检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第3期26卷 228-233页

作者：邵东华(综述) 冯新港(审校) 中国农业科学院上海兽医研究所上海动物生物技术研究中心农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

细胞免疫在防御外来病原感染、自身免疫及肿瘤等疾病中发挥重要作用。随着分子免疫学研究的不断发展,对T淋巴细胞免疫分子机制的阐释,大量T细胞表位信息以及功能基因组学资料的积累,使得基于数据驱动的预测T细胞表位的研究受到重视,可... 详细信息

细胞免疫在防御外来病原感染、自身免疫及肿瘤等疾病中发挥重要作用。随着分子免疫学研究的不断发展,对T淋巴细胞免疫分子机制的阐释,大量T细胞表位信息以及功能基因组学资料的积累,使得基于数据驱动的预测T细胞表位的研究受到重视,可能成为疫苗研发的重要工具之一。本文概述辅助T细胞表位预测的理论和方法及其在寄生虫疫苗研发中的应用,并讨论未来的研究方向。

关键词：辅助T细胞表位预测疫苗寄生虫

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我国家畜血吸虫病流行情况及防控进展

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中国血吸虫病防治杂志 2019年第1期31卷 40-46页

作者：林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室国家动物血吸虫病参考实验室上海200241

本文介绍了我国家畜血吸虫病造成的危害及在血吸虫病传播中的作用;回顾了我国家畜血吸虫病的防控历程,及不同防控时期家畜血吸虫病流行情况;指出虽然我国家畜血吸虫病疫情已得到有效控制,但影响血吸虫病流行与传播的多种因素依然存在,... 详细信息

本文介绍了我国家畜血吸虫病造成的危害及在血吸虫病传播中的作用;回顾了我国家畜血吸虫病的防控历程,及不同防控时期家畜血吸虫病流行情况;指出虽然我国家畜血吸虫病疫情已得到有效控制,但影响血吸虫病流行与传播的多种因素依然存在,该病在局部地区仍有死灰复燃或疫情回升的风险。血防工作者需继续加强疫情监测和重点地区防治力度,巩固防控成果,突破消除家畜血吸虫病的关键技术难点,探讨提出精准防控技术措施和策略,推进我国消除血吸虫病进程。

关键词：家畜血吸虫病疫情消除传染源

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柔嫩艾美耳球虫含HD结构域蛋白特性和功能初步研究

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畜牧兽医学报 2022年第8期53卷 2608-2620页

作者：肖克陈婷赵其平朱顺海董辉刘曼玉于钰黄兵韩红玉中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。... 详细信息

鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫含HD域蛋白(Et HDCP)在耐药株中上调表达。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆出Et HDCP基因,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-Et HDCP,并成功诱导表达了重组蛋白r Et HDCP。利用qRT-PCR和Western blot对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段的转录和翻译水平进行分析,结果显示,Et HDCP在第二代裂殖子的转录和翻译水平高于其他三个阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子)。同时利用Western blot分析了Et HDCP在柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株中的翻译水平,结果显示,Et HDCP在耐药株中的蛋白翻译水平显著高于敏感株。间接免疫荧光定位结果显示,该蛋白主要定位在子孢子和裂殖子的表面以及裂殖子的胞质内。入侵抑制试验表明,抗r Et HDCP多克隆抗体可有效抑制子孢子对宿主细胞的入侵。这些结果说明该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育、耐药性的产生以及子孢子入侵宿主细胞的过程。

关键词：柔嫩艾美耳球虫含HD结构域蛋白入侵耐药性

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日本血吸虫dysferlin基因的克隆及重组蛋白免疫原性的分析

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中国兽医科学 2013年第6期43卷 599-604页

作者：熊雅念魏梅梅洪炀黄莉妮孟培培艾德宙韩艳辉傅志强林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为评估日本血吸虫dysferlin重组蛋白(rSjDF)的免疫原性,利用PCR技术扩增SjDF基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjDF,诱导表达重组蛋白rSjDF,并用重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗体。应用间接免疫荧光技术对SjDF进行蛋白组织定位。应用West... 详细信息

为评估日本血吸虫dysferlin重组蛋白(rSjDF)的免疫原性,利用PCR技术扩增SjDF基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjDF,诱导表达重组蛋白rSjDF,并用重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗体。应用间接免疫荧光技术对SjDF进行蛋白组织定位。应用Western-blot、ELISA及Bio-Plex悬液芯片技术检测重组蛋白诱导的免疫反应。间接免疫荧光试验表明SjDF主要分布于血吸虫体被表膜。Western-blot结果显示rSjDF能被该重组蛋白免疫小鼠血清识别,具有良好的免疫原性。rSjDF能诱导小鼠产生高水平的特异性IgG、IgG1、IgG2a抗体和IL-2、IL-4、IL-12p70、IL-10、IFN-g等细胞因子。结果表明,制备的重组抗原能刺激小鼠产生较强的免疫反应,为筛选新的血吸虫疫苗候选分子奠定了基础。

关键词：日本血吸虫 dysferlin 表膜蛋白基因克隆免疫应答

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日本血吸虫感染不同相容性动物宿主的比较研究

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中国人兽共患病学报 2012年第12期28卷 1207-1211页

作者：杨健美苑纯秀冯新港傅志强石耀军刘金明洪炀李浩陆珂林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

目的了解日本血吸虫感染不同动物宿主(包括天然宿主和实验动物宿主)后的虫体发育和宿主组织病理变化差异。方法以黄牛、水牛、山羊、BALB/c小鼠、Wistar大鼠和新西兰大白兔为对象,同一时间人工感染相同来源的日本血吸虫尾蚴,收集感染后... 详细信息

目的了解日本血吸虫感染不同动物宿主(包括天然宿主和实验动物宿主)后的虫体发育和宿主组织病理变化差异。方法以黄牛、水牛、山羊、BALB/c小鼠、Wistar大鼠和新西兰大白兔为对象,同一时间人工感染相同来源的日本血吸虫尾蚴,收集感染后相同日龄的虫体(49d),对虫体发育进行比较,对宿主的肝脏病变进行比较,并对黄牛、水牛和山羊的肝脏进行了病理切片的观察和比较。结果不同动物宿主来源的虫体的长度、宽度和发育情况存在着差异,总体来说是适宜宿主体内的虫体长度明显长于非适宜宿主体内的虫体长度,雌虫长于雄虫(Wistar大鼠来源的虫体例外)。发育情况除了Wistar大鼠来源的虫体未发育成熟,其余动物来源虫体均发育成成虫。6种动物宿主的肝脏病变存在很大的差异,适宜宿主感染后肝脏布满虫卵结节,病变尤其严重;而非适宜宿主的肝脏只有少量虫卵结节(水牛),或者几乎看不到虫卵结节(Wistar大鼠)。天然宿主肝脏病理观察发现,黄牛组和山羊组肝脏组织炎性细胞明显增多且聚集,虫卵周围有大量嗜酸性细胞浸润,多量炎性淋巴细胞聚集浸润,形成典型条纹状嗜伊红沉淀物;而水牛组的肝细胞无变性、无炎症细胞的聚集浸润,小叶结构完整。结论日本血吸虫对黄牛、山羊、BALB/c小鼠和新西兰大白兔的易感性高于水牛和Wistar大鼠,对前4种动物的致病性也强于后2种,本文为进一步了解日本血吸虫对不同终末宿主的感染差异提供了一些参考数据。

关键词：日本血吸虫天然宿主实验动物宿主发育病理

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日本血吸虫Sj CyclophilinA基因的克隆、表达及其生物学功能研究

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中国农业科学 2010年第7期43卷 1531-1538页

作者：彭金彪韩宏晓洪炀王欣之石耀军傅志强刘金明林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室

【目的】克隆和表达了日本血吸虫CyclophilinA(Sj CyPA)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,PCR扩增一ES... 详细信息

【目的】克隆和表达了日本血吸虫CyclophilinA(Sj CyPA)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,PCR扩增一EST序列的基因全长cDNA,提交到NCBI,登录号为GQ403666。应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达。诱导、表达、纯化和复性重组蛋白,测定其PPIase活性。利用Western blot检测重组蛋白的抗原性。以重组抗原免疫小鼠,评估其对小鼠诱导的免疫保护效果。【结果】PCR获得了Sj CyPA编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为519bp。荧光实时定量PCR分析表明,该基因在13d童虫表达量最高,为童虫期高表达基因。构建了重组表达质粒pET28a(+)-Sj CyPA,并在大肠杆菌中成功表达。复性重组蛋白具有PPIase活性。Western blot试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得18.72%的减虫率和44.6%的肝脏减卵率。【结论】获得了日本血吸虫童虫期高表达的Sj CyPA基因的全长cDNA,成功构建了Sj CyPA原核重组表达质粒,在大肠杆菌中成功表达,纯化复性得到有PPIase活性的Sj CyPA重组蛋白,并证实该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。

关键词：日本血吸虫 Cyclophilin A(CyPA) 克隆和表达 PPIase活性免疫保护效果

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日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析

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生物工程学报 2008年第9期24卷 1550-1555页

作者：周岩林矫矫姚利晓王欣之石耀军陆珂刘金明傅志强陶丽红中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室农业部动物寄生虫学重点开放实验室

磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基... 详细信息

磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基酸,理论分子量28.26kD,理论等电点7.01。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型PGAM家族特征,推测为血吸虫的PGAM基因,命名为SjPGAM(GenBank Accession ***374631)。实时定量PCR分析显示该基因在14d和19d童虫中的表达量明显高于其他发育阶段,42d雄虫中的表达量高于雌虫。构建了该基因的原核重组表达质粒pET-28a(+)-PGAM,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。SjPGAM基因及其表达产物的获得,为探索PGAM基因家族在血吸虫能量代谢过程中碳水化合物转运、新陈代谢调节和生长发育提供了重要基础。

关键词：日本血吸虫糖酵解磷酸甘油酸变位酶克隆

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日本血吸虫钙调神经磷酸酶B基因的克隆表达及表达产物的免疫保护效果的评估

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中国兽医科学 2014年第5期44卷 458-462页

作者：伍妙梨韩艳辉曹晓丹张旻马帅郭小勇李长健王馨茁洪炀陆珂林矫矫傅志强中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为掌握日本血吸虫钙调神经磷酸酶B亚基(CNB)特性并评估其作为候选疫苗分子的潜力,采用PCR方法扩增日本血吸虫CNB基因,构建重组质粒pET-28a(+)-CNB,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用His-Bind亲和层析纯化获得重组蛋白rCNB。Western-b... 详细信息

为掌握日本血吸虫钙调神经磷酸酶B亚基(CNB)特性并评估其作为候选疫苗分子的潜力,采用PCR方法扩增日本血吸虫CNB基因,构建重组质粒pET-28a(+)-CNB,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用His-Bind亲和层析纯化获得重组蛋白rCNB。Western-blot结果显示,rCNB能被该重组蛋白免疫小鼠血清识别,具有较好的免疫原性。免疫组织化学分析表明,CNB主要分布在日本血吸虫虫体的睾丸、卵巢等生殖器官中,在表膜中也有少量分布。用重组蛋白rCNB结合ISA206佐剂免疫BALB/c小鼠,结果 rCNB诱导小鼠产生了27.93%(P<0.05)的减虫率和42.93%(P<0.01)的肝减卵率。结果表明,日本血吸虫CNB具有一定的免疫保护效果,为深入研究日本血吸虫钙调神经磷酸酶的生物学功能奠定了基础。

关键词：日本血吸虫钙调神经磷酸酶B亚基基因组织定位免疫保护

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日本血吸虫14d童虫凋亡现象的观察

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中国兽医科学 2014年第6期44卷 558-562页

作者：郭小勇洪炀韩宏晓曹晓丹韩艳辉张旻傅志强朱传刚陆珂李浩林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为观察BALB/c小鼠源日本血吸虫14d童虫的细胞凋亡现象,分别采用TUNEL检测法和透射电子显微镜从DNA分子水平和细胞层面上进行定性观察,并应用FITC-Annexin-V/PI双染色法通过流式细胞仪定量检测虫体凋亡细胞比例。结果表明,采用这3种方法... 详细信息

为观察BALB/c小鼠源日本血吸虫14d童虫的细胞凋亡现象,分别采用TUNEL检测法和透射电子显微镜从DNA分子水平和细胞层面上进行定性观察,并应用FITC-Annexin-V/PI双染色法通过流式细胞仪定量检测虫体凋亡细胞比例。结果表明,采用这3种方法均能在日本血吸虫14d童虫中观察到一定程度的细胞凋亡现象,但不会导致日本血吸虫该时期童虫的异常生长发育。

关键词：日本血吸虫细胞凋亡透射电子显微镜 TUNEL法 FITC-Annexin-V/PI双染色流式细胞术

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毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建

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中国兽医科学 2008年第3期38卷 196-199页

作者：卞庆松韩红玉赵其平姜连连董辉闫晓菲张建哲黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库，用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA，采用SMART技术，在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA，经LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切，过CHROM... 详细信息

为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库，用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA，采用SMART技术，在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA，经LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切，过CHROMA SPIN-400^TM柱去除小于400bp的片段，与λTriplEx2^TM噬菌体载体连接，用GigapackⅢGold^TM载体蛋白包装，构建了cDNA噬菌体表达文库。经测定，原始文库容量为4．72×10^6pfu／mL，扩增后的文库容量为2．62×10^10pfu／mL，重组率为97．5％，插入片段为500～1100bp。证实，该文库质量良好，为毒害艾美球虫新基因的筛选、克隆及功能研究奠定了基础。

关键词：鸡球虫毒害艾美球虫孢子化卵囊 cDNA文库 SMART技术

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