扩增条带的多态性。【结果】2.5、5、15、30μmol/L喹烯酮及其代谢物30μmol/L脱二氧喹烯酮和喹噁啉-2-羧酸处理Hep G2细胞24h后,细胞的微核率及核分裂指数与对照组相比均显著增加(P<0.05),结果如图1所示。在RAPD研究的38条引物中,共有4条引物不产生扩增产物条带,2条引物产生弥散型扩增产物条带,12条引物的扩增产物条带多态性较丰富,其余引物扩增产物多态性差异不明显。在12条引物差异扩增条带中30μmol/L喹烯酮组和30μmol/L喹噁啉-2-羧酸组与对照组差异最明显,在OPB、OPC-1、OPC-9、OPC-11、OPC-17等引物产物中30μmol/L喹烯酮组产生新的高分子量条带,而30μmol/L喹噁啉-2-羧酸组往往高分子量条带丢失。脱二氧喹烯酮组产生的条带著异较小。【结论】喹烯酮能诱导Hep G2细胞产生微核,而代谢物脱二氧喹烯酮和喹噁啉-2-羧酸在高剂量时也能诱导微核轻微增加。而RAPD方法检测基因组稳定性时其检测限高于微核,只能高剂量时才能出现较明显的随机引物扩增著异。同时发现30μmol/L喹噁啉-2-羧酸有诱导随机引物高分子量条带减少的现象,是否为喹噁啉-2-羧酸对基因组的攻击所致有待于进一步研究。

关键词：喹烯酮代谢物微核遗传毒性

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有机砷对鸡肉组织、蔬菜、土壤中总砷残留规律的研究

有机砷对鸡肉组织、蔬菜、土壤中总砷残留规律的研究

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王米姚秀娟孟新宇薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】洛克沙砷和阿散酸是一类广泛应用于畜禽养殖业中有机砷类饲料添加剂,为了研究其对食品和环境中砷含量的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙砷和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中,采用盆栽试验模拟不同污染程... 详细信息

【目的】洛克沙砷和阿散酸是一类广泛应用于畜禽养殖业中有机砷类饲料添加剂,为了研究其对食品和环境中砷含量的影响。【方法】肉仔鸡饲料中添加推荐剂量的洛克沙砷和阿散酸,收集鸡粪作为有机肥施于土壤中,采用盆栽试验模拟不同污染程度的土壤种植生菜和菠菜,共设4个剂量组,每个剂量6个重复,每盆装土3Kg,每Kg土壤分别添加0g、5g、10g、20g鸡粪,采用氢化物-原子吸收分光光度法对各样品中总砷含量进行测定。【结果】（1）建立鸡肉组织、蔬菜和土壤中总砷含量的检测方法。首先用酸消解法对样品进行前处理,将各种形态的砷转化为可溶性的砷盐,用还原剂将全部砷还原为三价态的砷,然后采用氢化物-原子吸收分光光度法进行分析测定。其结果为砷在1-10 ng/ml范围内具有较好的线性关系（R>0.99）。（2）在各组织中,饲喂阿散酸和洛克沙砷肝脏中砷残留量最大（分别为0.3082mg/kg和0.5179mg/kg）,其次是心脏（分别为0.1121mg/kg和0.1797mg/kg）和肌胃（分别为0.0813mg/kg,和0.1286mg/kg）,胸肌（分别为0.09462 mg/kg和0.0599mg/kg）和腿肌（分别为0.0456 mg/kg和0.051 1 mg/kg）残留较少。停药一周后,砷残留量有了明显的降低,停药两周后,与空白对照组水平相当。（3）添加鸡粪均能够提高蔬菜及土壤中总砷含量,与0g/kg鸡粪添加量相比,3个剂量组样品总砷含量显著升高（p<0.05）;添加含有机砷鸡粪,生菜可食部分总砷残留量大于菠菜;在土壤中,均是添加含洛克沙砷鸡粪组总砷残留量高。蔬菜和土壤中总砷含量均与鸡粪添加量呈显著性正相关,两种蔬菜相比,生菜更容易富集砷。【结论】鸡肉组织中总砷含量与饲料中有机砷添加呈显著性相关,因此饲料中添加有机砷必须遵循休药期;蔬菜和土壤中总砷含量均与鸡粪添加量呈显著性相关,且随着鸡粪添加量的增加总砷含量升高,因此慎将含有机砷的鸡粪用于蔬菜种植,尤其是用于生菜种植。

关键词：有机砷鸡肉组织蔬菜土壤总砷

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柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王丛丛张可煜郑文丽王霄旸费陈忠李涛薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗... 详细信息

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗球虫药,而药物靶标的鉴定是其中一个重要策略。前期工作中,我们发现柔嫩艾美尔球虫中存在细胞凋亡现象,然而介导该细胞凋亡途径的球虫相关蛋白,尚未见国内外有相关报道。本试验通过柔嫩艾美尔球虫细胞凋亡途径相关蛋白的发现,为抗球虫药物的研制提供新的药物靶标。【方法】通过SEM电镜扫描,观察柔嫩艾美尔球虫经地克珠利处理后,亚细胞结构变化,确定球虫是否存在细胞凋亡现象;利用caspase不同抗体检测试剂盒,确定经地克珠利诱导后,所引发的细胞凋亡通路;通过NCBI BLAST工具,设计PCR保守引物,扩增序列;通过原核表达体系,表达扩增序列,检测该重组蛋白是否具有caspase活性。【结果】在透射电镜下,对照组***第二代裂殖子细胞核双层核膜结构完整,染色质均匀附着在核膜内侧面,且细胞内没有大的空泡。药物处理组***第二代裂殖子细胞核染色质明显减少、发生异染色质化,染色质固缩边集在核膜四周呈新月状小体,胞质中出现了大量的空泡,出现了类似多细胞生物的凋亡特征。使用Promega,不同Caspase活性检测试剂盒,我们发现,地克珠利处理后,相对对照组,Caspase-3活性提高了5倍以上,而Caspase-8活性两组基本相同。通过PCR,我们扩增得到680bp片段,该片段与刚体弓形虫caspase同源蛋白具有很高的同源性。利用大肠杆菌表达体系,我们得到了该片段的重组蛋白,经检测,该重组蛋白具有很高的Caspase-3活性。【结论】我们首次在球虫研究中,发现了caspase-3同源蛋白,为研制抗球虫药物提供了新的药物靶点。

关键词：球虫柔嫩艾美尔球虫 caspase蛋白

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地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫消减cDNA文库的构建

地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫消减cDNA文库的构建

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会

作者：周变华薛飞群王霄旸中国农业科学院上海兽医研究所/兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】地克珠利(Diclazuril)属三嗪苯乙晴化合物,具有高效、低毒、广谱的抗球虫效力,对感染鸡的六种重要的艾美耳球虫(堆型、巨型、柔嫩、布什、毒害和和缓)均有效,但是关于其抗球虫作用的分子机理还未见报道。为研究地克珠利抗鸡柔... 详细信息

【目的】地克珠利(Diclazuril)属三嗪苯乙晴化合物,具有高效、低毒、广谱的抗球虫效力,对感染鸡的六种重要的艾美耳球虫(堆型、巨型、柔嫩、布什、毒害和和缓)均有效,但是关于其抗球虫作用的分子机理还未见报道。为研究地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫作用的分子机制。【方法】本试验以罗曼优质黄羽蛋公雏口服感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,复制柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,***)感染动物模型。通过酶消化、离心沉淀、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等方法的联合应用提取***第二代裂殖子。利用抑制性消减杂交技术(SSH),构建地克珠利作用于第二代裂殖子的双向消减cDNA文库。以地克珠利作用后的第二代裂殖子为实验组,未用药物处理的第二代裂殖子为对照组构建消减cDNA文库(T1-H);以未用药物处理的第二代裂殖子为实验组,地克珠利作用后的第二代裂殖子为对照组,建消减cDNA文库(T2-H)。结合具有高通量筛选能力的cDAN芯片技术,对SSH克隆进行了杂交鉴定。通过实时荧光定量PCR对芯片杂交结果进行验证。【结果】成功提取得到纯净的第二代裂殖子,为后续试验提供了实验材料。经PCR鉴定,2个消减cDNA文库的重组率均为98%,大部分捅入片段都人于500bp。从构建好的2个消减cDNA文库中共挑取3000个克隆定制cDNA微阵列。芯片杂交试验分析后共获得881个差异表达基因克隆,其中从T1-H cDNA文库中获得532个,T2-H cDNA文库中获得268个。实时荧光定量PCR验证芯片杂交结果,上下调趋势相同,程度相似。【结论】本试验成功构建了地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫正反向消减cDNA文库,筛选出地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的差异表达基因,为揭示地克珠利抗球虫的药物作用机理提供了理论依据,这一结果将为进一步开展地克珠利抗球虫分子机理的研究奠定了基础。

关键词：柔嫩艾美耳球虫(E.tenella) 地克珠利作用机理抑制性消减杂交技术 DNA微阵列技术

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柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

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中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会

作者：王丛丛张可煜郑文丽王霄旸费陈忠李涛薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

[目的]作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失.目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗球虫... 详细信息

[目的]作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失.目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗球虫药,而药物靶标的鉴定是其中一个重要策略.

关键词：球虫柔嫩艾美尔球虫 caspase蛋白

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