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文献类型

26 篇 会议
12 篇 期刊文献

馆藏范围

38 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

37 篇 农学
- 37 篇 兽医学
- 1 篇 作物学
1 篇 理学
- 1 篇 生物学
1 篇 工学
- 1 篇 生物工程
1 篇 医学
- 1 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 药学(可授医学、理...

主题

18 篇 感染性克隆
10 篇 猪繁殖与呼吸综合...
9 篇 prrsv
6 篇 猪繁殖与呼吸障碍...
6 篇 基因组
6 篇 反向遗传操作
5 篇 病毒复制
4 篇 猪繁殖与呼吸障碍...
4 篇 rna
4 篇 马动脉炎病毒
4 篇 体外转录
3 篇 功能解析
3 篇 猪繁殖与呼吸综合...
3 篇 基因表达调控
3 篇 orf
3 篇 高致病性猪蓝耳病
3 篇 trs
3 篇 非翻译区
3 篇 亚基因组
2 篇 欧洲型prrsv

机构

10 篇 华南农业大学
10 篇 中国农业科学院上...
8 篇 南京农业大学
6 篇 中国农业科学院上...
5 篇 中国农业科学院上...
4 篇 中国农业大学
3 篇 中国动物卫生与流...
3 篇 中国农业科学院上...
3 篇 中国农业科学院上...
2 篇 中国农业科学院
2 篇 中国农业科学院上...
2 篇 扬州大学
2 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国动物卫生与流...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...
1 篇 中国农业科学院上...

作者

38 篇 袁世山
19 篇 孙志
13 篇 王金勇
10 篇 朱兴全
10 篇 郑海红
9 篇 张建武
9 篇 yuan shi-shan
9 篇 高飞
8 篇 姚火春
8 篇 余丹丹
7 篇 吕健
4 篇 陆嘉琦
4 篇 刘萍
4 篇 韦祖樟
4 篇 刘维全
3 篇 sun zhi
3 篇 gao fei
2 篇 zhu xing-quan
2 篇 李祥健
2 篇 wang jin-yong

语言

38 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室"

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排序：

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郑海红孙志朱兴全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 华南农业大学兽医学院广东广州 510642 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 华南农业大学兽医学院广东广州 510642

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行，对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行，对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的Leader-body结合位置，结果发现PRRSV mRNA分子的转录可使用经典(canonical)及非经典(noncanonical)TRS-B进行。通过对PRRSV感染性克隆pAPRRS进行定点基因突变及其所致拯救病毒的鉴定，以此确定TRS-L和TRS-B突变对亚基因组转录及病毒感染性的影响。结果表明：(1)同时突变TRS-L最后两个CC的全长突变体pLgaglerD对MARC-145细胞无感染性，且未产生sgmRNA7转录本;而只突变最后一个C的pLeaderR能拯救出突变病毒，但突变位点在突变病毒系列传代中发生回复突变，由此证明TRS-L 3’的一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有一定修复功能。(2)突变TRS123 3’最后两个碱基的pM7Da或突变TRS93’最后两个碱基的pM7Db均能拯救出病毒，而共同含有TRS9和TRS123 3’最后两个碱基突变的pM7DabR不能拯救出病毒，对拯救的突变病毒进行鉴定发现，TRS123突变的拯救病毒在一系列传代中突变碱基回复，而TRS9突变的拯救病毒传代过程中稳定遗传;突变体pM7S3(含有TRS123的三个碱基突变)和pM7Db虽能拯救出活病毒，但突变都使相应的sgmRNA7转录量至零，且vM7S3滴度偏低。由此证明了TRS9和TRS123都可单独承担PRRSVsgmRNA7的转录调控及其3’一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有修复功能;PRRSV的N蛋白主要来源于sgmRNA7.1的翻译。(3)所有突变病毒的亚基因组中leader-body结合位点础基均来源于TRS-B，为负链RNA不连续转录模型理论提供直接证据。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列 TRS鉴定功能解析

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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建

欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：庄金山张建武袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

为了获得欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)弱毒疫苗AMERVAC-PRRS/A3株的病毒基因组感染性cDNA克隆,为研究深入欧洲型PRRSV提供工具,通过RT-PCR技术扩增了欧洲型PRRSV活疫苗AMERVAC-PRRS/A3弱毒株的全基因组,并测序。根据测序结果,选择合适的酶切位点将各个亚克隆产物逐段克隆入改造过的pBluescriptⅡKS(+)载体中,从而获得了病毒基因组全长cDNA克隆,并使其置于T7启动子的控制之下,同时在病毒基因组cDNA的ORF7和3'UTR之间引入了标记位点。通过体外转录合成病毒基因组RNA转染Marc-145细胞,该病毒基因组全长cDNA克隆能够从Marc-145细胞中成功拯救出病毒,拯救病毒的生物学特征与其亲本病毒基本一致。结果表明,本试验成功构建了欧洲型PRRSV感染性cDNA克隆。

关键词：欧洲型PRRSV 全长基因组cDNA克隆感染性

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猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：余丹丹孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

通过将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORF6/7和ORF7/3'UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作,构建了一系列突变的全长质粒,随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明:1)各突变全... 详细信息

通过将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORF6/7和ORF7/3'UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作,构建了一系列突变的全长质粒,随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明:1)各突变全长质粒均能够进行病毒拯救,并产生明显细胞病变;2)突变病毒具遗传稳定性;3)病毒空斑形态及生长曲线与亲本毒株近似。表明PRRSV ORF间重叠碱基的安排方式对病毒的感染性是非必需的,获得的诸多突变病毒为进一步研制PRRSV基因标识疫苗、研究PRRSV各编码蛋白功能奠定了基础。

关键词： ORF 基因组感染性克隆病毒结构蛋白酶切位点反向遗传操作 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征编码基因

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PRRSV感染性克隆的反向遗传操作：结构蛋白编码基因重叠区的分离

PRRSV感染性克隆的反向遗传操作：结构蛋白编码基因重叠区的分离

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：余丹丹孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)基因组部分阅读框之间存在重叠序列现象,这种复杂和极端紧凑的结构,使得如点突变、缺失、插入和构建嵌合体等一系列的感染性克隆分子操作变得困难。本研究通过将 PRRSV 感染性克隆 ORF

关键词：感染性克隆反向遗传操作 PRRSV 结构蛋白编码基因重叠区

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：吕健孙志张建武刘维全袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 中国农业大学生物学院北京 100097 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232 中国农业大学生物学院北京 100097

近年来在全国范围广泛流行的“猪无名高热”的主要病原之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物，分五段扩增了高致病性猪蓝耳病病毒JX0612株的全长cDNA，将各cDNA片段克隆到pBlueScript Ⅱ SK(+... 详细信息

近年来在全国范围广泛流行的“猪无名高热”的主要病原之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物，分五段扩增了高致病性猪蓝耳病病毒JX0612株的全长cDNA，将各cDNA片段克隆到pBlueScript Ⅱ SK(+)载体中，并且利用重叠区单酶切位点将其连接成JX0612株的全长cDNA克隆。运用5’RACE扩增到基因组5’最末端序列，亚克隆到pBlueScript Ⅱ SK(+)的同时在5’端上游引入17启动子序列。在3’端ORF5下游引入Mlu Ⅰ位点，最终成功构建含有PRRSV JX0612株基因组全长cDNA的重组质粒pJX0612和含有遗传标记Mlu Ⅰ的基因组全长cDNA克隆pJX0612-M。两者经体外合成RNA后转染MARC-145细胞，均获得拯救病毒。病毒传代后核酸序列分析表明Mlu Ⅰ遗传标志稳定存在。此外，比较野毒与拯救病毒的病毒滴度变化，同时绘制一步生长曲线，结果发现病毒生长特性没有显著差异;动物回归实验验证了该株病毒就是引起“猪无名高热”的主要病原。本研究中构建的基因组全长感染性cDNA克隆为探寻病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机理、以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆猪蓝耳病回归试验发病机理

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猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白编码基因重叠区的分离

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：余丹丹孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232

通过将PRRSV感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORFl6/7和ORF7/3’UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作，构建了一系列突变的全长质粒，随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明：1)各突变全长质粒均能够进行病毒拯救... 详细信息

通过将PRRSV感染性克隆ORF间(ORF1/2、ORF4/5、ORF5/6、ORFl6/7和ORF7/3’UTR)重叠区域拉开并插入酶切位点等反向遗传操作，构建了一系列突变的全长质粒，随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明：1)各突变全长质粒均能够进行病毒拯救，并产生明显细胞病变;2)突变病毒具遗传稳定性;3)病毒空斑形态及生长曲线与亲本毒株近似。表明PRRSV ORF间重叠碱基的安排方式对病毒的感染性是非必需的，获得的诸多突变病毒为进一步研制PRRSV基因标识疫苗、研究PRRSV各编码蛋白功能奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重叠序列病毒感染性编码蛋白

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猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：李祥健张建武吕健余丹丹姚火春袁世山中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4-7)以及3'UTR区域替换入pAPPRS相应编... 详细信息

高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4-7)以及3'UTR区域替换入pAPPRS相应编码区域,构建了pSX12(ORF4-7-3'UTR)、p5NX12(ORF5-7-3'UTR)以及p56N12 (ORF5-6)三个PRRSV全长嵌合克隆。经DNA转染Marc-145细胞后拯救出嵌合病毒,并对拯救病毒进行了病毒生物学特性的分析;选取拯救病毒v56N12(ORF5-6)和vSX12(ORF4-7-3UTR)免疫29日龄猪进行免疫原性试验,结果表明,以v56N12免疫后抗体水平相对较低,故免疫原性相对较差;而vSX12病毒免疫后14d血清ELISA抗体达到阳性值(IDEXX ELISA值s/p≥0.4),免疫后28d中和抗体效价从原来的1:5以下达到1:15以上,说明vSX12具有良好的免疫原性并可进行免疫监测;免疫后28d以强毒Jx143株攻毒,结果vSX12免疫组未见发病,而未免疫攻毒对照组全部发病并有1头死亡,vSX12免疫猪攻毒后病毒血症持续6d后消失,而对照组攻毒后至少持续13d,说明vSX12可对高致病性猪蓝耳病提供有效的免疫保护。本研究构建的三个嵌合病毒为开发同时抗经典和变异株PRRSV感染的二价疫苗,以及探寻高致病性猪蓝耳病病毒的毒力因子奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征高致病性猪蓝耳病感染性克隆嵌合病毒候选疫苗

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

引用

2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，... 详细信息

根据马动脉炎病毒(EAV)Bueyrus株全基因组序列，设计并合成EAV特异引物，进而应用RT-PCR技术分6段扩增了EAV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片断PE124、PE631、PE1854、PE5191、PE61107、PE97Q分别克隆到载体PCR BluntⅡ-TOPO中，建立了EAV初级cDNA克隆。在扩增5’末端时，引入NotⅠ酶切位点和T3启动子序列;在基因组3’末段：PolyA尾引入XhoⅠ酶切位点，后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片断在PCR BluntⅡ-TOPO中依次连接，最后亚克隆到质粒pBluescript Ⅱ KS(+)中，获得了EAV全长基因组cDNA克隆pWEAV。核酸序列分析表明：该毒株基因组全长为12704个核苷酸，与EAV Bucyrus分离株的同源性为99.1％;全长基因组中有104个核苷酸发生突变，相应地导致编码区内34个氨基酸的改变。本试验构建的基因组全长cDNA克隆为进一步获取具有感染性的EAV分子克隆并研究动脉炎病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：马动脉炎病毒感染性克隆基因组序列

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0612株全长感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：吕健袁世山中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到... 详细信息

近年来,在全国范围广泛流行并且引起巨大经济损失的"猪无名高热"的主要病源之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。为了便于对PRRSV进行反向遗传操作,本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增,将得到的片段克隆到pBlueScript II SK(+)载体中,并且利用相关的重叠区酶切位点将其构建成为全长克隆。在扩增5'端时,运用5'RACE获得了基因组5'最末端序列,在亚克隆入pBlueScript IISK(+)并且在5'端上游引入T7启动子序列。选取一个克隆在3'端ORF6下游引入Mlu I位点,以期作为感染性分子克隆的筛选标志。最终获得了含有PRRSV JX0612株基因组全长cDNA的重组质粒pJX0612和含有分子标志Mlu I的基因组全长cDNA克隆pJX0612-M。转染MARC-145细胞后得到拯救病毒,而且分子标志稳定存在。本研究中构建的基因组全长感染性cDNA克隆为探寻病毒基因组结构和功能奠定了基础。

关键词：感染性克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV JX0612 细胞转染全长克隆基因组序列反向遗传操作无名高热

来源：评论

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马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

马动脉炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：韦祖樟袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室

本研究旨在建立马动脉炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)的反向遗传操作系统。根据 GeneBank 相关 EAV 基因序列,设计合成特异引物,应用 RT-PCR 技术, 扩增了 EAV Bucyrus 株6段首尾重叠的全基因组 cDNA 片断。将扩增的各个 cDNA 重

关键词：马动脉炎病毒酶切位点基因组

来源：评论