检索结果-内蒙古大学图书馆

目的家畜是日本血吸虫病的主要保虫宿主,而可感染的家畜种类众多。为适应基层家畜血吸虫病筛查需要,研制针对多种动物的胶体金免疫层析试纸条(GICA法)。方法根据链球菌蛋白G(SPG)具有与多种动物的Ig G结合特性,设计重组蛋白G(r SPG)的基因序列,构建r SPG的原核表达质粒,亲和层析纯化重组蛋白,ELISA测定r SPG与不物种Ig G的亲和力。将r SPG进行胶体金标记,探索蛋白标记的最佳p H值和标记量,制备金标垫,分别用SEA和r SPG作为检测线和质控线,确定其最佳划线浓度与血清检测的最佳稀释度。用组装好的试纸条检测标准阴、阳性BALB/c鼠与新西兰大白兔血清,以及粪检阴、阳性的山羊血清、水牛血清,评估其敏感性和特异性;检测前后盘吸虫病牛血清、捻转血矛线虫病羊血清、东毕吸虫病羊血清评价其交叉反应性。用GICA法和ELISA法分别对不同感染强度的水牛血清进行检测。对人工感染的水牛阴、阳性血纸和从疫区采集的水牛血纸分别用GICA法和ELISA法进行检测,评估实际检测效果。结果获得了可溶性表达的r SPG,与四个物种Ig G亲和力与商品化链球菌蛋白G一致。胶体金标记r SPG的最佳p H值为5.0、最佳标记量为10μg/ml;检测线和质控线的最佳划线浓度均为0.5 mg/m L;血清检测最佳稀释度为1:20。研制的试纸条可用于日本血吸虫感染小鼠、新西兰大白兔、水牛、山羊血清抗体检测,检测感染小鼠与兔血清的敏感性、特异型均为100.0%。检测山羊、水牛血清的敏感性为100.0%,与ELISA法相同;检测山羊、水牛特异性为88.64%和94.23%,高于ELISA法的75.0%和84.62%。与前后盘吸虫、捻转血矛线虫、东毕吸虫感染血清交叉反应率分别为14.29%、16.67%、33.33%,低于ELISA法。在感染强度<20条/头时,GICA法的敏感性为75.0%,低于ELISA法的100.0%。在感染强度>20条/头时,GICA法和ELISA法的敏感性均为100.0%。对水牛血纸进评估时,对于实验室人工感染水牛血纸GICA法和ELISA法的敏感性和特异性均为100.0%,并且对疫区采集的水牛血纸进行检测时两种方法之间无统计学差异。结论成功表达了重组链球菌蛋白G,并研制出能检测多种家畜血吸虫病的胶体金免疫层析试纸条,其检测家畜血吸虫感染的灵敏度和特异度均较高。

关键词：人工感染胶体金免疫层析试纸条日本血吸虫病 SPG ELISA 感染强度羊血清

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

诊断家畜日本血吸虫病胶体金免疫层析试纸条的研制

诊断家畜日本血吸虫病胶体金免疫层析试纸条的研制

引用

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会

作者：许瑞赵登云陆珂李浩洪炀林矫矫朱传刚中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室

目的家畜是日本血吸虫病的主要保虫宿主,而可感染的家畜种类众多。为适应基层家畜血吸虫病筛查需要,研制针对多种动物的胶体金免疫层析试纸条(GICA法)。方法根据链球菌蛋白G(SPG)具有与多种动物的IgG结合特性,设计重组蛋白G(r SPG)的基... 详细信息

目的家畜是日本血吸虫病的主要保虫宿主,而可感染的家畜种类众多。为适应基层家畜血吸虫病筛查需要,研制针对多种动物的胶体金免疫层析试纸条(GICA法)。方法根据链球菌蛋白G(SPG)具有与多种动物的IgG结合特性,设计重组蛋白G(r SPG)的基因序列,构建r SPG的原核表达质粒,亲和层析纯化重组蛋白,ELISA测定r SPG与不物种Ig G的亲和力。将r SPG进行胶体金标记,探索蛋白标记的最佳p H值和标记量,制备金标垫,分别用SEA和r SPG作为检测线和质控线,确定其最佳划线浓度与血清检测的最佳稀释度。用组装好的试纸条检测标准阴、阳性BALB/c鼠与新西兰大白兔血清,以及粪检阴、阳性的山羊血清、水牛血清,评估其敏感性和特异性;检测前后盘吸虫病牛血清、捻转血矛线虫病羊血清、东毕吸虫病羊血清评价其交叉反应性。用GICA法和ELISA法分别对不同感染强度的水牛血清进行检测。对人工感染的水牛阴、阳性血纸和从疫区采集的水牛血纸分别用GICA法和ELISA法进行检测,评估实际检测效果。结果获得了可溶性表达的r SPG,与四个物种Ig G亲和力与商品化链球菌蛋白G一致。胶体金标记r SPG的最佳p H值为5.0、最佳标记量为10μg/ml;检测线和质控线的最佳划线浓度均为0.5 mg/mL;血清检测最佳稀释度为1:20。研制的试纸条可用于日本血吸虫感染小鼠、新西兰大白兔、水牛、山羊血清抗体检测,检测感染小鼠与兔血清的敏感性、特异型均为100.0%。检测山羊、水牛血清的敏感性为100.0%,与ELISA法相同;检测山羊、水牛特异性为88.64%和94.23%,高于ELISA法的75.0%和84.62%。与前后盘吸虫、捻转血矛线虫、东毕吸虫感染血清交叉反应率分别为14.29%、16.67%、33.33%,低于ELISA法。在感染强度<20条/头时,GICA法的敏感性为75.0%,低于ELISA法的100.0%。在感染强度>20条/头时,GICA法和ELISA法的敏感性均为100.0%。对水牛血纸进评估时,对于实验室人工感染水牛血纸GICA法和ELISA法的敏感性和特异性均为100.0%,并且对疫区采集的水牛血纸进行检测时两种方法之间无统计学差异。结论成功表达了重组链球菌蛋白G,并研制出能检测多种家畜血吸虫病的胶体金免疫层析试纸条,其检测家畜血吸虫感染的灵敏度和特异度均较高。

关键词：日本血吸虫病诊断 GICA SPG

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

两个山丘型疫区牛血吸虫病疫情动态纵向观察

引用

中国血吸虫病防治杂志 2012年第6期24卷 650-653页

作者：石耀军李浩陆珂董国栋毛光琼郭莉马坤高建新杨俊凯傅志强朱传刚杨健美金亚美苑纯秀程国锋冯新港林矫矫刘金明中国农业科学院上海兽医研究所、国家防治动物血吸虫病专业实验室、农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 云南省动物疫病预防控制中心四川省动物疫病预防控制中心云南省巍山县动物疫病预防控制中心四川省丹棱县动物疫病预防控制中心

目的了解山丘型血吸虫病疫区牛血吸虫病流行动态,为正确评估防治效果、制订防控对策提供参考依据。方法选择两个有代表性的山丘型疫区仁美和大仓作为观察点,采用毛蚴孵化法检查牛血吸虫感染情况,比较不同年龄牛感染率;入户调查家畜放牧... 详细信息

目的了解山丘型血吸虫病疫区牛血吸虫病流行动态,为正确评估防治效果、制订防控对策提供参考依据。方法选择两个有代表性的山丘型疫区仁美和大仓作为观察点,采用毛蚴孵化法检查牛血吸虫感染情况,比较不同年龄牛感染率;入户调查家畜放牧行为,每年4、9月调查野粪和钉螺分布及感染率。结果与1993年比较,2007年仁美和大仓观察点牛血吸虫感染率分别下降98.4%和93.8%;感染度亦呈下降态势,至2007年基本以低感染度为主。1995年以后仁美观察点野粪阳性率为0,大仓点至2007年处于较低徘徊状态;活螺密度和阳性螺密度呈下降趋势。结论山丘型血吸虫病流行区由于自然环境特殊,疫区往往呈点状或带状分布,加大查治病和扩大化疗力度可迅速降低血吸虫病疫情。要彻底阻断血吸虫病传播还必须加强钉螺孳生环境改造和家畜血吸虫病传染源管理。

关键词：血吸虫病牛纵向观察山丘型疫区

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白的原核表达、纯化和鉴定

引用

医学动物防制 2018年第7期34卷 671-675页

作者：江嘉欣王钊哲许瑞吴思敏李嘉静蔡爱群林矫矫洪炀陆珂李浩陈兆国石耀军朱传刚中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室上海200241 韶关学院英东生命科学学院

目的对猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析,构建Cap表达多表位的原核表达系统,并对表达的目的蛋白进行分析,为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础。方法设计并合成PCV2Cap基因,与PET-28a(+)载体连接后... 详细信息

目的对猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析,构建Cap表达多表位的原核表达系统,并对表达的目的蛋白进行分析,为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础。方法设计并合成PCV2Cap基因,与PET-28a(+)载体连接后并转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组质粒PET-28(a)-Cap,对重组质粒进行诱导表达获得重组蛋白,通过His亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果重组质粒在大肠杆菌中成功表达,蛋白质分子量约为17.4 k Da,与预期相符;Western blot结果显示,重组蛋白可以与猪圆环病毒阳性血清发生特异性结合。结论PCV2 Cap蛋白的表达纯化为圆环病毒血清抗体诊断方法的建立,进而为养殖场有效监控猪圆环病毒的免疫保护情况奠定基础。

关键词：猪圆环病毒 Cap蛋白表达纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胶体金免疫层析条诊断家畜日本血吸虫病的现场应用

引用

中国动物传染病学报 2009年第4期17卷 67-70页

作者：彭运潮邓灶福欧阳叙向石耀军谭胜国沈萍湖南生物机电职业技术学院长沙410127 中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

为评估快速胶体金免疫层析条(colloidal gold imunochromatography assay,GICA)诊断现场家畜日本血吸虫病的价值,以GICA法对来自湖南血吸虫病流行区和非流行区的山羊、水牛、黄牛血清进行检测,并和间接血凝法(indirect haemagglutinatio... 详细信息

为评估快速胶体金免疫层析条(colloidal gold imunochromatography assay,GICA)诊断现场家畜日本血吸虫病的价值,以GICA法对来自湖南血吸虫病流行区和非流行区的山羊、水牛、黄牛血清进行检测,并和间接血凝法(indirect haemagglutination test,IHA)及粪便孵化法的诊断结果进行比较。结果显示,GICA对流行区284只山羊、172头水牛和145头黄牛血清检测,阳性率分别为10.21%、8.14%、8.28%;对非流行区的30只山羊、25头水牛、17头黄牛检测,假阳性率分别为10%、12%和11.76%。GICA和IHA的诊断结果相比,阳性符合率分别为93.8%、100%、100%,阴性符合率分别为99.7%、98.9%、98.7%;GICA与粪便孵化法的诊断结果相比,阳性符合率均为100%,阴性符合率分别为94.6%、96.9%、94.3%。可见,GICA法快速、简便,可以代替现行的IHA和粪便孵化检查法,用于疫区家畜血吸虫病的筛查。

关键词：胶体金免疫层析条家畜日本血吸虫病诊断

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建

引用

中国血吸虫病防治杂志 2007年第4期19卷 252-256页

作者：贾人初孙毅刘金明苑纯秀傅志强石耀军陆珂孙焕李浩蔡幼民林矫矫上海师范大学生命与环境科学学院上海200234 中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室

目的构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础。方法用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头并用EcoR Ⅰ和H... 详细信息

目的构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础。方法用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头并用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ消化,使其两端分别带EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ黏性末端。用Mini Column纯化,收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoR和Hind末端的T7 Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。结果经测定,库容量为1.5×106pfu,扩增后文库滴度为1.1×1012pfu/ml。对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91%,阳性克隆片段长度分布在200-1500bp,其中有90%的插入片段〉300bp。结论成功构建了东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库。

关键词：日本血吸虫 T7噬菌体展示cDNA文库东方田鼠肺脏

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析

日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析

引用

上海市寄生虫学会2012学术年会

作者：洪炀李祥瑞林矫矫李学珍傅志强石耀军陆珂杨健美朱传刚苑纯秀李浩中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室上海200241 南京农业大学动物医学院南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室上海200241 南京农业大学动物医学院南京210095

克隆、表达日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(Sj TOM34),并对其生物特性进行初步研究.应用RT-PCR方法从42d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因,并进行生物信息学分析.应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫不同发育...

克隆、表达日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(Sj TOM34),并对其生物特性进行初步研究.应用RT-PCR方法从42d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因,并进行生物信息学分析.应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达状况.构建了SjTOM34基因重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,Western blotting分析了重组抗原的免疫原性及该蛋白在不同发育阶段虫体中的表达情况,利用免疫组化方法观察了该蛋白在虫体内的分布情况.获得了SjTOM34的基因序列,其开放阅读框(ORF)为1083bp.

关键词：

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析

日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析

引用

2012年全国农学博士后学术论坛

作者：洪炀李祥瑞林矫矫李学珍傅志强石耀军陆珂杨健美朱传刚苑纯秀李浩中国农业科学院上海兽医研究所，农业部动物寄生虫学重点开放实验室，国家防治动物血吸虫病专业实验室，上海 200241 南京农业大学动物医学院，南京 210095 中国农业科学院上海兽医研究所，农业部动物寄生虫学重点开放实验室，国家防治动物血吸虫病专业实验室，上海 200241 南京农业大学动物医学院，南京 210095

背景：线粒体的外膜转运酶通过主动运输的方式将这些线粒体前体蛋白运输到线粒体内，在线粒体前体蛋白进入线粒体的过程中发挥着重要的作用。日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因（SjTOM34）可能对其生长发育具有重要作用。方法：应用RT-... 详细信息

背景：线粒体的外膜转运酶通过主动运输的方式将这些线粒体前体蛋白运输到线粒体内，在线粒体前体蛋白进入线粒体的过程中发挥着重要的作用。日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因（SjTOM34）可能对其生长发育具有重要作用。方法：应用RT-PCR方法从42d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因，并进行生物信息学分析。应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达状况。构建了SjTOM34基因重组原核表达质粒，并在大肠杆菌中进行表达，Western blotting分析了重组抗原的免疫原性及该蛋白在不同发育阶段虫体中的表达情况，利用免疫组化方法观察了该蛋白在虫体内的分布情况。结果：获得了SjTOM34的基因序列，其开放阅读框（ORF）为1083bp。该基因在所检测的不同发育阶段童虫和成虫中均有表达，其中在35d虫体中的表达量略高于其他时期的虫体。成功构建了重组的原核表达质粒并且在大肠杆菌中获得表达，重组蛋白在上清和沉淀中都有存在，并且具有较好的免疫原性，在所检测的各时期虫体中均可检测到该蛋白的存在，并且主要分布在虫体的实质组织中。结论与意义：获得了日本血吸虫SjTOM34基因，初步明确了该基因在日本血吸虫童虫和成虫中的表达情况，及在成虫中的分布，为进一步研究该基因的生物学功能及作用机制奠定了基础。

关键词：日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因基因克隆作用机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

18日龄日本血吸虫酵母双杂交cDNA文库的构建

引用

寄生虫与医学昆虫学报 2009年第4期16卷 208-212页

作者：李勉金亚美刘金明程国锋石耀军张龙现蔡幼民林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 河南农业大学牧医工程学院郑州450002

为揭示血吸虫生长发育机理，深入研究血吸虫与宿主、血吸虫雌雄虫之间蛋白质的相互关系，本研究选取血吸虫进入终末宿主体内18天时的虫体（发育成熟初期），采用Clontech Matchmaker技术成功构建日本血吸虫的酵母双杂交cDNA文库。该文... 详细信息

为揭示血吸虫生长发育机理，深入研究血吸虫与宿主、血吸虫雌雄虫之间蛋白质的相互关系，本研究选取血吸虫进入终末宿主体内18天时的虫体（发育成熟初期），采用Clontech Matchmaker技术成功构建日本血吸虫的酵母双杂交cDNA文库。该文库具有基因多样性和足够大的库容量，库容量为2．5×10^6pfu／mL，插入的双链cDNA片段的长度在0．25～2．0kb之间，文库重组比率为97．9％，具有良好的代表性。该文库的构建为筛选相互作用蛋白并进一步阐明其生理意义提供了基础。

关键词：日本血吸虫酵母双杂交 cDNA文库雌虫雄虫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：