检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2016年第3期24卷 55-59页

作者：王涛洪炀傅志强曹晓丹吕超窦雪峰许瑞韩倩贾秉光赵枝新林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

大鼠为日本血吸虫的非适宜宿主,而小鼠为日本血吸虫的适宜宿主。前期研究表明细胞凋亡影响了日本血吸虫在不同适宜性宿主体内的生长发育,然而血吸虫中存在哪些凋亡相关基因及凋亡通路?哪些凋亡相关基因可能影响血吸虫的生长发育相关文... 详细信息

大鼠为日本血吸虫的非适宜宿主,而小鼠为日本血吸虫的适宜宿主。前期研究表明细胞凋亡影响了日本血吸虫在不同适宜性宿主体内的生长发育,然而血吸虫中存在哪些凋亡相关基因及凋亡通路?哪些凋亡相关基因可能影响血吸虫的生长发育相关文献报道较少。本研究构建了日本血吸虫全基因组本地BLAST数据库,利用人的凋亡基因为索引搜索到了15个日本血吸虫凋亡相关基因。同时收集了大、小鼠来源32 d日本血吸虫,利用荧光定量PCR分析了32 d虫体中凋亡相关基因的表达情况,鉴定了大鼠和小鼠两种不同适宜性宿主来源32 d日本血吸虫差异表达的凋亡相关分子,为探讨日本血吸虫与不同适宜性宿主的相互作用机制提供了基础。

关键词：细胞凋亡凋亡基因本地BLAST

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不同保种时间及复苏代次弓形虫对小鼠致病性研究

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动物医学进展 2011年第6期32卷 55-59页

作者：曾艳波朱顺海韩红玉董辉姜连连赵其平马卫娇程军黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

为了评价液氮冻存不同时间后及在小鼠体内复苏不同代次的弓形虫速殖子感染小鼠致病性的研究,通过比较感染处理后的弓形虫小鼠健康及存活状况,筛选出更佳的液氮冻存时间和合适复苏代次,对于建立小鼠急性弓形虫感染模型及弓形虫致病机理... 详细信息

为了评价液氮冻存不同时间后及在小鼠体内复苏不同代次的弓形虫速殖子感染小鼠致病性的研究,通过比较感染处理后的弓形虫小鼠健康及存活状况,筛选出更佳的液氮冻存时间和合适复苏代次,对于建立小鼠急性弓形虫感染模型及弓形虫致病机理等具有重要意义。通过腹腔注射不同保种时间（2、4、6月）和不同复苏代次（1、2、3代）弓形虫速殖子,观察感染后小鼠健康状况及死亡情况,比较各种条件下弓形虫的致病性。结果表明,液氮冻存半年后经小鼠接种4 000个/鼠~16 000个/鼠,传代2代~3代后能得到毒力稳定的虫体,且达到最佳复苏状态。不同冻存时间对弓形虫速殖子的致病性有差异,为弓形虫急性感染模型及后续的药物筛选和致病机理研究奠定了一定的基础。

关键词：弓形虫速殖子保种时间复苏代次致病性

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细胞培养技术在鸡球虫研究中的应用

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动物医学进展 2011年第2期32卷 82-85页

作者：姜连连黄兵林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

球虫的细胞培养是球虫在体外合适的细胞体系中进行发育的过程,能让人们在"无控"和"透明"环境下研究抗球虫药物的作用机制和虫体发育机制等。目前,该技术已在球虫学研究中广泛应用,主要集中于细胞培养体系优化、抗... 详细信息

球虫的细胞培养是球虫在体外合适的细胞体系中进行发育的过程,能让人们在"无控"和"透明"环境下研究抗球虫药物的作用机制和虫体发育机制等。目前,该技术已在球虫学研究中广泛应用,主要集中于细胞培养体系优化、抗球虫制剂的疗效、虫体入侵相关蛋白功能研究以及检测手段的优化等方面。论文从以上几个方面综述细胞培养技术在鸡球虫学研究中的进展情况,以便更好地了解细胞培养在球虫研究中的重要性,为鸡球虫病防治提供更有效的研究工具。

关键词：细胞培养球虫发育

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柔嫩艾美耳球虫保守蛋白基因EtCHP40的分子特性研究

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复旦学报（自然科学版） 2021年第1期60卷 102-110页

作者：姚亚文赵其平朱顺海黄兵董辉黄文浩刘展于钰韩红玉中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241 上海师范大学生命与环境科学学院上海200234

鸡球虫病是由几种艾美耳球虫寄生鸡肠道引起的一种危害严重的寄生虫病.目前,球虫病的防治主要依赖于药物,但由于药物长期广泛使用使鸡球虫对药物产生了严重的耐药性.为研究鸡球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期利用RNA-sequence对... 详细信息

鸡球虫病是由几种艾美耳球虫寄生鸡肠道引起的一种危害严重的寄生虫病.目前,球虫病的防治主要依赖于药物,但由于药物长期广泛使用使鸡球虫对药物产生了严重的耐药性.为研究鸡球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期利用RNA-sequence对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株与敏感株进行了转录组分析,获得敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫保守蛋白40(EtCHP40)在马杜拉霉素耐药株表达显著上调.本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫保守蛋白40(EtCHP40)基因,并在原核表达系统中成功表达了重组蛋白(rEtCHP40).利用实时荧光定量PCR分析了该基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段以及不同虫株(耐药株和敏感株)的mRNA转录水平.结果显示EtCHP40基因在第二代裂殖子的mRNA转录水平最高;与敏感株相比,EtCHP40基因的mRNA转录水平在耐药株上调,且在马杜拉霉素耐药株的转录水平显著高于其他耐药株,另外发现在不同浓度的盐霉素作用下,随着药物浓度的升高,EtCHP40的mRNA转录水平也升高.间接免疫荧光定位结果表明该蛋白主要分布在子孢子的表面和顶端.因此,推测该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育和对药物产生耐药性的过程.

关键词：柔嫩艾美耳球虫保守蛋白生长发育耐药性

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日本血吸虫SjPRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析

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中国农业科学 2010年第4期43卷 835-841页

作者：韩宏晓彭金彪洪炀王欣之石耀军傅志强刘金明程国锋李祥瑞林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室南京农业大学动物医学院

【目的】克隆和表达日本血吸虫精氨酸甲基转移酶1(SjPRMT1)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7d童虫消减cDNA文库中,获得一个ES... 详细信息

【目的】克隆和表达日本血吸虫精氨酸甲基转移酶1(SjPRMT1)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7d童虫消减cDNA文库中,获得一个EST序列,经序列测定和生物信息学分析命名为SjPRMT1,以SjcDNA为模板,获得其全长cDNA。荧光实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫的表达情况。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,Western blotting检测重组蛋白的抗原性与免疫原性,利用重组抗原免疫小鼠评估其免疫保护效果。【结果】获得了SjPRMT1编码基因的全长cDNA,开放阅读框为660bp,编码219个氨基酸。荧光实时定量PCR分析该基因在18d童虫高表达,13和23d次之。获得了SjPRMT1重组蛋白,其具有良好的抗原性和免疫原性。在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得35.07%的减虫率和48.66%的肝脏减卵率。【结论】获得了日本血吸虫童虫期高表达的SjPRMT1基因的全长cDNA,成功构建了pET28a(+)-SjPRMT1重组质粒,该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。

关键词：日本血吸虫精氨酸甲基转移酶1 克隆免疫保护小鼠

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堆型艾美耳球虫早熟株和母株对8种抗球虫药的敏感试验

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安徽农业科学 2011年第34期39卷 21028-21030,21050页

作者：李婷赵其平董辉韩红玉孔春林姜连连朱顺海黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

[目的]探讨堆型艾美耳球虫早熟株和母株对常用抗球虫药的敏感性。[方法]选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西8种抗球虫药,进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)... 详细信息

[目的]探讨堆型艾美耳球虫早熟株和母株对常用抗球虫药的敏感性。[方法]选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西8种抗球虫药,进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标进行综合评定。[结果]堆型艾美耳球虫早熟株和母株均对地克珠利、氯苯胍、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感,对盐霉素轻度敏感,对二硝托胺不敏感。[结论]遗传背景相同的虫株,其药物敏感性也相同。

关键词：球虫堆型艾美耳球虫早熟株抗球虫药药物敏感性

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噬菌体展示日本血吸虫SSj14单抗的模拟抗原表位及其免疫保护性研究

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生物工程学报 2006年第1期22卷 119-124页

作者：王欣之傅志强黄劭鹏朱国强蔡幼民林矫矫中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海动物生物技术研究中心上海200232 扬州大学兽医学院扬州225009

为获得日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟抗原表位,研究其对日本血吸虫的免疫保护作用。用纯化的SSj14单抗筛选噬菌体随机12肽库,对33个克隆进行ELISA验证,获得30个阳性克隆,DNA序列分析表明这30个克隆分属11个多肽序列,分析比较发现这... 详细信息

为获得日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟抗原表位,研究其对日本血吸虫的免疫保护作用。用纯化的SSj14单抗筛选噬菌体随机12肽库,对33个克隆进行ELISA验证,获得30个阳性克隆,DNA序列分析表明这30个克隆分属11个多肽序列,分析比较发现这些多肽具有“H_NQ_X_S_PF_X_X_L_A_T”的相似基序。进而选取3个阳性单克隆及混合阳性噬菌体克隆进行Western_blotting实验,证明都有良好的抗原性。用它们免疫BALBc鼠,并攻击血吸虫尾蚴,观察免疫鼠抗血吸虫感染的保护效果和IL_12的变化,结果表明:筛选获得的噬菌体阳性克隆具有良好的免疫原性,能诱导免疫鼠产生高滴度的抗血吸虫的特异性抗体;和对照组鼠相比,免疫小鼠,分别获得13.84%～52.83%的减虫率,34.17%～65.47%的肝脏减卵率以及28.89%～73.78%的粪便减卵率;三次免疫之后,和对照组相比,免疫小鼠体内IL_12水平均有升高。为发展日本血吸虫疫苗提供了新思路、新途径。

关键词：日本血吸虫噬菌体展示 SSj14单抗模拟抗原白细胞介素12

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日本血吸虫平衡型核苷转运蛋白3基因(SjENT3)的RNA干扰研究

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复旦学报（自然科学版） 2021年第1期60卷 111-117页

作者：吴洛滨任雨琪秦芳林刘金明金亚美上海师范大学生命科学学院上海200234 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

血吸虫以雌雄合抱的方式生存,雌虫在合抱后才能发育成熟,雄虫通过某种非精子传递的机制调控血吸虫雌虫的生长发育,而成熟雌虫所产大量虫卵是血吸虫导致宿主严重病理损害和疾病再传播的根源,因此,了解雄虫对雌虫发育的调控对血吸虫的致... 详细信息

血吸虫以雌雄合抱的方式生存,雌虫在合抱后才能发育成熟,雄虫通过某种非精子传递的机制调控血吸虫雌虫的生长发育,而成熟雌虫所产大量虫卵是血吸虫导致宿主严重病理损害和疾病再传播的根源,因此,了解雄虫对雌虫发育的调控对血吸虫的致病和传播具有重要意义.本实验室前期蛋白质组学研究结果显示日本血吸虫ENT3蛋白(SjENT3)在两性感染的合抱雄虫体内的表达高于其在单性感染雄虫体内的表达.本研究通过qRT-PCR发现SjENT3基因在日本血吸虫虫体各个检测时间点均转录,从7d到21d逐渐升高,在21d转录水平达到最高,随后逐渐下降;SjENT3基因在18,21,25,28,35,42d在合抱雄虫体内转录水平明显高于合抱雌虫;对合抱雄虫与单性感染雄虫转录水平分析发现其在21d,23d,25d 3个检测时间点与蛋白质组学结果一致,在合抱雄虫体内高表达.利用筛选出效果较好的siRNA对SjENT3在血吸虫体内的转录进行长期干扰,结果发现:特异siRNA干扰显著影响SjENT3转录水平,和NC对照组相比,干扰引起宿主虫荷率下降24.44%(P<0.05),宿主肝脏荷卵率下降57.47%(P<0.01),干扰后雌虫肝产卵能力下降42.28%(P<0.01).本研究结果初步表明SjENT3基因参与日本血吸虫尤其是雄虫的生长发育,并可能与血吸虫雌雄虫合抱及其相互间信息传递有一定的关系.

关键词：日本血吸虫 SjENT3基因 qRT-PCR RNA干扰

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日本血吸虫mir-125b靶向调控宿主CD276的鉴定研究

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中国动物传染病学报 2017年第4期25卷 34-39页

作者：王立辉朱丽慧刘军涛夏天奇陈永军李建军程国锋天津农学院天津300384 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

通过荧光素酶实验验证宿主CD276为日本血吸虫mir-125b的靶基因,并分析感染血吸虫后宿主CD276基因在不同组织中的表达情况。利用PCR扩增mir-125b与CD276互作的核酸序列,并将目的片段克隆至表达荧光素酶报告基因质粒的下游。将重组质粒转... 详细信息

通过荧光素酶实验验证宿主CD276为日本血吸虫mir-125b的靶基因,并分析感染血吸虫后宿主CD276基因在不同组织中的表达情况。利用PCR扩增mir-125b与CD276互作的核酸序列,并将目的片段克隆至表达荧光素酶报告基因质粒的下游。将重组质粒转染到HEK293T细胞内,检测荧光素酶报告基因表达。进一步利用荧光定量PCR技术检测小鼠巨噬细胞在转染血吸虫mir-125b mimic后,靶基因CD276的表达情况,同时检测感染血吸虫不同时间段、小鼠不同组织中CD276的表达情况。荧光素酶实验表明转染mir-125b mimic和重组质粒后细胞的荧光素酶报告基因的表达极显著降低(P<0.01),提示mir-125b可与CD276相关区域互作,抑制报告基因的表达;血吸虫mir-125b mimic转染小鼠巨噬细胞后导致其宿主CD276基因的表达降低,进一步提示宿主CD276可能为血吸虫mir-125b靶基因;荧光定量PCR分析表明感染日本血吸虫后的不同感染时期,小鼠淋巴细胞、肝脏及脾脏中的CD276的表达水平显著低于对照组(P<0.01),进一步表明虫源性mir-125b在体内影响宿主CD276基因的表达。日本血吸虫mir-125b可能靶向调控宿主CD276基因的表达,在虫体与宿主互作中发挥重要调控功能。

关键词：日本血吸虫 mir-125b CD276 功能

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免疫信息学在抗原虫病疫苗研发中的应用进展

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中国人兽共患病学报 2010年第5期26卷 495-498,501页

作者：陈兆国冯新港米荣升黄燕林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241

进入新世纪以来,原虫的基因组计划取得了很大的进展。其中,恶性疟原虫(Plasmodiurn falciparum)、约氏疟原虫(*** yoelii)、微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)和人隐孢子虫(***)、硕大利什曼原虫(Leishmania major)、克氏锥虫(Trypa... 详细信息

关键词：原虫病免疫信息学疫苗研发微小隐孢子虫应用基因组计划恶性疟原虫约氏疟原虫

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