检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学 2009年第4期21卷 579-583页

作者：陈晶林矫矫蔡幼民程国锋中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

近年来,血吸虫基因组、转录组、蛋白质组和分泌组研究广泛开展,迫切需要针对单个分子功能深入研究。开展血吸虫基因操作研究不仅可在虫体内深入研究基因功能,对进一步理解血吸虫生长发育机理和寄生生活特征具有重要意义,还可建立抗血吸... 详细信息

近年来,血吸虫基因组、转录组、蛋白质组和分泌组研究广泛开展,迫切需要针对单个分子功能深入研究。开展血吸虫基因操作研究不仅可在虫体内深入研究基因功能,对进一步理解血吸虫生长发育机理和寄生生活特征具有重要意义,还可建立抗血吸虫候选疫苗和药物靶标筛选的重要平台。为此,本文总结基因操作技术在血吸虫学中的应用并分析其现状。

关键词：血吸虫基因操作疫苗药物靶标

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寄生虫热激蛋白的研究进展

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生物技术通报 2009年第2期25卷 29-33页

作者：颜彦韩红玉黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

热激蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是所有原核生物和真核生物在发育过程中,或为适应不同环境中合成的一组起关键作用的蛋白质家族。为全面了解寄生虫热激蛋白的研究情况,介绍了热激蛋白的发现、功能、分类及寄生虫(原虫、线虫、吸虫)... 详细信息

热激蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是所有原核生物和真核生物在发育过程中,或为适应不同环境中合成的一组起关键作用的蛋白质家族。为全面了解寄生虫热激蛋白的研究情况,介绍了热激蛋白的发现、功能、分类及寄生虫(原虫、线虫、吸虫)热激蛋白(HSP70,HSP90,HSP60,sHSP)的研究进展,并对寄生虫热激蛋白的研究意义作了探讨。

关键词：寄生虫宿主热激蛋白

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大、小鼠来源32d日本血吸虫凋亡相关基因表达分析

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中国动物传染病学报 2016年第3期24卷 55-59页

作者：王涛洪炀傅志强曹晓丹吕超窦雪峰许瑞韩倩贾秉光赵枝新林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

大鼠为日本血吸虫的非适宜宿主,而小鼠为日本血吸虫的适宜宿主。前期研究表明细胞凋亡影响了日本血吸虫在不同适宜性宿主体内的生长发育,然而血吸虫中存在哪些凋亡相关基因及凋亡通路?哪些凋亡相关基因可能影响血吸虫的生长发育相关文... 详细信息

大鼠为日本血吸虫的非适宜宿主,而小鼠为日本血吸虫的适宜宿主。前期研究表明细胞凋亡影响了日本血吸虫在不同适宜性宿主体内的生长发育,然而血吸虫中存在哪些凋亡相关基因及凋亡通路?哪些凋亡相关基因可能影响血吸虫的生长发育相关文献报道较少。本研究构建了日本血吸虫全基因组本地BLAST数据库,利用人的凋亡基因为索引搜索到了15个日本血吸虫凋亡相关基因。同时收集了大、小鼠来源32 d日本血吸虫,利用荧光定量PCR分析了32 d虫体中凋亡相关基因的表达情况,鉴定了大鼠和小鼠两种不同适宜性宿主来源32 d日本血吸虫差异表达的凋亡相关分子,为探讨日本血吸虫与不同适宜性宿主的相互作用机制提供了基础。

关键词：细胞凋亡凋亡基因本地BLAST

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不同保种时间及复苏代次弓形虫对小鼠致病性研究

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动物医学进展 2011年第6期32卷 55-59页

作者：曾艳波朱顺海韩红玉董辉姜连连赵其平马卫娇程军黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

为了评价液氮冻存不同时间后及在小鼠体内复苏不同代次的弓形虫速殖子感染小鼠致病性的研究,通过比较感染处理后的弓形虫小鼠健康及存活状况,筛选出更佳的液氮冻存时间和合适复苏代次,对于建立小鼠急性弓形虫感染模型及弓形虫致病机理... 详细信息

为了评价液氮冻存不同时间后及在小鼠体内复苏不同代次的弓形虫速殖子感染小鼠致病性的研究,通过比较感染处理后的弓形虫小鼠健康及存活状况,筛选出更佳的液氮冻存时间和合适复苏代次,对于建立小鼠急性弓形虫感染模型及弓形虫致病机理等具有重要意义。通过腹腔注射不同保种时间（2、4、6月）和不同复苏代次（1、2、3代）弓形虫速殖子,观察感染后小鼠健康状况及死亡情况,比较各种条件下弓形虫的致病性。结果表明,液氮冻存半年后经小鼠接种4 000个/鼠~16 000个/鼠,传代2代~3代后能得到毒力稳定的虫体,且达到最佳复苏状态。不同冻存时间对弓形虫速殖子的致病性有差异,为弓形虫急性感染模型及后续的药物筛选和致病机理研究奠定了一定的基础。

关键词：弓形虫速殖子保种时间复苏代次致病性

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细胞培养技术在鸡球虫研究中的应用

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动物医学进展 2011年第2期32卷 82-85页

作者：姜连连黄兵林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

球虫的细胞培养是球虫在体外合适的细胞体系中进行发育的过程,能让人们在"无控"和"透明"环境下研究抗球虫药物的作用机制和虫体发育机制等。目前,该技术已在球虫学研究中广泛应用,主要集中于细胞培养体系优化、抗... 详细信息

球虫的细胞培养是球虫在体外合适的细胞体系中进行发育的过程,能让人们在"无控"和"透明"环境下研究抗球虫药物的作用机制和虫体发育机制等。目前,该技术已在球虫学研究中广泛应用,主要集中于细胞培养体系优化、抗球虫制剂的疗效、虫体入侵相关蛋白功能研究以及检测手段的优化等方面。论文从以上几个方面综述细胞培养技术在鸡球虫学研究中的进展情况,以便更好地了解细胞培养在球虫研究中的重要性,为鸡球虫病防治提供更有效的研究工具。

关键词：细胞培养球虫发育

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鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白(Etmic-2)与鸡泛素融合蛋白基因的DNA疫苗表达载体的构建

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中国预防兽医学报 2002年第3期24卷 175-177页

作者：苑纯秀蒋建林中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

本文用RT_PCR技术从鸡的肌肉组织中扩增出泛素 (ubiquitin_Ub)编码基因 ,再将其定向克隆到真核表达载体pCMV_Script中多克隆位点的BamHⅠ、HindⅢ之间 ,构建成重组质粒pCMV_Ub。经酶切和测序确定为正确后 ,再将来源于E .teella裂殖子的E... 详细信息

本文用RT_PCR技术从鸡的肌肉组织中扩增出泛素 (ubiquitin_Ub)编码基因 ,再将其定向克隆到真核表达载体pCMV_Script中多克隆位点的BamHⅠ、HindⅢ之间 ,构建成重组质粒pCMV_Ub。经酶切和测序确定为正确后 ,再将来源于E .teella裂殖子的Etmic_2基因克隆到pCMV_Ub质粒中Ub基因下游的SalⅠ位点上 ,经酶切鉴定 ,获得编码Etimc_2基因的真核表达载体pCMV_Ub_mic_2。该载体中的Etmic_2基因与Ub融合表达 ,并将用于DNA疫苗免疫鸡 ,希望融合了Ub的Etmic_2蛋白能更有效的进入MHC_Ⅰ循环。

关键词：鸡柔嫩艾美耳球虫微线蛋白 Etmic-2 鸡泛素基因 DNA疫苗表达载体

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东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建

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中国预防兽医学报 2008年第1期30卷 5-9页

作者：贾人初孙毅刘金明傅志强苑纯秀石耀军陆珂孙焕李浩林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室

本项研究的目的是构建东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因奠定基础。用TRIzol试剂提取东方田鼠肝脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并用EcoRⅠ... 详细信息

本项研究的目的是构建东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因奠定基础。用TRIzol试剂提取东方田鼠肝脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并用EcoRⅠ和HindⅢ酶切,使其两端分别带EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端。用Mini Column纯化、收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。经测定,库容量为1.3×107PFU/mL,扩增后文库滴度为1.8×1011PFU/mL。对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91.7%,阳性克隆片段大小分布在200bp～1000bp,其中有95.5%的插入片段大于300bp。用日本血吸虫童虫可溶性抗原对文库进行了初筛,得到了21个ESTs,将这些阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中大部分克隆诱导的童虫死亡率比阴性噬菌体对照高出2%～13%。

关键词：东方田鼠肝脏 T7噬菌体展示 cDNA文库

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微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态的观察

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中国兽医科学 2012年第2期42卷 111-118页

作者：张国恩米荣升周鹏黄燕秦培兰呼高伟曹薇陈兆国中国农业科学院、上海兽医研究所、农业部动物寄生虫学重点开放实验室、中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241

利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长状况;在培养细胞中加入1×105个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊、子孢子染色试剂盒Crypt-a... 详细信息

利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长状况;在培养细胞中加入1×105个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊、子孢子染色试剂盒Crypt-a-Glo和Sporo-Glo进行染色,观察不同发育阶段的隐孢子虫形态。结果显示,在六孔培养板中接种10×105个细胞后,24h后长成80%～100%单细胞层,可以用来接种微小隐孢子虫。培养72h后观察到了隐孢子虫各个阶段虫体的形态。结果表明,成功建立了微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型。

关键词：微小隐孢子虫体外感染 HCT-8细胞培养形态

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堆型艾美耳球虫早熟株和母株对8种抗球虫药的敏感试验

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安徽农业科学 2011年第34期39卷 21028-21030,21050页

作者：李婷赵其平董辉韩红玉孔春林姜连连朱顺海黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241

[目的]探讨堆型艾美耳球虫早熟株和母株对常用抗球虫药的敏感性。[方法]选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西8种抗球虫药,进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)... 详细信息

[目的]探讨堆型艾美耳球虫早熟株和母株对常用抗球虫药的敏感性。[方法]选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西8种抗球虫药,进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标进行综合评定。[结果]堆型艾美耳球虫早熟株和母株均对地克珠利、氯苯胍、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感,对盐霉素轻度敏感,对二硝托胺不敏感。[结论]遗传背景相同的虫株,其药物敏感性也相同。

关键词：球虫堆型艾美耳球虫早熟株抗球虫药药物敏感性

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采用高效液相色谱-串联质谱法检测鲫鱼组织3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留量

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中国兽医科学 2007年第8期37卷 718-720页

作者：王霄旸张丽芳薛飞群张可煜裘敏琦中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫病学重点开放实验室上海200232

将待测鱼肉和鱼皮匀浆样品经碱水解、液-液萃取后,采用HPLC-TMS方法对其中的3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)残留量进行了检测。结果,此方法的最低检测限为1.16μg/kg,市售鲫鱼样品中MQCA的含量低于检测限。结果表明,HPLC-TMC灵敏,易操作,能... 详细信息

将待测鱼肉和鱼皮匀浆样品经碱水解、液-液萃取后,采用HPLC-TMS方法对其中的3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)残留量进行了检测。结果,此方法的最低检测限为1.16μg/kg,市售鲫鱼样品中MQCA的含量低于检测限。结果表明,HPLC-TMC灵敏,易操作,能满足鱼组织内MQCA残留量检测的要求。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法 3-甲基喹噁啉-2-羧酸喹烯酮鱼

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