检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2011年第4期41卷 380-386页

作者：张丽艳刘光远田占成谢俊仁龚真莉刘建刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

以兔抗长角血蜱饥饿雌蜱全蜱蛋白阳性血清为探针,对长角血蜱饥饿雌蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,获得一个阳性克隆HL05。经5′-RACE技术得到HL05基因的全长序列。HL05基因全长1 053bp,开放阅读框长540bp,编码179个氨基酸,预计蛋白分子... 详细信息

以兔抗长角血蜱饥饿雌蜱全蜱蛋白阳性血清为探针,对长角血蜱饥饿雌蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,获得一个阳性克隆HL05。经5′-RACE技术得到HL05基因的全长序列。HL05基因全长1 053bp,开放阅读框长540bp,编码179个氨基酸,预计蛋白分子质量为20.01ku。序列同源性分析表明,该基因为长角血蜱新基因。对推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,表明HL05蛋白为分泌型蛋白,无跨膜区,具有较高的抗原指数。将该基因亚克隆后连接到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导后得到大小为46ku左右的重组蛋白,与预期大小一致。Western-blot结果显示兔抗长角血蜱成蜱全虫抗体能够识别该重组蛋白。

关键词：长角血蜱 HL05新基因全长序列分析原核表达

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基于18S rRNA基因序列的我国马梨形虫分类学地位分析

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动物分类学报 2011年第1期36卷 99-103页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁张萍中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其... 详细信息

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其他地方株梨形虫18SrRNA基因序列进行同一性分析并构建系统发生树。分析显示,之前被称作马巴贝斯虫的虫种和泰勒虫虫种有着更密切的亲缘关系,在进化发育过程中处于同一种系,而与巴贝斯虫为明显的2个分支。我国驽巴贝斯虫肇源株与西班牙分离株(AY534883.1)仅有较小差异,其同源性高达91.8%。马泰勒虫肇源株与西班牙分离株(DQ287951.1,AY150064.2)同源性均高于91.4%。以上分析显示我国马梨形虫地方株和西班牙地方株亲缘关系最近,而与其他地方株差异相对较大。因此我国肇源株马梨形虫和西班牙地方株同属于Atbara8。

关键词：马梨形虫马泰勒虫驽巴贝斯虫 18S rRNA 系统发育分类学

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基于Hsp70基因的马梨形虫分类学定位分析

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中国农业科学 2011年第17期44卷 3694-3700页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁张萍沈辉党根生中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫原病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室西安市长安区动物疾病预防控制中心

【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBan... 详细信息

【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBank中23种已知虫种的相应序列进行分析比较。【结果】该片段编码639个氨基酸,其疏水性氨基酸达到208个,极性氨基酸167个。同一性分析显示,该基因片段与报道的马巴贝斯虫Hsp70基因(*** BAF02625.1)亲缘关系最近,其次是小泰勒虫(*** XP764717.1)和环形泰勒虫(*** AAA30130.1),而与感染马属动物的另一个虫种驽巴贝斯虫(*** BAF02619.1)亲缘关系较远。【结论】马泰勒虫Hsp70基因的克隆及系统发育分析显示,之前被定名为马巴贝斯虫(***)的虫种隶属于泰勒虫虫种。本试验为马巴贝斯虫正确更名为马泰勒虫(***)的分类地位提供了又一佐证。

关键词：马泰勒虫努巴贝斯虫热休克蛋白(Hsp70) 分类学定位

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驽巴贝斯虫病PCR检测方法的建立和应用

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中国畜牧兽医 2011年第7期38卷 193-195页

作者：罗金刘光远谢俊仁田占成沈辉王芳芳孙晓林陈荣贵王海军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 新疆伊犁州动物疾病控制与诊断中心新疆伊犁735000 新疆新源县畜牧兽医站新疆新源830000

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6... 详细信息

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6个巴贝斯虫株中,仅驽巴贝斯虫株能扩增出特异性片段,马泰勒虫、双芽巴贝斯虫、莫氏巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫、大巴贝斯虫的扩增结果均为阴性。对45份马属动物血样进行检测,本研究建立的PCR方法测得驽巴贝斯虫病的阳性率为26.67%(12/45),与显微镜检测方法进行了比较,结果显示PCR检测方法可显著提高驽巴贝斯虫的检出率。

关键词：驽巴贝斯虫 PCR诊断方法应用

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18S rRNA序列差异在马梨形虫分类学中的应用

18S rRNA序列差异在马梨形虫分类学中的应用

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：罗金刘光远谢俊仁田占成沈辉中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室

通过泰勒虫和巴贝斯虫18S rRNA V4高变区核苷酸序列的对比,分析两物种之间该序列的结构特征,并确定马泰勒虫(之前称马巴贝斯虫)的分类学地位。参考GenBank中公布的马泰勒虫(DQ287951)和驽巴贝斯虫(FJ209026)基因序列设计引物,分别获得53... 详细信息

通过泰勒虫和巴贝斯虫18S rRNA V4高变区核苷酸序列的对比,分析两物种之间该序列的结构特征,并确定马泰勒虫(之前称马巴贝斯虫)的分类学地位。参考GenBank中公布的马泰勒虫(DQ287951)和驽巴贝斯虫(FJ209026)基因序列设计引物,分别获得531bp和452bp的核苷酸片段。该序列克隆至pMD19-T进行测序,正确的结果与GenBank中公布的30种不同原虫的18S rRNA核苷酸序列构建系统发生树。利用clustal x将这些系列对齐,分析泰勒虫及巴贝斯虫核苷酸序列之间的差异。泰勒虫和巴贝斯虫处于明显的两个分支,而称之为马巴贝斯虫的物种和泰勒虫有着较为密切的亲缘关系,他们同处于一个分支。序列对齐分析显示,巴贝斯虫核苷酸序列相对于泰勒虫种序列存在多个位点的缺失和突变。该种缺失和突变可作为泰勒虫和巴贝斯虫分类依据之一。马巴贝斯虫应隶属于泰勒虫科,泰勒虫种。

关键词：泰勒虫核苷酸序列巴贝斯虫梨形虫序列差异分类学

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18S rRNA序列差异在马梨形虫分类学中的应用

18S rRNA序列差异在马梨形虫分类学中的应用

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中国动物学会原生动物学分会第十六次学术讨论会

作者：罗金刘光远谢俊仁田占成沈辉中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046

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长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建与分析

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 659-664页

作者：刘建刚刘光远田占成谢俊仁龚真莉张丽艳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为构建长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,获得长角血蜱雄性成蜱在半饱血状态下的特异表达基因,用抑制消减杂交方法构建以pGEM-T Easy为载体的长角血蜱半饱血雄蜱全蜱cDNA文库,测序并进行生物信息学分析。以新合成的长角血蜱饥饿和半饱... 详细信息

为构建长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,获得长角血蜱雄性成蜱在半饱血状态下的特异表达基因,用抑制消减杂交方法构建以pGEM-T Easy为载体的长角血蜱半饱血雄蜱全蜱cDNA文库,测序并进行生物信息学分析。以新合成的长角血蜱饥饿和半饱血雄蜱cDNA第一链为模板,用RT-PCR方法对从文库中挑选的5个表达序列标签(EST)进行鉴定。初步获得18个EST,BlastX分析显示,所得cDNA编码的功能性蛋白主要包括信号传导、组织形态形成、转录调节和糖类代谢等相关蛋白。RT-PCR鉴定结果显示,随机挑选的5个新EST中有3个在半饱血状态下差异表达。结果表明,成功地构建了长角血蜱雄性全蜱抑制消减杂交文库,获得了有潜在生物学功能的EST。

关键词：长角血蜱抑制消减杂交(SSH) cDNA文库

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长角血蜱成蜱免疫家兔模型的建立及对生长发育的影响

长角血蜱成蜱免疫家兔模型的建立及对生长发育的影响

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：谢俊仁刘光远田占成龚真莉刘建刚张丽艳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐地上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔... 详细信息

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐地上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔对长角血蜱成蜱的吸血和生长发育影响显著,其抗体水平与长角血蜱成蜱在兔体的吸血周期、死亡率成正相关,与雌蜱的饱血脱落率、饱血体重成负相关。结果进一步证明,蜱的唾液腺是其主要的免疫器官之一。家兔抗体水平的持续期足以使长角血蜱完成一个世代,可以满足试验需求,是抗蜱免疫研究理想的阳性对照模型。同时,血清中特异性抗体的效价也可以作为判定动物对长角血蜱抵抗力强弱的重要指标之一。

关键词：长角血蜱成蜱免疫模型生长发育

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羊尤氏泰勒虫病的病理学观察

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畜牧兽医学报 2008年第11期39卷 1567-1574页

作者：李有全罗建勋关贵全马米玲高金亮刘志杰党志胜刘爱红任巧云刘军龙鲁炳义陈怀涛白启魏永红牛庆丽田占成殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心... 详细信息

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心肌细胞变性、坏死,染色不均;肠道固有膜明显充血、出血;肝细胞颗粒变性,有散在细胞坏死,汇管区和小叶间有淋巴网状细胞增生;瘤胃黏膜下层有散在性出血,肌层见灶状出血。

关键词：尤氏泰勒虫实验感染病理变化

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