检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2015年第5期37卷 14-17页

作者：林析薛飞群王春梅张丽芳费陈忠张晓晓赵娟肖遂王霄旸张可煜王米郑文丽中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点开放实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

为建立测定AC4原料药含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法,色谱柱：Diamosil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,65∶35（v/v）,流速为1.0 m L/min,检测波长251 nm。结果显示,AC4浓度在20~200μg/m L... 详细信息

为建立测定AC4原料药含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法,色谱柱：Diamosil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,65∶35（v/v）,流速为1.0 m L/min,检测波长251 nm。结果显示,AC4浓度在20~200μg/m L范围与峰面积呈现良好的线性关系,回归方程A=43743ρ＋26 016,R2=0.9999（n=5）,平均回收率100.3%,RSD为0.54%,样品至少在8 h内稳定。表明该法快速简捷、准确度高,适用于AC4原料药含量测定。

关键词： AC4 测定高效液相色谱法

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日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析

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中国人兽共患病学报 2013年第2期29卷 122-128页

作者：洪炀李学珍傅志强石耀军陆珂杨健美朱传刚苑纯秀李浩李祥瑞林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室上海200241 南京农业大学动物医学院南京210095

目的克隆、表达日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(SjTOM34),并对其生物特性进行初步研究。方法应用RT-PCR方法从42d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因,并进行生物信息学分析。应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫... 详细信息

目的克隆、表达日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(SjTOM34),并对其生物特性进行初步研究。方法应用RT-PCR方法从42d日本血吸虫成虫cDNA中扩增SjTOM34基因,并进行生物信息学分析。应用实时定量RT-PCR方法分析了SjTOM34基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达状况。构建了SjTOM34基因重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,Western blotting分析了重组抗原的免疫原性及该蛋白在不同发育阶段虫体中的表达情况,利用免疫组化方法观察了该蛋白在虫体内的分布情况。结果获得了SjTOM34的基因序列,其开放阅读框(ORF)为1 083bp。该基因在所检测的不同发育阶段童虫和成虫中均有表达,其中在35d虫体中的表达量略高于其他时期的虫体。成功构建了重组的原核表达质粒并且在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白在上清和沉淀中都有存在,并且具有较好的免疫原性,在所检测的各时期虫体中均可检测到该蛋白的存在,并且主要分布在虫体的实质组织中。结论获得了日本血吸虫SjTOM34基因,初步明确了该基因在日本血吸虫童虫和成虫中的表达情况,及在成虫中的分布。

关键词：日本血吸虫线粒体外膜转运酶34 克隆表达免疫定位

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抑制性消减杂交技术在寄生虫学研究中的应用

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生物技术通报 2006年第2期22卷 50-55页

作者：韩红玉林矫矫黄兵中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

抑制性消减杂交技术(SSH)是一种适用于分离两个遗传背景相关的DNA样品之间差异从而表达基因的方法。目前,该技术在寄生虫学研究中的应用不是很多,主要应用在寻找与寄生虫不同发育阶段相关的差异表达基因和与寄生虫抗药性相关的差异表达... 详细信息

抑制性消减杂交技术(SSH)是一种适用于分离两个遗传背景相关的DNA样品之间差异从而表达基因的方法。目前,该技术在寄生虫学研究中的应用不是很多,主要应用在寻找与寄生虫不同发育阶段相关的差异表达基因和与寄生虫抗药性相关的差异表达基因以及其他相关基因的研究,如与不同虫株、不同宿主、或性别差异相关的基因。本文从这几个方面综述了SSH技术在寄生虫学研究中的进展情况。了解这些信息,有助于将来更好地利用该技术研究寄生虫学,为寄生虫病的防治提供一定的理论依据。

关键词：抑制性消减杂交差异表达基因寄生虫发育阶段抗药性

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高效液相色谱-串联质谱法测定鸡脂肪中地克珠利残留量

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中国家禽 2012年第20期34卷 14-17页

作者：罗浩师张丽芳薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫病学重点实验室中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室上海200241

本试验建立了鸡脂肪组织中地克珠利残留的高效液相色谱-串联质谱分析方法。采用乙腈和乙酸乙酯混合溶液提取，正己烷去脂，60℃氮气吹干，乙腈溶解后过0．22μm微孔滤膜，采用高效液相色谱-串联质谱测定。结果显示，地克珠利在鸡脂肪组... 详细信息

本试验建立了鸡脂肪组织中地克珠利残留的高效液相色谱-串联质谱分析方法。采用乙腈和乙酸乙酯混合溶液提取，正己烷去脂，60℃氮气吹干，乙腈溶解后过0．22μm微孔滤膜，采用高效液相色谱-串联质谱测定。结果显示，地克珠利在鸡脂肪组织中10～2000μg／kg范围内线性关系良好，在10、200、600μg／kg的加标水平下，回收率为81．8％～110．0％，日内变异系数为1．5％～6．8％，日间变异系数为2．7％～6．0％，该方法的检测限和定量限分别为5μg／kg和10μg／kg。该方法处理简单，准确度和精密度均能满足鸡脂肪组织中地克珠利残留量的检测。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法地克珠利残留脂肪组织

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《中国家畜家禽寄生虫名录》增补(一)

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中国兽医寄生虫病 2005年第3期13卷 6-15页

作者：沈杰中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部寄生虫学重点开放实验室上海200232

本文对《中国家畜家禽寄生虫名录》增补了近几年来新收录的相关文献资料中的寄生虫种属科资料,共计154种、15属、1科。使名录中包含寄生虫达2323种、439属和127科。

关键词：家畜家禽寄生虫种属

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基于环形泰勒虫Tams1基因多态性的二温式-PCR检测方法的建立

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中国农业科学 2012年第20期45卷 4300-4309页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室

【目的】环形泰勒虫作为牛科动物重要的血液原虫对养牛业产生了重大危害。近年来针对该病原Tams1基因的诊断方法及候选疫苗筛选进行了大量工作。但研究证明该基因多态性对诊断及免疫效果存在影响。基于此,本研究对Tams1基因多态性特征... 详细信息

【目的】环形泰勒虫作为牛科动物重要的血液原虫对养牛业产生了重大危害。近年来针对该病原Tams1基因的诊断方法及候选疫苗筛选进行了大量工作。但研究证明该基因多态性对诊断及免疫效果存在影响。基于此,本研究对Tams1基因多态性特征进行了分析,并为该病的诊断建立一种实施有效的检测方法。【方法】参考GenBank中公布的环形泰勒虫Tams1基因的核苷酸序列,设计特异性引物。PCR扩增,获得了846 bp的核苷酸片段。将该基因片段与GenBank中主要的12种已知不同区域虫株的相应氨基酸序列进行比较分析。在保守区设计引物,以Tams1基因标准阳性质粒为模板建立环形泰勒虫病的二温式-PCR检测方法。经优化的方法用于田间样品的检测。【结果】该基因编码281个氨基酸,碱性氨基酸48个,酸性氨基酸42个,疏水性氨基酸100个。系统发生树结果显示,环形泰勒虫甘肃株与安哥拉、土耳其、巴林地方株亲缘关系较近。新疆株与意大利、西班牙地方株关系较近,而与甘肃株亲缘关系相对较远。这一结果通过环形泰勒虫不同国家地方株的氨基酸序列对齐结果可以得到进一步的说明。建立的二温式-PCR检测方法,可检测到0.31 fg.μL-1血液中感染虫体的量。特异性结果表明,仅有环形泰勒虫基因组DNA检测为阳性,其它对照虫种基因组模板均表现为阴性,且与感染牛的其它梨形虫无交叉反应。本实验建立的环形泰勒虫二温式-PCR方法对收集的335份野外样品进行检测,阳性检出率为16.33%,显微镜检测阳性率为2.25%,两者符合率100%。与普通PCR比较,二温式-PCR在敏感性方面没有显著差异,但其特异性更高,且该方法反复升温降温时间消耗短。【结论】环形泰勒虫Tams1基因不同地方株存在明显的差异。其氨基酸序列的多态性特征差异显著。因此该基因作为潜在候选抗原应注重多肽疫苗的设计。二温式-PCR方法具有的良好敏感性和特异性,对环形泰勒虫病的流行可以起到提前检测的效果,提高了疾病的诊断效率。

关键词：环形泰勒虫 Tams1 多态性二温式-PCR 检测方法

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利用UPLC-TOF及MS/MS鉴定头孢喹肟中的同分异构体

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中国兽医科学 2016年第5期46卷 623-629页

作者：王霄旸张可煜张丽芳费陈忠王米薛飞群杭太俊中国药科大学药物分析教研室江苏南京210009 中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室农业部动物寄生虫病学重点开放实验室上海200241

建立了分离鉴定头孢喹肟中同分异构体杂质的UPLC与TOF及MS/MS联用方法。以乙腈-1m L/L甲酸水为流动相进行梯度洗脱,经RP18色谱柱分离,通过电喷雾串联质谱正离子模式在线检测,使得头孢喹肟及其同分异构体杂质获得有效分离,主成分和其同... 详细信息

建立了分离鉴定头孢喹肟中同分异构体杂质的UPLC与TOF及MS/MS联用方法。以乙腈-1m L/L甲酸水为流动相进行梯度洗脱,经RP18色谱柱分离,通过电喷雾串联质谱正离子模式在线检测,使得头孢喹肟及其同分异构体杂质获得有效分离,主成分和其同分异构体杂质的保留时间分别为4.9 min和4.5 min,同时它们的二级质谱产物离子信息及其裂解方式呈现明显的差异。本试验初步建立了分离及鉴定头孢喹肟同分异构体杂质的色谱质谱检测方法,为硫酸头孢喹肟原料药和制剂的有关物质研究及检测奠定了基础。

关键词：硫酸头孢喹肟同分异构体超高效液相飞行时间质谱电喷雾质谱

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犬冠状病毒分子生物学研究进展

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动物医学进展 2004年第2期25卷 54-57页

作者：张建武陈燕军吉荣王权中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

犬冠状病毒 ( CCV )基因组为一 2 8～3 2 kb大小的单股正链 RNA,基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下、以先导引物转录机制进行转录 ,不同的病毒基因组和亚基因组翻译产生除病毒依赖 RNA的 RNA聚合酶以外 ,还产生其它病毒的结构蛋白和非结... 详细信息

犬冠状病毒 ( CCV )基因组为一 2 8～3 2 kb大小的单股正链 RNA,基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下、以先导引物转录机制进行转录 ,不同的病毒基因组和亚基因组翻译产生除病毒依赖 RNA的 RNA聚合酶以外 ,还产生其它病毒的结构蛋白和非结构蛋白 ,其中有相对比较保守、参与病毒核衣壳形成、介导宿主细胞免疫的核衣壳蛋白 ( N ) ;在病毒出芽、组装和成熟中起重要作用的膜蛋白 ( M) ;能刺激机体产生中和抗体 ,且易变异的纤突蛋白 ( S) ,另外 S蛋白还决定着病毒血清型、感染力 ,同时通过识别 ,并与病毒宿主细胞受体相互作用决定病毒感染的宿主范围 ;参与病毒组装的小膜蛋白 ( E)和其它病毒蛋白。 CCV还可识别猫氨肽酶 N( f APN)

关键词：犬冠状病毒分子生物学基因组病毒蛋白受体结构蛋白基因

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猪带绦虫仓鼠动物模型的建立

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中国农业科学 2009年第6期42卷 2172-2177页

作者：张艳翟军军才学鹏景志忠骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用... 详细信息

【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用压片技术和组织切片技术对检出的绦虫的形态结构进行研究。【结果】免疫抑制剂在5mg/只,感染一次就能使囊尾蚴发育到性成熟;在实验仓鼠体内,感染后40d的仓鼠体内就能检出具有体节的可见虫体,感染80d后的仓鼠体内能检出孕卵节片;检出的虫体多数吸附在小肠前1/3段,也有寄生在胆囊和胆管中的虫体,甚至偶见虫体钻出胆囊外堆积在肝脏附近;虫体头节上可见4个吸盘及两圈小钩;与人猪带绦虫相比,成熟节片较少。【结论】成功建立了猪带绦虫仓鼠动物模型,这使得成功解决猪带绦虫实验材料的来源问题成为可能,也为猪带绦虫的深入研究奠定了基础。

关键词：猪带绦虫仓鼠动物模型绦虫特性

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中草药制剂TF-103抗鸡柔嫩艾美尔球虫病的临床试验

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中兽医医药杂志 2004年第3期23卷 48-50页

作者：费陈忠薛飞群赵其平中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200232

鸡球虫病是一种广泛而危害性极大的寄生虫病,特别是雏鸡的发病率、死亡率都较高.目前该病的防治主要依赖化学药物,但由于使用化学药物病原体易产生耐药性,且在可食性产品中的药物残留会危害人类的健康.因此,人们愈来愈重视毒副作用相对... 详细信息

鸡球虫病是一种广泛而危害性极大的寄生虫病,特别是雏鸡的发病率、死亡率都较高.目前该病的防治主要依赖化学药物,但由于使用化学药物病原体易产生耐药性,且在可食性产品中的药物残留会危害人类的健康.因此,人们愈来愈重视毒副作用相对较小的、使用安全的中草药抗球虫制剂.TF-103是一种以中药白头翁(Pulsatilla chinensis)为主药组成的纯中药抗球虫方剂.在反复筛选及正交试验优化组方的基础上,经多次药效学和工艺学研究开发的新型中药抗球虫产品,本品毒性极低[1,2],且抗鸡球虫活性稳定.本次试验是在前期工作的基础上,对三批中试产品进行了抗鸡柔嫩艾美尔球虫病的临床放大试验研究,目的是为了验证生产工艺的稳定性和临床应用的有效性.

关键词：中草药制剂 TF-103 抗鸡柔嫩艾美尔球虫病临床试验

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