检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2020年第6期28卷 92-95页

作者：周勇志 Mungunsar Chuluun 曹杰张厚双吴辉文蒋春青周金林中国农业科学院上海兽医研究所农业农村部动物寄生虫学重点实验室上海200241 杭州维亿贸易有限公司杭州318000

硅藻土惰性粉是一种不产生抗性的物理杀虫剂,已应用于某些植物害虫和粮食仓储害虫的杀灭,但对媒介硬蜱的杀灭效果还没有报道。本研究通过喷洒硅藻土惰性粉,分别对不同发育阶段的长角血蜱和亚洲璃眼蜱进行杀灭实验,观察蜱的死亡情况。结... 详细信息

硅藻土惰性粉是一种不产生抗性的物理杀虫剂,已应用于某些植物害虫和粮食仓储害虫的杀灭,但对媒介硬蜱的杀灭效果还没有报道。本研究通过喷洒硅藻土惰性粉,分别对不同发育阶段的长角血蜱和亚洲璃眼蜱进行杀灭实验,观察蜱的死亡情况。结果发现硅藻土惰性粉对二种硬蜱的幼蜱和若蜱均具有一定杀灭作用,但对成蜱无效。本研究结果为消杀环境和畜禽圈舍中幼蜱和若蜱提供了一个可选的绿色环保方法。

关键词：硅藻土蜱防治

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波形蛋白在病原体感染宿主细胞中作用机制研究进展

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中国动物传染病学报 2024年

作者：杨雪松刘展董辉瑞派宠物医院管理股份有限公司中国农业科学院上海兽医研究所农业农村部动物寄生虫学重点实验室

波形蛋白（Vimentin）是细胞骨架的必需成分之一，是一种具有保守结构域的III型中间丝蛋白。已有研究发现，波形蛋白是病毒、细菌、寄生虫等多种病原体入侵、增殖、释放等感染过程中的关键蛋白，但其在不同的病原体中发挥的作用以及机... 详细信息

波形蛋白（Vimentin）是细胞骨架的必需成分之一，是一种具有保守结构域的III型中间丝蛋白。已有研究发现，波形蛋白是病毒、细菌、寄生虫等多种病原体入侵、增殖、释放等感染过程中的关键蛋白，但其在不同的病原体中发挥的作用以及机制有很大差异，这可能与病原体感染引起的细胞Vimentin蛋白分布、表达水平、磷酸化、可溶性等生物学特性的变化以及病原体是否与Vimentin发生互作等有关。本文对波形蛋白的分子结构、在病原体感染中功能以及作用机制的研究进展予以综述。

关键词：波形蛋白病原体感染受体重排磷酸化

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宿主GAPDH对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵细胞的影响

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畜牧兽医学报 2019年第10期50卷 2088-2096页

作者：王璐朱顺海赵其平黄兵韩红玉刘桂玲李志行赵焕之董辉中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241 上海师范大学生命与环境科学学院上海200234

目前,关于宿主细胞应对球虫感染机制的研究极其有限。在前期研究中,我们利用相对和绝对定量同位素标记技术结合液相色谱串联质谱技术分析了感染柔嫩艾美耳球虫子孢子72 h后鸡胚成纤维(CEF)细胞的蛋白质组表达变化,作者拟进一步研究其中... 详细信息

目前,关于宿主细胞应对球虫感染机制的研究极其有限。在前期研究中,我们利用相对和绝对定量同位素标记技术结合液相色谱串联质谱技术分析了感染柔嫩艾美耳球虫子孢子72 h后鸡胚成纤维(CEF)细胞的蛋白质组表达变化,作者拟进一步研究其中一个上调蛋白——甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵细胞的影响。克隆鸡GAPDH基因并构建原核重组质粒pGEX-4T-1-GAPDH,表达重组GAPDH蛋白,用Western blot对表达进行验证。使用q-PCR、Western blot和免疫组织化学的方法检测感染柔嫩艾美耳球虫子孢子后DF-1细胞中GAPDH的表达量,并使用抗体抑制试验检测GAPDH多克隆抗体对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵细胞的影响。结果显示:成功克隆1 123 bp的GAPDH基因,并获得61.7 ku的重组GAPDH蛋白。q-PCR和免疫组织化学检测均显示,GAPDH在柔嫩艾美耳球虫子孢子感染的DF-1细胞中的表达显著升高。抗体抑制试验表明,与相同浓度的正常兔IgG相比,50、100、200、300和400μg·mL-1的抗GAPDH抗体均能明显抑制子孢子的入侵。以上结果表明,子孢子感染会引起宿主细胞GAPDH蛋白的上调,并且宿主GAPDH蛋白在子孢子入侵过程中起正调控作用。

关键词：球虫病艾美耳球虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶入侵

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微小隐孢子虫E2F样结构域包含转录因子CpELD基因的原核和真核表达

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动物医学进展 2021年第5期42卷 50-57页

作者：陈宇米荣升龚海燕程龙王旭韩先干黄燕陈兆国中国农业科学院上海兽医研究所农业农村部动物产品质量安全生物性危害因子风险评估实验室农业农村部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为了实现微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)E2F样结构域包含转录因子编码基因cpeld的原核和真核表达,设计2对特异性引物,以***卵囊cDNA为模板,PCR扩增得到cpeld基因,将其分别插入pET32a和p3XFLAG-CMV14载体。同时设计引物,扩增微小... 详细信息

为了实现微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)E2F样结构域包含转录因子编码基因cpeld的原核和真核表达,设计2对特异性引物,以***卵囊cDNA为模板,PCR扩增得到cpeld基因,将其分别插入pET32a和p3XFLAG-CMV14载体。同时设计引物,扩增微小隐孢子虫类钙调蛋白(*** calmoduin-like proteins)的编码基因CpCML,插入pcmv-HA载体。将鉴定正确的重组质粒分别转入BL21(DE3)和293T细胞进行表达,Western blot观察重组蛋白的反应原性。结果显示,成功构建了重组原核表达质粒pET32a-cpeld和真核表达质粒p3XFLAG-CMV14-cpeld以及pcmv-HA-CML;SDS-PAGE显示,重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达出了分子质量约为55 ku的重组蛋白;Western blot分析显示,原核表达的重组蛋白能与鼠抗His单克隆抗体,真核表达重组CpELD和CpCML蛋白能分别与抗FLAG和HA单克隆抗体反应。结果表明,成功实现了cpeld基因的原核和真核表达以及CpCML基因的真核表达,表达产物具有良好的反应原性,为后续开展隐孢子虫CpELD和CpCML的功能和作用机制研究、新型的防控技术研发奠定了基础。

关键词：微小隐孢子虫 cpeld基因 CpCML基因原核表达真核表达

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日本血吸虫Wnt受体蛋白SjFz5在不同发育阶段的组织定位及mRNA表达水平分析

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中国预防兽医学报 2012年第8期34卷 591-596页

作者：信彩岩王孝波冯新港高阳石耀军杨健美王立群苑纯秀东北农业大学生命科学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为研究日本血吸虫(Sj)Wnt信号分子受体SjFz5(Frizzled5)在Sj生长发育中的作用,本实验对其在不同发育阶段的mRNA转录水平及组织分布进行了检测,并采用定量PCR方法比较SjFz5基因在Sj不同发育阶段间的mRNA水平差异。以7 d童虫cDNA为模板,扩... 详细信息

为研究日本血吸虫(Sj)Wnt信号分子受体SjFz5(Frizzled5)在Sj生长发育中的作用,本实验对其在不同发育阶段的mRNA转录水平及组织分布进行了检测,并采用定量PCR方法比较SjFz5基因在Sj不同发育阶段间的mRNA水平差异。以7 d童虫cDNA为模板,扩增SjFz5基因编码胞外区CRD(Cystein rich domain)的基因片段,构建pET-SjFz5-CRD表达重组质粒进行原核表达。以纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并进行SjFz5蛋白的组织定位。结果显示:SjFz5基因mRNA在发育早期表达水平相对较高,其中7 d童虫中表达量最高,13 d和18 d童虫下调了约1/3。23 d及其后雌雄虫的表达水平继续下调,雄虫下调比雌虫略显缓慢。整个成虫阶段SjFz5 mRNA维持在一个相对较低的水平。免疫组化结果显示SjFz5蛋白在虫体组织中分布广泛,其中雌雄虫生殖器官组织中的分布最为明显。随着卵巢和睾丸的逐步发育,SjFz5蛋白的量也呈现增加的趋势。SjFz5 mRNA在7 d童虫内表达量最高,SjFz5蛋白在雌雄生殖器官组织中分布最为明显,提示其介导的Wnt信号通路可能参与调节童虫阶段的细胞增殖、器官分化,并可能调节两性生殖细胞的发育。

关键词：日本血吸虫 Wnt SjFz5 发育免疫组化

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腹泻性贝类毒素大田软海绵酸液态芯片检测方法的建立

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海洋环境科学 2012年第2期31卷 263-267页

作者：汪卿柳俊秀王权胡乐琴沈伟贾睿蔡春尔何培民上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

利用间接竞争法免疫学原理,以自制的大田软海绵酸(okadaic acid,OA)与卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)的偶联物OA-OVA包覆微球为载体,同时自制生物化抗OA单克隆抗体,利用液态芯片(Luminex Xmap 200TM)系统建立OA液态芯片定量检测方法;同时测... 详细信息

利用间接竞争法免疫学原理,以自制的大田软海绵酸(okadaic acid,OA)与卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)的偶联物OA-OVA包覆微球为载体,同时自制生物化抗OA单克隆抗体,利用液态芯片(Luminex Xmap 200TM)系统建立OA液态芯片定量检测方法;同时测定了方法的灵敏性和特异性,并对贝类模拟样本进行了测试。结果显示:液态芯片法对OA的检测线性范围为0.2～63μg/L,最低检测值为0.129μg/L,均优于酶联免疫吸附法;除与DTX-1的交叉反应率为54.2%外,与其他几种用于检测的贝类毒素没有任何交叉现象;在加标浓度为6.25～400μg/L时,回收率为84.96%～90.35%,变异系数为3.20%～6.59%。因此,该方法可满足海产品中贝类样品OA限量标准检测。

关键词：腹泻性贝毒素软海绵酸芯片分析技术液态芯片

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抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备及免疫学特性分析

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免疫学杂志 2011年第9期27卷 809-811,815页

作者：胡乐琴柳俊秀王权何培民上海海洋大学水产与生命学院 201306 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

目的制备了赤潮毒素大田软海绵酸(okadaic acid,OA)单克隆抗体,并分析其免疫学特性。方法用人工抗原大田软海绵酸-小牛血清蛋白偶联物(OA-BSA)免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术经初筛、复筛和亚克隆,筛选到1株可稳定分泌抗OA单克隆抗体的... 详细信息

目的制备了赤潮毒素大田软海绵酸(okadaic acid,OA)单克隆抗体,并分析其免疫学特性。方法用人工抗原大田软海绵酸-小牛血清蛋白偶联物(OA-BSA)免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术经初筛、复筛和亚克隆,筛选到1株可稳定分泌抗OA单克隆抗体的杂交瘤细胞株3H4。对抗体效价、亚型、特异性、敏感性进行免疫学鉴定与分析。结果抗体亚型为IgG2b;腹水效价为1∶1.28×106;50%抑制质量浓度为2.852 ng/ml;最低检测限为0.45 ng/ml;电泳结果显示抗体,由1条重链和1条轻链组成;与OA同系物PTX1、GYM、SPT1、YTX交叉反应率为0。结论制备的OA单抗效价和特异性均较好,可用于OA的免疫学检测。

关键词：赤潮毒素大田软海绵酸单克隆抗体间接ELISA 交叉反应

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磷酸化酵母葡聚糖抗氧化及免疫增强活性研究

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中国畜牧杂志 2015年第13期51卷 61-65页

作者：雷娜王米张赛奇杨锐乐薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫学病重点实验室上海200241

采用磷酸化修饰方法对酵母葡聚糖进行结构修饰。通过对1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）、超氧化物阴离子、羟自由基的清除试验，测定磷酸化酵母葡聚糖（pGSC）的抗氧化活性；通过对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖作用评价其细胞免疫增强活性。结... 详细信息

采用磷酸化修饰方法对酵母葡聚糖进行结构修饰。通过对1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）、超氧化物阴离子、羟自由基的清除试验，测定磷酸化酵母葡聚糖（pGSC）的抗氧化活性；通过对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖作用评价其细胞免疫增强活性。结果表明：pGSC对DPPH、超氧化物阴离子、羟自由基的清除率均随着pGSC的浓度的增加而增加，在浓度为5mg／mL时，对3种自由基的清除率分别为58．99％、76．25％、62．3％。表明pGSC对3种自由基均有较好的清除作用，表现出了较好的抗氧化活性。在0．5～4mg／mL的浓度范围内，与对照组相比，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖（As70）差异不显著（P〉0．05）；但pGSC浓度为0．5mg／mL时，其A570比对照组可提高4．76％，表明pGSC具有一定的免疫增强活性。

关键词：磷酸化修饰酵母葡聚糖抗氧化活性免疫活性

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15种中药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

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黑龙江畜牧兽医 2015年第2期 163-165页

作者：张赛奇王米杨锐乐薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所/中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫学病重点实验室上海200241

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感... 详细信息

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感,抑菌圈直径分别为20.8,20.3 mm,其MIC值为7.813 mg/m L,抑菌效果最好;黄芩、黄柏、金银花呈中度敏感,其MIC值为31.25 mg/m L;而苦参、马齿苋、败酱草等不敏感,其MIC值为500 mg/m L,抑菌效果差。

关键词：中药大肠杆菌体外抑菌试验琼脂扩散法微量二倍稀释法抑菌圈最小抑菌浓度

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中药对猪源大肠杆菌O_8体外抑菌试验研究

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家畜生态学报 2015年第8期36卷 62-65页

作者：张赛奇王米雷娜杨锐乐薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所/中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室/农业部动物寄生虫学病重点实验室上海200241

为了探讨猪源大肠杆菌O8对黄连等10种中药的体外敏感性,采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法对10种中药水提物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连对大肠杆菌O8呈高度敏感,抑菌圈直径为21.3 mm,其MIC值为7.8... 详细信息

为了探讨猪源大肠杆菌O8对黄连等10种中药的体外敏感性,采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法对10种中药水提物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连对大肠杆菌O8呈高度敏感,抑菌圈直径为21.3 mm,其MIC值为7.813mg/mL,抑菌效果最好;黄芩、五倍子呈中度敏感,其MIC值为31.25mg/mL;而苦参不敏感,其MIC值为500mg/mL,抑菌效果差。

关键词：中药猪源大肠杆菌O8 体外抑菌试验最小抑菌浓度

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