检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2009年第9期41卷 101-104页

作者：张淑刚张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是世界上危害最严重的动物疾病之一,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,并危害人体健康。而防制口蹄疫的重要环节是要作出及时、准确的诊断。本文对口蹄疫新型诊断技术包括基因芯片技术、免疫层析快速诊断试纸条、实时荧... 详细信息

口蹄疫是世界上危害最严重的动物疾病之一,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,并危害人体健康。而防制口蹄疫的重要环节是要作出及时、准确的诊断。本文对口蹄疫新型诊断技术包括基因芯片技术、免疫层析快速诊断试纸条、实时荧光定量PCR技术、生物传感器的研究进展进行了介绍。

关键词：口蹄疫基因芯片技术免疫层析快速诊断试纸条实时荧光定量PCR技术生物传感器

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江西省部分猪场副猪嗜血杆菌病血清学调查

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动物医学进展 2009年第12期30卷 107-109页

作者：赵萍贺英储岳峰高鹏程逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

为调查江西省副猪嗜血杆菌病的流行情况,采集未进行疫苗免疫接种的11个猪场150份血清,应用间接血凝试验检测其抗体滴度,结果表明本地区副猪嗜血杆菌抗体总阳性率为44%,其中母猪阳性率偏高,说明该省猪场存在一定程度的副猪嗜血杆菌的感染。

关键词：副猪嗜血杆菌血清学调查猪场

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安徽省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

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江苏农业科学 2009年第3期37卷 262-263页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

用间接血凝检测方法对安徽省部分猪场的猪传染性胸膜肺炎流行情况进行调查研究,结果该地区猪血清抗体总阳性率为16.6%,其中母猪阳性率偏高、为22.4%。

关键词：猪传染性胸膜肺炎调查血清抗体阳性率

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假基因的发现与研究

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生物技术通报 2009年第12期25卷 27-29,36页

作者：徐娜李宝玉柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046

随着人类基因组计划的顺利实施,人们分离、鉴定新基因的速度越来越快,对于占人类基因组97%的非表达序列的研究,即对所谓"垃圾"DNA的研究已成为全球范围内关注的热点。现就假基因的发现、命名和分类、特性和分布、产生、作用... 详细信息

随着人类基因组计划的顺利实施,人们分离、鉴定新基因的速度越来越快,对于占人类基因组97%的非表达序列的研究,即对所谓"垃圾"DNA的研究已成为全球范围内关注的热点。现就假基因的发现、命名和分类、特性和分布、产生、作用机理、功能、进化及展望等方面进行论述。

关键词：假基因分类特性与分布产生作用机理功能与进化

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奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析

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甘肃农业大学学报 2009年第3期44卷 6-9,15页

作者：宋竹青魏彦明周继章曹小安王光华邱昌庆甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的... 详细信息

以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1 170 bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9 ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1-22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompA序列的同源性均达到了98%以上.

关键词：奶牛衣原体ompA克隆序列分析

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青海省部分地区副猪嗜血杆菌流行病学研究

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华北农学报 2009年第B08期24卷 236-239页

作者：逯忠新高鹏程贺英储岳峰赵萍赵海燕马利青陆艳蔡其刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 青海大学畜牧兽医科学院青海西宁810016

为了明确青海省4个地区12个猪场副猪嗜血杆菌病的流行情况,应用间接血凝对不同猪场639份血清进行了检测;对疑似副猪嗜血杆菌病的15份病料进行了病原分离鉴定,应用琼脂扩散试验对分离菌进行了分型。结果4个地区副猪嗜血杆菌最高阳性率为5... 详细信息

为了明确青海省4个地区12个猪场副猪嗜血杆菌病的流行情况,应用间接血凝对不同猪场639份血清进行了检测;对疑似副猪嗜血杆菌病的15份病料进行了病原分离鉴定,应用琼脂扩散试验对分离菌进行了分型。结果4个地区副猪嗜血杆菌最高阳性率为58.73%,最低阳性率为0,平均阳性率为25.19%;从疑似副猪嗜血杆菌病患病猪的肺脏和腹膜中分离到2株革兰氏阴性细小杆菌,经生化试验和PCR鉴定,确定分离菌为副猪嗜血杆菌,分型结果为副猪嗜血杆菌血清5型(QH0804)和7型(QH0811)。结果表明,副猪嗜血杆菌病在4个地区一些猪场有不同程度的流行和发生。这一结果为该地区有效控制该病防制提供了依据。

关键词：副猪嗜血杆菌流行病学分离鉴定

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猪类乙型肝炎病毒的血清学检测及其S和C基因的克隆与分析

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甘肃农业大学学报 2009年第2期44卷 13-19页

作者：姜中毅兰喜李志勇杨斌张韵李学瑞李宝玉殷相平柳纪省甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

对甘肃省兰州市周边地区采集的300份猪血清的表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)、E抗体(抗-HBe)、核心抗体(抗-HBc)、表面抗体(抗-HBs)5项指标进行检测,并从HBsAg和抗-HBs抗体阳性血清中提取DNA,进行乙型肝炎病毒(HBV)S基因和C基因的巢式PC... 详细信息

对甘肃省兰州市周边地区采集的300份猪血清的表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)、E抗体(抗-HBe)、核心抗体(抗-HBc)、表面抗体(抗-HBs)5项指标进行检测,并从HBsAg和抗-HBs抗体阳性血清中提取DNA,进行乙型肝炎病毒(HBV)S基因和C基因的巢式PCR扩增、克隆、测序和序列分析.结果表明:血清学检测的上述5项指标阳性率分别为10.7%3、.0%、6.1%、3.3%和88.5%,大三阳(即HBsAg、HBeAg、抗-HBs抗体均为阳性)的猪血清样本6份,阳性率为2%;序列分析表明,猪类HBV的S基因和C基因与GenBank中的人HBV同源性达到99%,说明猪存在类HBV感染,且猪类HBV与人HBV存在相关关系.

关键词：猪乙型肝炎病毒血清学检测 S和C基因克隆

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双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定

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生物技术通报 2009年第4期25卷 82-85,90页

作者：项海涛杨彬温峰琴胡永浩柳纪省甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046

利用pBudcE4.1双表达载体构建shRNA与蛋白共表达载体,为双效疫苗的研制提供新的研究思路。以含U6启动子的载体为模板,PCR扩增得到U6启动子,用其置换载体pBudcE4.1内的CMV启动子的核心部分构建shRNA与蛋白共表达载体。用干扰绿色荧光蛋... 详细信息

利用pBudcE4.1双表达载体构建shRNA与蛋白共表达载体,为双效疫苗的研制提供新的研究思路。以含U6启动子的载体为模板,PCR扩增得到U6启动子,用其置换载体pBudcE4.1内的CMV启动子的核心部分构建shRNA与蛋白共表达载体。用干扰绿色荧光蛋白表达的方法鉴定重组载体中的U6启动子能否启动shRNA的表达。经PCR扩增、双酶切鉴定及DNA测序证明成功构建了载体pBudcE4.1-U6。用干扰载体pBudcE4.1-U6-eGFPshRNA与含eGFP的载体共转染293T细胞后,荧光显微镜观察显示eGFP的表达量下降;流式细胞仪检测细胞的转染效率降低。研究结果证明U6启动子正常发挥作用。成功构建RNAi与蛋白共表达载体,为利用该载体研制动物双效疫苗奠定了基础。

关键词： RNAi 共表达载体 U6启动子构建鉴定

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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

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甘肃农业大学学报 2009年第4期44卷 19-24页

作者：殷相平李志勇李江涛李宝玉兰喜杨彬李学瑞柳纪省甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在... 详细信息

对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,可获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N,经PacI酶切后转染HEK-293细胞,可获得带有目的基因的重组腺病毒.重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次后,在细胞内的病变时间缩短为20 h以内.经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50为***-1,用RT-PCR法可检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段;重组腺病毒经口服免疫小白鼠,对狂犬病毒CVS毒株的免疫保护率可达80%.

关键词：狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫

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猪戊型肝炎病毒swCH-GS189株ORF2基因的克隆及序列分析

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生物技术通报 2009年第5期25卷 122-126页

作者：郝宝成兰喜柳纪省胡永浩甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046

为进行猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2基因特征研究,参照GenBank中已发表的戊型肝炎病毒(HEV)核酸序列,设计了一对扩增HEVORF2基因的引物,利用RT-PCR等方法克隆出了一株猪戊型肝炎病毒甘肃分离株GS189的ORF2基因cDNA片段。序列测定结果表明,sw... 详细信息

为进行猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2基因特征研究,参照GenBank中已发表的戊型肝炎病毒(HEV)核酸序列,设计了一对扩增HEVORF2基因的引物,利用RT-PCR等方法克隆出了一株猪戊型肝炎病毒甘肃分离株GS189的ORF2基因cDNA片段。序列测定结果表明,swCH-GS189株的ORF2基因长2 025 bp,编码674个氨基酸,与GenBank中公布的其它毒株间的核苷酸序列同源性为79.1%～91.8%,推导的氨基酸序列同源性为89.5%～98.8%。系统发育进化树结果表明,该分离株为基因Ⅳ型。

关键词：戊型肝炎病毒 ORF2基因克隆序列分析

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