检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2015年第2期45卷 111-117页

作者：李继东蒙学莲朱学亮李雪强尤亚南窦永喜骆学农才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

为构建能够表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H基因或F基因的重组山羊痘病毒(GPV)并以此为活载体疫苗,在通用转移质粒pTKfpgigp的多克隆位点中插入PPRV的H基因或F基因,构建重组转移质粒pTKfpgigp-PPRV H和pTKfpgigp-PPRV F,并用Lipofectamine 2... 详细信息

为构建能够表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H基因或F基因的重组山羊痘病毒(GPV)并以此为活载体疫苗,在通用转移质粒pTKfpgigp的多克隆位点中插入PPRV的H基因或F基因,构建重组转移质粒pTKfpgigp-PPRV H和pTKfpgigp-PPRV F,并用Lipofectamine 2000转染已感染GPV的原代绵羊睾丸细胞,经同源重组产生重组GPV(rGPV)。用GFP和gpt选择标记筛选纯化rGPV,通过RT-PCR和免疫荧光技术检测rGPV在原代绵羊睾丸细胞中外源基因的表达情况。将获得的rGPV皮内接种山羊,检测抗山羊痘病毒和小反刍兽疫病毒的特异性抗体的变化情况。结果显示,获得了含有PPRV H基因或F基因的病毒株rGPV-PPRV H和rGPV-PPRV F;在原代绵羊睾丸细胞中rGPV所含的外源基因进行了正常转录和翻译,表达产物能与PPRV抗血清产生特异性反应,动物免疫试验表明,2株rGPV能诱导产生高水平的抗山羊痘病毒和小反刍兽疫病毒的特异性抗体。上述研究结果为PPRV重组标记疫苗的研制提供了参考。

关键词：小反刍兽疫病毒山羊痘病毒 H基因 F基因

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硫氧还蛋白及其在寄生虫的研究进展

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中国人兽共患病学报 2015年第9期31卷 870-875页

作者：杨晓宇王萌张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)是一类广泛存在于原核与真核生物体内的氧化还原调节蛋白,与硫氧还蛋白还原酶,NADPH等共同组成硫氧还蛋白系统,参与调节机体抗氧化、抗凋亡等生物学过程。由于Trx系统可以清除寄生虫虫体自身和宿主免疫细胞... 详细信息

硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)是一类广泛存在于原核与真核生物体内的氧化还原调节蛋白,与硫氧还蛋白还原酶,NADPH等共同组成硫氧还蛋白系统,参与调节机体抗氧化、抗凋亡等生物学过程。由于Trx系统可以清除寄生虫虫体自身和宿主免疫细胞产生的的活性氧和活性氮,以减少其对虫体的损伤,因此寄生虫Trx的研究日益受到人们的关注。现对Trx的主要生物学功能及在寄生虫上的最新研究进展作一综述。

关键词：硫氧还蛋白生物学功能寄生虫

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寄生虫水孔蛋白研究进展

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畜牧兽医学报 2015年第5期46卷 689-695页

作者：崔建敏张念章付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

水孔蛋白(AQP)是主要内在蛋白(MIP)家族重要的组成成员之一。研究发现,寄生虫水孔蛋白不仅能够调节虫体的渗透稳态、参与营养物质的转运、排出代谢产物,还可以使抗寄生虫药物进入虫体,因而成为研制新型寄生虫疫苗和抗寄生虫药物的潜在... 详细信息

水孔蛋白(AQP)是主要内在蛋白(MIP)家族重要的组成成员之一。研究发现,寄生虫水孔蛋白不仅能够调节虫体的渗透稳态、参与营养物质的转运、排出代谢产物,还可以使抗寄生虫药物进入虫体,因而成为研制新型寄生虫疫苗和抗寄生虫药物的潜在靶点。因此,研究水孔蛋白的结构与功能对寄生虫病防治具有重大意义。作者通过综述寄生虫水孔蛋白的作用机制和结构特征,以期为抗寄生虫生物制剂的研发提供参考。

关键词：寄生虫水孔蛋白结构与功能

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宁夏西海固地区棘球绦虫感染的流行病学调查

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动物医学进展 2015年第7期36卷 126-130页

作者：许阳阳刘聪暖尹媛婕娄忠子李燕兵李正直贾万忠杨玉荣宁夏医科大学/病原生物与免疫学系宁夏银川750004 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室/中国农业科学院人兽共患病重点实验室甘肃兰州730046

为了解宁夏西吉、海原和原州区(简称西海固地区)的棘球绦虫的感染情况,用PCR方法检测犬粪中棘球绦虫DNA,用ELISA法检测B超筛查阴性的青少年儿童血清中抗棘球绦虫特异抗体(反映周围环境棘球绦虫卵的污染)。采用SPSS20.0统计分析资料,2... 详细信息

为了解宁夏西吉、海原和原州区(简称西海固地区)的棘球绦虫的感染情况,用PCR方法检测犬粪中棘球绦虫DNA,用ELISA法检测B超筛查阴性的青少年儿童血清中抗棘球绦虫特异抗体(反映周围环境棘球绦虫卵的污染)。采用SPSS20.0统计分析资料,2检验比较不同组间阳性率的差异。结果显示,西海固地区,在检查的2 175份犬粪中,细粒棘球绦虫(E.g-DNA)阳性率分别为9.87%、6.10%、7.00%;多房棘球绦虫(E.m-DNA)阳性率分别为6.40%、1.52%、3.37%。在检查的5 706份人血清中,抗E.g抗体阳性率分别为45.46%、36.23%、42.18%,抗E.m抗体阳性率分别为8.38%、7.03%、20.48%。从终末宿主(狗)感染率和人血清抗体阳性率(非生活史中间宿主)可以证明两型棘球绦虫在该地区的传播流行非常活跃。

关键词：棘球绦虫流行病学犬少年儿童

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多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1基因的克隆及原核表达

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中国兽医科学 2015年第2期45卷 126-131页

作者：岳龙李文卉张念章曲自刚贾万忠殷宏付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为研究多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1的功能,利用PCR分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板扩增TmAdh1的基因组序列和cDNA序列,并利用生物信息学软件对该基因进行预测分析。将TmAdh1基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,并利用... 详细信息

为研究多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1的功能,利用PCR分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板扩增TmAdh1的基因组序列和cDNA序列,并利用生物信息学软件对该基因进行预测分析。将TmAdh1基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,并利用Western-blot分析该蛋白的抗原性。结果显示,TmAdh1的基因组序列长1 848bp,由2个内含子和3个外显子组成,其开放阅读框的长度为402bp,编码133个氨基酸残基。预测分析表明,TmAdh1蛋白含有1个N端信号肽序列、1个纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域、1个糖基化位点和8个线性B细胞抗原表位。在原核系统成功表达了约40ku的重组蛋白TmAdh1,用其免疫小鼠制备超免疫血清。Western-blot试验表明,重组蛋白TmAdh1可以与免疫小鼠血清反应。以上研究结果表明,多头带绦虫TmAdh1基因是带科绦虫宿主保护性抗原的同源基因,可作为脑多头蚴病疫苗的候选分子。

关键词：多头带绦虫 TmAdh1 纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域原核表达

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猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒增强O型口蹄疫疫苗免疫水平的研究

猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒增强O型口蹄疫疫苗免疫水平的研...

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第十一届全国病毒学学术研讨会暨第六届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：曾爽陈国华贾怀杰何小兵房永祥景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州 730046

研究背景：CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以非甲基化的CpG基序为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA.研究者发现非甲基化... 详细信息

研究背景：CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以非甲基化的CpG基序为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA.研究者发现非甲基化的CpG基序可以活化广泛的哺乳类动物免疫细胞：包括人、马、牛、羊、狗、猫、家兔、小鼠、豚鼠以及非人灵长类动物、这些活化的细胞通过产生并分泌细胞因子、趋化因子和干扰素等效应分子来实现免疫增强作用.

关键词：干扰素 CpG基序 O型口蹄疫灭活疫苗免疫增强剂

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基于三维细胞培养的多房棘球蚴感染模型的建立

基于三维细胞培养的多房棘球蚴感染模型的建立

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：李立闫鸿斌娄忠子贾万忠戴建武中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国科学院遗传与发育生物学研究所

(目的)多房棘球蚴病是棘球属多房棘球绦虫的幼虫（多房棘球蚴）寄生于动物体及人体内所致的一种严重影响人畜健康的人兽共患寄生虫病。目前对于该病的研究缺乏可模拟体内微环境的体外宿主-寄生虫研究模型,而基于三维（3D）细胞培养的宿... 详细信息

(目的)多房棘球蚴病是棘球属多房棘球绦虫的幼虫（多房棘球蚴）寄生于动物体及人体内所致的一种严重影响人畜健康的人兽共患寄生虫病。目前对于该病的研究缺乏可模拟体内微环境的体外宿主-寄生虫研究模型,而基于三维（3D）细胞培养的宿主-病原相互作用研究为该病的体外研究提供了新方法。本研究旨在使用胶原蛋白为原材料制备的3D多孔支架结构作为培养支架,实现原代肝实质细胞与骨髓间充质干细胞的3D共培养,进一步建立基于3D肝实质细胞-骨髓间充质干细胞的体外原头蚴的生长、发育的肝脏感染模型。（方法）本研究将从SD大鼠分离得到的肝实质细胞与骨髓间充质干细胞分别以5×10～5和1×10～5个数量进行混合,混匀的细胞接种于3D支架材料,添加培养基后置于5%CO的培养箱中进行培养,培养2 d后添加从小鼠感染棘球蚴动物模型中分离得到的原头蚴进行共培养,并分析原头蚴的生长发育,感染性及基因的表达谱。（结果）结果表明,与3D肝实质细胞-骨髓间充质干细胞共培养的原头蚴,在培养第42 d发育为包囊的比例为81.2%,死亡率为9%,另有9.8%的原头蚴未发育。收集上述包囊并给小鼠腹腔注射50个/只,在注射3 m后剖检小鼠,可见其腹腔内大量的包囊,其内部有大量发育良好原头节。对培养后发育为直径大于3 mm的包囊进行转录组分析,与原头蚴转录组相比较有807个差异表达基因,其中165个基因表达上调,642个基因表达下调（p<0.05,q<0.05）。对差异基因进行GO富集分析,结果表明上调的差异基因富集于环核苷酸生物合成和代谢过程、葡萄糖运输及跨膜转运、葡萄糖转运蛋白的跨膜活性、磷-氧裂解酶的活性、硫酸酯水解酶活性和裂合酶活性等（p<0.05）;下调的差异基因富集于对细胞表面受体信号传导途径、细胞黏附、细胞通讯过程、跨膜信号传导受体活性、离子跨膜和被动跨膜转运蛋白活性等（p<0.05）。对差异基因进行KEGG生物通路富集分析,结果表明上调的差异基因富集于代谢途径、半乳糖代谢、叶酸合成等;下调的差异基因富集于神经活性配体受体相互作用等。（结论）结果表明,本研究首次建立了3D多房棘球蚴培养、感染模型,并筛选出了大量差异表达基因,为体外棘球蚴-宿主相互作用提供了新方法。

关键词：三维细胞培养多房棘球蚴感染模型

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寄生性蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

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中国动物检疫 2015年第3期32卷 57-61页

作者：盖文燕王君玮付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)是一种蛋白水解酶,广泛存在于生物体中。本文论述了丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类、结构、功能及在寄生性蠕虫中的研究进展。指出通过对Serpin的研究,有望使其作为寄生性蠕虫病诊断和疫苗的候选分子,为寄生性蠕... 详细信息

丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)是一种蛋白水解酶,广泛存在于生物体中。本文论述了丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类、结构、功能及在寄生性蠕虫中的研究进展。指出通过对Serpin的研究,有望使其作为寄生性蠕虫病诊断和疫苗的候选分子,为寄生性蠕虫病防治奠定基础。

关键词：寄生性蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂

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PCR-RFLP技术鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

PCR-RFLP技术鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：王力骆学农刘光学才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室吉林大学动物医学学院

人带绦虫病是由猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫寄生于人体小肠内引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,其流行广泛,危害严重。传统的绦虫鉴别主要依据虫体的形态学特点,包括节片的数目、头节小钩的有无、孕节的子宫分支、成节中第三卵巢... 详细信息

人带绦虫病是由猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫寄生于人体小肠内引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,其流行广泛,危害严重。传统的绦虫鉴别主要依据虫体的形态学特点,包括节片的数目、头节小钩的有无、孕节的子宫分支、成节中第三卵巢叶和阴道括约肌的有无等。依靠形态特征可以把猪带绦虫与牛带绦虫和亚洲带绦虫相鉴别,但牛带绦虫和亚洲带绦虫形态相似,很难用传统方法鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫。线粒体细胞色素C氧化酶1(COX1,cytochrome c oxidase subunit 1)用于物种间及物种亚型的分类鉴别已有报道。本实验基于COX1基因采用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术进行牛带绦虫和亚洲带绦虫的鉴别。首先,分别取本实验室保存的牛带绦虫、亚洲带绦虫成虫节片20 mg左右,移到已预冷的研钵内缓慢倒入适量液氮快速用力研磨成匀浆,按照组织DNA提取试剂盒说明书提取虫体基因组DNA,并检测DNA含量;其次,根据带绦虫线粒体COX1基因序列设计引物,分别以牛带绦虫和亚洲带绦虫的DNA为模板进行常规PCR扩增,PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离并使用DNA胶回收试剂盒进行回收纯化。最后,分别取上述胶回收产物均加入限制性内切酶BamHⅠ37℃水浴孵育3 h,经2%的琼脂糖凝胶电泳分离孵育后的DNA片段,在紫外灯下观察、拍照。1%的琼脂糖凝胶电泳结果显示,PCR反应均扩增出长度大约为961bp的COX1基因片段。BamHⅠ孵育的目的基因经2%琼脂糖凝胶电泳显示牛带绦虫仅有一条大小为961bp的条带,亚洲带绦虫有两条大小分别为640bp和321bp的条带。本实验应用PCR-RFLP方法成功鉴别出牛带绦虫和亚洲带绦虫,仅有一条约为961bp大小条带的是牛带绦虫;有640bp和321bp两条明显条带的是亚洲带绦虫。本实验方法操作简便,结果直观,为疫区基层从业人员准确区分牛带绦虫和亚洲带绦虫、为有关部门制定正确防治措施提供保障。

关键词：牛带绦虫亚洲带绦虫 PCR-RFLP 鉴别

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PCR-RFLP技术鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

PCR-RFLP技术鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

目的:人带绦虫病是由猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫寄生于人体小肠内引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,其流行广泛,危害严重。传统的绦虫鉴别主要依据虫体的形态学特点,包括节片的数目、头节小钩的有无、孕节的子宫分支、成节中第三... 详细信息

目的:人带绦虫病是由猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲带绦虫寄生于人体小肠内引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,其流行广泛,危害严重。传统的绦虫鉴别主要依据虫体的形态学特点,包括节片的数目、头节小钩的有无、孕节的子宫分支、成节中第三卵巢叶和阴道括约肌的有无等。依靠形态特征可以把猪带绦虫与牛带绦虫和亚洲带绦虫相鉴别,但牛带绦虫和亚洲带绦虫形态相似,很难用传统方法鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫。线粒体细胞色素C氧化酶1(COX1,cytochrome c oxidase subunit 1)用于物种间及物种亚型的分类鉴别已有报道。本实验基于COX1基因采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术进行牛带绦虫和亚洲带绦虫的鉴别。方法:首先,分别取本实验室保存的牛带绦虫、亚洲带绦虫成虫节片20㎎左右,移到已预冷的研钵内缓慢倒入适量液氮快速用力研磨成匀浆,按照组织DNA提取试剂盒说明书提取虫体基因组DNA,并检测DNA含量;其次,根据带绦虫线粒体COX1基因序列设计引物,分别以牛带绦虫和亚洲带绦虫的DNA为模板进行常规PCR扩增,PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离并使用DNA胶回收试剂盒进行回收纯化。最后,分别取上述胶回收产物均加入限制性内切酶Bam HⅠ37℃水浴孵育3 h,经2%的琼脂糖凝胶电泳分离孵育后的DNA片段,在紫外灯下观察、拍照。结果:1%的琼脂糖凝胶电泳结果显示,PCR反应均扩增出长度大约为961bp的COX1基因片段。Bam HⅠ孵育的目的基因经2%琼脂糖凝胶电泳显示牛带绦虫仅有一条大小为961bp的条带,亚洲带绦虫有两条大小分别为640bp和321bp的条带。结论:本实验应用PCR-RFLP方法成功鉴别出牛带绦虫和亚洲带绦虫,仅有一条约为961bp大小条带的是牛带绦虫;有640bp和321bp两条明显条带的是亚洲带绦虫。本实验方法操作简便,结果直观,为疫区基层从业人员准确区分牛带绦虫和亚洲带绦虫、为有关部门制定正确防治措施提供保障。

关键词：牛带绦虫亚洲带绦虫 PCR-RFLP 鉴别

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