检索结果-内蒙古大学图书馆

第五届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：陈泽任巧云罗金李凯罗建勋殷宏刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进... 详细信息

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进行多态性分析.结果长角血蜱存在8种单倍型，其中Ⅰ型和Ⅱ型最为常见，分别含有21和16个个体，其次为Ⅲ、Ⅳ型分别包括4和5个个体.Ⅴ-Ⅷ型均由单一个体构成.此外，同一地区的不同个体也包括几种不同的单倍型，其中北京和贵州独山的长角血蜱多态性最大(数量分别为4和3)，其次为湖北、广西和山东(单倍型均为2种)，云南、甘肃和河北的多态性最低(1种).结论我国分布的长角血蜱的16S rDNA具有较高的多态性，并具有一定的地区特异性.

关键词： 16S rRNA基因长角血蜱多态性分析

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猪繁殖与呼吸综合征病毒shRNA和GP5及M蛋白重组腺相关病毒的制备

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中国兽医科学 2013年第5期43卷 480-487页

作者：邱燕兰喜李学瑞殷相平李宝玉柳纪省杨彬中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为研究新型猪繁殖与呼吸综合征疫苗,采用基因克隆技术将合成的特异性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RNA干扰寡核苷酸序列克隆至pAAV Helper-Free System中表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启动子下游,将PRRSV的ORF5、ORF6基因克隆至pAAV-... 详细信息

为研究新型猪繁殖与呼吸综合征疫苗,采用基因克隆技术将合成的特异性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RNA干扰寡核苷酸序列克隆至pAAV Helper-Free System中表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启动子下游,将PRRSV的ORF5、ORF6基因克隆至pAAV-U6-IRES-hrGFP的CMV启动子下游,构建重组质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP-shRNA-ORF5-ORF6;将该质粒与系统中的控制质粒pAAV-RC、辅助质粒pHelper用磷酸钙法共转染293T细胞,包装得到表达PRRSV shRNA、GP5及M蛋白的重组腺相关病毒rAAV-shRNA-ORF5-ORF6。原病毒液经分离纯化后,用点杂交法测定的重组病毒的物理效价高达1010copies/mL。Western-blot检测该重组病毒感染293T细胞后GP5、M蛋白的表达,并通过PRRSV抑制试验检测rAAV-shRNA-ORF5-ORF6的干扰作用。结果显示,成功构建了重组腺相关病毒rAAV-shRNA-ORF5-ORF6,并能在体外表达GP5和M蛋白;rAAV-shRNA-ORF5-ORF6转导Marc145细胞后能够抑制PRRSV的复制。表明成功构建了重组腺相关病毒rAAV-shRNA-ORF5-ORF6,为新型猪繁殖与呼吸综合征双功能疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒短发夹RNA 腺相关病毒 GP5蛋白 M蛋白双功能疫苗

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长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析

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中国兽医科学 2013年第8期43卷 806-811页

作者：赵波刘光远罗金张萍田占成谢俊仁田美媛王芳芳袁小松中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了... 详细信息

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。

关键词：长角血蜱 MESK基因生物信息学克隆真核表达

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家蚕杆状病毒表达系统及其在口蹄疫疫苗研究中的应用

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中国预防兽医学报 2013年第9期35卷 776-778页

作者：关洪鑫李志勇白银梅柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫（Foot and mouth disease, FMD）是由FMD病毒（FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性人兽共患传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的动物传染病，我国将其列为一类动物传染病。该病传播途径多，传播... 详细信息

口蹄疫（Foot and mouth disease, FMD）是由FMD病毒（FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性人兽共患传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的动物传染病，我国将其列为一类动物传染病。该病传播途径多，传播速度快。目前除了北美、澳洲等地区外，世界范围内多次暴发流行。最近几年，一些已经消灭FMD的国家又再次爆发，FMD防制形势依然严峻。在FMD防制中，加强流行病学监测和采取疫苗免疫是防制其发生的主要措施和关键环节。因此，特异性诊断抗原的制备和新型疫苗的开发就显得尤为重要。

关键词：口蹄疫疫苗家蚕杆状病毒表达系统 FMD病毒世界动物卫生组织人兽共患传染病动物传染病应用流行病学监测

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绵羊肺炎支原体的分离鉴定

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动物医学进展 2013年第6期34卷 193-195页

作者：张轩赵萍贺英高鹏程储岳峰郑莹莹逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为明确甘肃某羊场发生的疑似绵羊肺炎支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从一份患肺炎的绵羊肺脏病料中分离到一个菌落。通过菌落形态观察、生化试验和特异性PCR方法进行了鉴定。结果分离物在固体培养基上生长的菌落呈圆形无中心脐,能... 详细信息

为明确甘肃某羊场发生的疑似绵羊肺炎支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从一份患肺炎的绵羊肺脏病料中分离到一个菌落。通过菌落形态观察、生化试验和特异性PCR方法进行了鉴定。结果分离物在固体培养基上生长的菌落呈圆形无中心脐,能水解葡萄糖但不能水解精氨酸,不消化酪蛋白,PCR能扩增出绵羊肺炎支原体特异的大小为361bp的目的片段,测序比对表明该基因序列与绵羊肺炎支原体标准株Y98的同源性为98%。鉴定结果表明引起该养殖场发病的病原为绵羊肺炎支原体。

关键词：绵羊肺炎支原体分离鉴定聚合酶链反应

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猪嵴病毒441株3D基因的克隆及序列分析

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生物技术通报 2013年第11期29卷 148-152页

作者：王恩丽兰喜刘伟杨彬柳纪省马小军甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室草食动物疫病重点开放实验室兰州730046

根据GenBank中登录的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR技术及3'RACE法扩增猪嵴病毒441株(swKoV CH441株)3D基因。成功扩增了swKoV CH441株的3D基因,3'非编码区(3'untranslated region,3'U... 详细信息

根据GenBank中登录的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR技术及3'RACE法扩增猪嵴病毒441株(swKoV CH441株)3D基因。成功扩增了swKoV CH441株的3D基因,3'非编码区(3'untranslated region,3'UTR)及Poly(A),扩增的基因片段长度分别为1 064、1 046和592 bp,包括3A、3B、3C、3D基因序列,3'UTR序列和一个至少含有29个Poly(A)的尾巴。序列分析结果表明,swKoV CH441株3D基因全长1 407 bp,编码468个氨基酸,分子质量约为53 369.29 D,理论等电点为6.12;3'UTR位于终止密码子TGA之后,长166 bp;swKoV CH441株与其他猪嵴病毒3D基因核苷酸序列相似性在92.2%-93.4%,氨基酸一致性为97.9%-99.4%。遗传进化分析表明,swKoV CH441株与国内株亲缘关系较近,与匈牙利株亲缘关系较远。

关键词： swKoV CH441株 RT-PCR 3’RACE 3D 基因序列分析

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稳定表达T7 RNA聚合酶的BHK-21细胞系的建立

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中国兽医科学 2013年第7期43卷 749-753页

作者：关洪鑫李志勇高鹏许生智白银梅柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

为了建立能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞系,利用PCR方法从BL21(DE3)细菌中扩增T7RNA聚合酶基因,并克隆到慢病毒表达系统的pLVX-Puro转移载体上,然后与Lenti-X HTX包装载体共转染Lenti-X 293T细胞系,收获高效价的慢病毒。将慢病毒感... 详细信息

为了建立能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞系,利用PCR方法从BL21(DE3)细菌中扩增T7RNA聚合酶基因,并克隆到慢病毒表达系统的pLVX-Puro转移载体上,然后与Lenti-X HTX包装载体共转染Lenti-X 293T细胞系,收获高效价的慢病毒。将慢病毒感染BHK-21细胞,用嘌呤霉素多次筛选后获得抗性细胞。用构建的pET-28a-IRES-EGFP检测质粒转染得到的抗性细胞,有荧光表达的细胞即可以稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系。结果表明:构建的BHK-T7株细胞能稳定表达T7RNA聚合酶。

关键词： T7 RNA聚合酶细胞系慢病毒表达系统

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microRNA碱基编辑特性的研究进展

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中国兽医科学 2013年第6期43卷 650-654页

作者：罗金刘光远袁小松王芳芳田占成谢俊仁王辉中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 牛津大学生态水文研究中心

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前... 详细信息

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前景,以期为碱基编辑的生物学机制研究提供参考。

关键词： microRNA 碱基编辑研究进展

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猪传染性胃肠炎病毒致病机制的研究进展

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世界华人消化杂志 2013年第1期21卷 39-43页

作者：殷相平任晓峰柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃省兰州市730046 东北农业大学兽医学院预防兽医学系黑龙江省哈尔滨市150030

猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起仔猪严重腹泻的一种动物冠状病毒.本文就TGEV的基因组结构、主要结构蛋白及功能、病毒繁殖与复制、病毒受体、病毒变异以及病毒致病机制等方面的国内外研... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起仔猪严重腹泻的一种动物冠状病毒.本文就TGEV的基因组结构、主要结构蛋白及功能、病毒繁殖与复制、病毒受体、病毒变异以及病毒致病机制等方面的国内外研究进展和现状进行综述.这些资料有助于理解TGEV的分子生物学特性、遗传与变异规律,对新型疫苗的研发及抗病毒药物的筛选具有重要的理论价值.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒致病机制

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细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的研究进展

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中国兽医科学 2013年第11期43卷 1206-1210页

作者：刘全元闫鸿斌娄忠子李立史万贵刘聪暖殷宏贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球... 详细信息

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球蚴病分子流行病学调查和防治策略的制定提供理论依据和技术指导。

关键词：细粒棘球绦虫 G3基因型 cox1基因 nad1基因流行病学

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