检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2023年第2期18卷 141-146页

作者：蒙泽菁房永祥贾怀杰高真贞陈国华何小兵景志忠王晓霞兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

目的克隆羊口疮病毒020基因,构建其重组真核表达质粒并转染HeLa细胞,分析020基因编码E3L蛋白的亚细胞定位,分析该蛋白生物信息学特征。方法提取羊口疮病毒基因组,PCR扩增020基因并构建重组真核表达质粒,转染HeLa细胞,采用Western blo... 详细信息

目的克隆羊口疮病毒020基因,构建其重组真核表达质粒并转染HeLa细胞,分析020基因编码E3L蛋白的亚细胞定位,分析该蛋白生物信息学特征。方法提取羊口疮病毒基因组,PCR扩增020基因并构建重组真核表达质粒,转染HeLa细胞,采用Western blot检测其在该细胞中的表达,免疫荧光法检测该蛋白的亚细胞定位。利用DNAstar软件分析不同毒株ORFV E3L氨基酸序列特点及其遗传演化关系;利用SOMPA软件分析其二级结构;利用SignalP4.0软件预测信号肽;利用TMHMM2.0软件预测跨膜结构;利用NetPhos 3.1预测磷酸化位点;利用NetNGlyc-1.0预测糖基化位点;应用IDEB和SYFPEITHI预测ORFV E3L蛋白的抗原表位。结果成功克隆得到ORFV 020基因,全长549 bp,编码183个氨基酸;亚细胞定位显示该蛋白定位于细胞核和细胞质。生物信息学分析ORFV E3L蛋白α螺旋约占40.44%、β折叠约占5.46%、延伸链约占16.94%、无规则卷曲约占37.16%;该蛋白无信号肽和跨膜结构,可能存在15个磷酸化位点,7个N-糖基化位点,5个B细胞线性表位,2个CTL表位,3个Th细胞表位,3个B细胞和CTL联合表位,3个B细胞和Th细胞联合表位。结论 ORFV E3L蛋白定位于细胞核和细胞质,含有多个抗原表位,可能具有免疫原性。该蛋白高度保守,具有成为优势保护性抗原的潜力。为进一步揭示ORFV E3L蛋白的功能奠定基础,为ORFV诊断方法的建立及疫苗的研制提供了理论依据。

关键词：羊口疮病毒基因克隆亚细胞定位生物信息学

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猪伪狂犬病病毒HN-2017变异株的分离鉴定及其致病性研究

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中国兽医科学 2023年第3期53卷 304-311页

作者：王国蒨贾怀杰何小兵李维克陈国华房永祥杨帆景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业农村部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

本研究从疑似爆发伪狂犬病(pseudorabies,PR)猪场死亡猪中分离到1株病毒,经PCR检测、主要毒力基因gB、gC、gD和gE测序及遗传关系分析,发现它与国内流行的PRV变异毒株具有相似的突变特征,氨基酸序列与HN-ZZ/Swine(MH321405)变异株亲缘关... 详细信息

本研究从疑似爆发伪狂犬病(pseudorabies,PR)猪场死亡猪中分离到1株病毒,经PCR检测、主要毒力基因gB、gC、gD和gE测序及遗传关系分析,发现它与国内流行的PRV变异毒株具有相似的突变特征,氨基酸序列与HN-ZZ/Swine(MH321405)变异株亲缘关系最近,将其鉴定为伪狂犬病变异病毒(pseudorabies virus,PRV),并命名为PRV HN-2017株,发现该毒株在Vero细胞上具有较强的适应性。为进一步探讨PRV HN-2017株的致病性,将该变异株按不同剂量经滴鼻途径接种于45日龄的SPF猪,均先后出现了发热、抽搐、呼吸困难等猪伪狂犬病典型症状,其中高剂量感染组在7 d内全部死亡;RT-PCR检测证实该病毒毒株在体内分布较广,在扁桃体中病毒载量最高,其次是脾脏、肺脏、淋巴结、脑组织、肾脏和肝脏。这表明成功分离到1株PRV变异毒株,并证实该毒株对仔猪具有很强的致病性,能导致多种重要组织器官的不同程度的损害。

关键词：伪狂犬病病毒变异株分离鉴定致病性分析

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犬冠状病毒诊断技术研究进展

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中国兽医科学 2023年第1期53卷 101-106页

作者：张成琪石正旺万颖罗俊聪田宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州1730046 中国农业科学院特产研究所农业农村部经济动物疫病重点实验室吉林长春130112

犬冠状病毒(canine coronavirus,CCoV)属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)、α冠状病毒属成员。近几年,冠状病毒感染犬的比例正在不断上升,加上有研究表明犬也会感染新型冠状病毒,而市... 详细信息

犬冠状病毒(canine coronavirus,CCoV)属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)、α冠状病毒属成员。近几年,冠状病毒感染犬的比例正在不断上升,加上有研究表明犬也会感染新型冠状病毒,而市场上缺少治疗冠状病毒的特效药物。因此,快速、精确的诊断宠物疫病对该病的防控起到不可或缺的作用。目前,犬冠状病毒常用的检测技术分为临床诊断、病原学检查和血清学检查,但由于冠状病毒病的流行病学特点、临床症状以及病理剖检缺乏特征性变化,据此只能作出初步诊断,病原学检查主要分为病毒分离培养、电镜诊断、PCR、RPA、夹心ELISA和RT-RAA;血清学检查主要分为中和试验、间接ELISA、胶体金免疫层析试纸条。2019年新型冠状病毒感染导致的疫情在全球爆发以来,备受社会各界关注,一些新的变异毒株也在不断出现。因此,亟需一种快速、简便、成本低、灵敏性高、特异性强的诊断方法来监测、预警疫情,为进一步研发特异性疫苗提供参考与帮助。

关键词：检测冠状病毒犬

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牛结节性皮肤病诊断方法研究进展

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畜牧与兽医 2023年第7期55卷 138-144页

作者：张辉张慧余翰维陈国华何小兵苏洋房永祥甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业农村部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是由痘病毒科山羊痘病毒属的结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)感染牛而引起的一种热性、接触性、嗜上皮性病毒病。2019年8月3日,我国首次在新疆维吾尔自治区伊犁州确诊暴发了... 详细信息

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是由痘病毒科山羊痘病毒属的结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)感染牛而引起的一种热性、接触性、嗜上皮性病毒病。2019年8月3日,我国首次在新疆维吾尔自治区伊犁州确诊暴发了牛结节性皮肤病疫情,目前LSD已扩散至我国东南、西南、中部及北部等大部分地区且呈蔓延态势。对LSD高效、准确、快速的诊断,是成功控制和根除LSD的基础。本文对LSD的临床特征、病原学、分子生物学和血清学等诊断方法进行综述,为LSD快速有效的诊断及科学防控提供理论支持。

关键词：牛结节性皮肤病分子生物学血清学传播途径

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痘病毒E3L蛋白在调控细胞程序性死亡中的功能

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中国兽医科学 2023年第2期53卷 223-230页

作者：蒙泽菁房永祥韦雨松谭金龙高真贞陈国华何小兵景志忠王晓霞兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 榆林学院生命科学学院陕西榆林719000

细胞程序性死亡是一种受基因调控的细胞死亡方式,包括细胞凋亡、焦亡、坏死性凋亡、铁死亡、自噬等,这些多元化的细胞程序性死亡方式在病毒的复制和传播中发挥重要作用。其中,痘病毒通过编码大量的病毒蛋白(例如E3L、F1L等)参与介导痘... 详细信息

细胞程序性死亡是一种受基因调控的细胞死亡方式,包括细胞凋亡、焦亡、坏死性凋亡、铁死亡、自噬等,这些多元化的细胞程序性死亡方式在病毒的复制和传播中发挥重要作用。其中,痘病毒通过编码大量的病毒蛋白(例如E3L、F1L等)参与介导痘病毒免疫逃逸,抵抗宿主细胞死亡,以此维持自身复制。本文综述了痘病毒E3L蛋白在调控细胞凋亡、焦亡、坏死性凋亡中的作用,深入剖析了PKR、F1L和Zα结构域介导的E3L相关细胞程序性死亡分子机制,以期为痘病毒免疫逃逸机制探索、抗病毒药物开发等提供新思路。

关键词：痘病毒 E3L 细胞凋亡坏死性凋亡细胞焦亡

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布鲁氏菌病及其在我国的防控现状与建议

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中国兽医科学 2022年第12期52卷 1578-1585页

作者：汪洁英宁博景伟高建平曹莹王雪梅刘帅马永红景志忠西安医学院陕西西安710021 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

布鲁氏菌病(简称布病)已成为世界上最流行的细菌性人兽共患病,在牲畜健康、生产和公共卫生方面造成了巨大的损失,极大地限制了流行国家特别是我国的经济发展、人类健康和社会进步。本文简要介绍了布病的病原学、流行病学、临床表现及诊... 详细信息

布鲁氏菌病(简称布病)已成为世界上最流行的细菌性人兽共患病,在牲畜健康、生产和公共卫生方面造成了巨大的损失,极大地限制了流行国家特别是我国的经济发展、人类健康和社会进步。本文简要介绍了布病的病原学、流行病学、临床表现及诊断治疗技术和疫苗的研究现状,重点聚焦动物和人间布病综合防控措施的介绍,以期通过“One Health”理念应用于布病防控,构建医学、兽医学协调一致的布病疫苗免疫接种、检疫与净化和科普宣传教育为主的综合性防控机制,从动物无疫、环境生物安全和人类健康角度出发,积极推动多领域,多部门和多学科的合作,为从动物源头防控、阻断和消除布病传播提供新思路。

关键词：布鲁氏菌人兽共患病综合防控

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检测绵羊源爱知病毒D型荧光RT-PCR方法的建立和应用

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畜牧兽医学报 2022年第5期53卷 1632-1637页

作者：阿比克哈莫余忠华杨晨景志忠汤承中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046 阿坝藏族羌族自治州动物科学技术研究所红原624400 西南民族大学畜牧兽医学院成都610041

绵羊源爱知病毒D型(ovine Aichivirus D)是在国内绵羊中新发现的病毒,本研究根据绵羊源Aichivirus D 3D基因序列设计检测引物,通过反应体系和条件优化,成功建立了检测绵羊源Aichivirus D的TB Green染料法荧光RT-PCR方法,该方法特异性和... 详细信息

绵羊源爱知病毒D型(ovine Aichivirus D)是在国内绵羊中新发现的病毒,本研究根据绵羊源Aichivirus D 3D基因序列设计检测引物,通过反应体系和条件优化,成功建立了检测绵羊源Aichivirus D的TB Green染料法荧光RT-PCR方法,该方法特异性和稳定性良好,灵敏度高。对2020年4月―2021年5月采集自四川6个场253份绵羊粪便样本(健康羊的133份,腹泻羊的120份)进行检测,结果该病毒的平均检出率为8.7%,场阳性率为66.7%。其中,腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(17.5%)显著高于非腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(0.75%,P<0.001)。表明绵羊源Aichivirus D可能是引起以上地区绵羊腹泻的病原。从绵羊源Aichivirus D的阳性样本中成功克隆出大小为1422 bp的13个完整的绵羊源Aichivirus D 3D基因,其核苷酸相似性为99.4%~100.0%。遗传演化分析发现这13株绵羊源Aichivirus D 3D基因与本实验室前期研究上传的绵羊源Aichivirus D 3D基因共同聚为单独的一个大支。本研究为绵羊源Aichivirus D的分子检测提供了一种新的方法和基础流行病学数据。

关键词：绵羊源爱知病毒D型荧光RT-PCR方法绵羊腹泻

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甲基化修饰对病毒潜伏感染的调控作用研究进展

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病毒学报 2021年第3期37卷 764-770页

作者：孙微微贾怀杰景志忠陈思睿吕彦蓉刘荣王晓霞兰州大学公共卫生学院兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730000

病毒在宿主体内所建立的潜伏感染与肿瘤、免疫性疾病等多种疾病的发生和发展密切相关,并直接导致相关疾病很难被彻底治愈。目前,随着潜伏感染调控机制研究的深入,表观遗传修饰在其中扮演的角色也进一步被发现。而甲基化作为其中最重要,... 详细信息

病毒在宿主体内所建立的潜伏感染与肿瘤、免疫性疾病等多种疾病的发生和发展密切相关,并直接导致相关疾病很难被彻底治愈。目前,随着潜伏感染调控机制研究的深入,表观遗传修饰在其中扮演的角色也进一步被发现。而甲基化作为其中最重要,也是研究最详尽的调控方式之一,在病毒潜伏感染的建立和维持中也是不可或缺的。本文将分别对DNA、RNA和组蛋白甲基化在病毒潜伏感染中的调控作用、靶向甲基化修饰的药物在临床治疗中的应用前景等方面进行综述,以期为抗病毒治疗策略的研究提供参考。

关键词：甲基化修饰病毒潜伏感染抗病毒治疗

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牛结节性皮肤病的流行新动态及我国的应对策略

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中国兽医科学 2022年第4期52卷 485-492页

作者：何小兵景伟房永祥陈国华李维克贾怀杰娄忠子李小明苏洋谭金龙高真贞景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

2019年8月我国新疆伊犁地区首次暴发牛结节性皮肤病(LSD),在不到一年内结节性皮肤病病毒从我国最西北部传到最东南部诸省区,之后LSD疫情迅速传播和扩散,2021年又波及我国多个省区市,呈大流行态势,对我国养牛业特别是奶牛业造成巨大危害... 详细信息

2019年8月我国新疆伊犁地区首次暴发牛结节性皮肤病(LSD),在不到一年内结节性皮肤病病毒从我国最西北部传到最东南部诸省区,之后LSD疫情迅速传播和扩散,2021年又波及我国多个省区市,呈大流行态势,对我国养牛业特别是奶牛业造成巨大危害和威胁。近年来,世界上特别是俄罗斯等国家又发现了LSD疫苗样疾病以及新的变异毒株,对LSD的防控提出了新挑战。为做好这一外来病的防控工作,通过LSD疫情流行现状与趋势、发现的新流行毒株与问题,探讨我国LSD防控的新策略,为有效控制、净化和根除该病提供指导。

关键词：结节性皮肤病流行动态活减毒疫苗疫苗样疾病重组病毒株防控策略

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猪瘟野毒株与疫苗株双重TapMan实时定量PCR方法的建立与应用

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中国兽医科学 2021年第12期51卷 1475-1481页

作者：朱丽珂房永祥李皖豫刘娟高真贞贾怀杰何小兵陈国华娄忠子李维克景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

为实现对猪瘟野毒株与疫苗株之间的快速鉴别,本试验建立了一种猪瘟野毒株与疫苗株的双重TapMan实时定量PCR的检测方法。通过对Gen Bank公布的猪瘟病毒野毒株及疫苗株的全基因组序列进行比对和分析,设计出2对特异性引物及2条TapMan探针,... 详细信息

为实现对猪瘟野毒株与疫苗株之间的快速鉴别,本试验建立了一种猪瘟野毒株与疫苗株的双重TapMan实时定量PCR的检测方法。通过对Gen Bank公布的猪瘟病毒野毒株及疫苗株的全基因组序列进行比对和分析,设计出2对特异性引物及2条TapMan探针,经反应体系及反应条件优化后,对其特异性、稳定性及敏感性进行了验证。结果显示,本方法能特异性地对猪瘟野毒株及疫苗株进行鉴别检测,并且不与其他常见的猪源病毒产生交叉反应,组内和组间检测变异系数均小于1%,敏感性较普通RT-PCR分别高出100倍和1 000倍以上,且野毒株与疫苗株的最低检测下限分别在1.3 copies/μL和1.58 copies/μL。应用本方法对实验室保存的甘肃某猪场猪瘟活疫苗免疫前、后的56份已知背景的样本进行检测,结果,阳性符合率高达100%。本方法特异性强,稳定性和灵敏度高,不仅能够准确定量,并且可快速地对同一个样品中猪瘟病毒野毒株、疫苗毒株进行检测,为后续猪瘟净化效果的评估提供了新的技术手段。

关键词：猪瘟病毒疫苗株 TapMan探针双重实时定量PCR

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