检索结果-内蒙古大学图书馆

SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析

细胞与分子免疫学杂志 2010年第7期26卷 631-634页

作者：高闪电常惠芸独军政邵军军丛国正林彤韩雪清谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029

目的：表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端，进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法：以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VPl编码区的重组克隆载体为模板，设计特异性引物，扩增VPl基因及其C端编码区，然后将该其分别克... 详细信息

目的：表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端，进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法：以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VPl编码区的重组克隆载体为模板，设计特异性引物，扩增VPl基因及其C端编码区，然后将该其分别克隆至原核表达载体pET-30a（＋）中，转化大肠杆菌工程菌株BL21（DE3）plysS，经IPTG诱导，以金属离子螯合层析法对表达的VPl、VP1C端融合蛋白进行纯化，经Westernblot对其反应原性进行分析。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体，以ELISA方法测定抗体效价。结果：实现了SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端的高效表达，表达产物主要以包涵体的形式存在。SDS—PAGE显示纯化的目的蛋白分别在相对分子质量35000和19000处有单一目的条带，具有较高的纯度。Western blot结果显示，纯化的VP1及其C端均可与牛SAT2型FMDV阳性血清反应，而与阴性对照血清无交叉反应。结论：用纯化的VPl及VP1C融合蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗体效价达1：12800以上，具有较高的特异性。

关键词： SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1 原核表达反应原性分析

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山羊痘病毒古浪株P32毒力蛋白的结构模拟与分析

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中国兽医科学 2010年第8期40卷 771-777页

作者：赵志荀吴国华颜新敏崔力凡李健朱海霞张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

以山羊痘病毒(GPV)古浪(Gulang)株的DNA为模板,采用PCR扩增目的基因p32,应用TM-pred软件预测其跨膜结构区域,通过Threading方法建立GPVGulang株P32蛋白的3D结构,并综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测其B细胞抗原表... 详细信息

以山羊痘病毒(GPV)古浪(Gulang)株的DNA为模板,采用PCR扩增目的基因p32,应用TM-pred软件预测其跨膜结构区域,通过Threading方法建立GPVGulang株P32蛋白的3D结构,并综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测其B细胞抗原表位。结果表明,p32在核苷酸水平上非常保守,19株GPVp32基因的整体变异率为0.22%。GPVGulang株P32结构蛋白的三维空间结构有不同的结构区域,共由14个α-螺旋、5个β折叠、35个转角和若干无规则卷曲构成。P32蛋白呈现较规则的空间构象,其中羧基末端第286～306位氨基酸区段为跨膜区域,11～19、21、47、66、123、154、155、183、185、225、230～232、235、238、239这些氨基酸在空间上共同形成的区域极有可能是抗原表位区域。

关键词：山羊痘病毒 P32结构蛋白 3D结构 B细胞表位

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腺病毒在动物口蹄疫防治中的研究进展

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江苏农业科学 2010年第2期38卷 240-241页

作者：王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

由于腺病毒载体转导目的基因具有高效率、低致病性、高滴度以及在体内不整合到动物宿主细胞染色体等优点,已被认为是最有效的转基因载体之一,成为重组疫苗和基因治疗研究的热点。本文就腺病毒载体的生物学特性、研究进展及在口蹄疫防治... 详细信息

由于腺病毒载体转导目的基因具有高效率、低致病性、高滴度以及在体内不整合到动物宿主细胞染色体等优点,已被认为是最有效的转基因载体之一,成为重组疫苗和基因治疗研究的热点。本文就腺病毒载体的生物学特性、研究进展及在口蹄疫防治中发挥的重要作用进行综述。

关键词：腺病毒载体重组疫苗 shRNA 干扰素口蹄疫

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细菌密度感应信号AI-2及其与生物被膜形成的关系

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畜牧与兽医 2010年第3期42卷 99-101页

作者：马艳平陈豪泰张杰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

密度感应(quorum sensing,QS)是广泛存在于革兰阴性菌和革兰阳性菌的一种密度依赖的基因表达调控机制。自体诱导物(AI-2)通过信号分子的浓度变化直接或间接调控细菌目的基因的表达,细菌毒力因子的调控、生物膜结构的稳定、细菌的抗药性... 详细信息

密度感应(quorum sensing,QS)是广泛存在于革兰阴性菌和革兰阳性菌的一种密度依赖的基因表达调控机制。自体诱导物(AI-2)通过信号分子的浓度变化直接或间接调控细菌目的基因的表达,细菌毒力因子的调控、生物膜结构的稳定、细菌的抗药性、生物发光效应等都受其影响,本文主要阐述了AI-2的作用机理及其与生物被膜形成的关系。

关键词：密度感应信号AI-2 作用机理生物被膜形成

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牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达

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江苏农业学报 2010年第4期26卷 755-759页

作者：丁耀忠张杰刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-... 详细信息

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。

关键词：牛朊蛋白 COS-7细胞间接免疫荧光检测技术

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细胞传感器检测技术研究进展

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安徽农业科学 2010年第33期38卷 18673-18674,18677页

作者：杨双马军武中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了... 详细信息

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了细胞传感器在病原体和毒素检测中的最新研究进展,分别叙述了现有的各类细胞传感器的元件构成和作用原理,并展望了细胞传感器未来研究和应用方面的发展方向。

关键词：细胞传感器病原体毒素细胞受体细胞病变

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黑山羊传染性胸膜肺炎和羊口疮混合感染的诊断报告

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中国兽医杂志 2010年第8期46卷 80-81页

作者：张克山逯忠新储岳峰高鹏程刘湘涛尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

1发病情况2009年5月到6月湖北省某羊场从四川省某公司(每家每户散养后集中),分3批购得黑山羊847只。第1批羊购进后第3天出现咳嗽并死亡1只,第15天有30%羊群表现出咳嗽症状,第20天约有80%的羊表现为精神沉郁,食欲减退,咳嗽,消瘦同时,口... 详细信息

1发病情况2009年5月到6月湖北省某羊场从四川省某公司(每家每户散养后集中),分3批购得黑山羊847只。第1批羊购进后第3天出现咳嗽并死亡1只,第15天有30%羊群表现出咳嗽症状,第20天约有80%的羊表现为精神沉郁,食欲减退,咳嗽,消瘦同时,口、唇部结痂并出现大批死亡,第2批羊购进后和第1批羊混合饲养,其中第3批的192只羊买回后即转手卖给当地农户。[第一段]

关键词：传染性胸膜肺炎羊口疮黑山羊诊断报告混合感染发病情况食欲减退混合饲养

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口蹄疫新型疫苗的研究进展

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江苏农业科学 2010年第3期38卷 277-279页

作者：刘文倩刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各... 详细信息

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各种基因工程疫苗如核酸疫苗、可饲疫苗、病毒载体疫苗、基因工程亚单位疫苗和抗原表位疫苗等不断涌现,为口蹄疫新型疫苗的研究与利用带来了新的希望。

关键词：口蹄疫新型疫苗研究进展

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猪圆环病毒2型的全基因克隆和序列分析

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动物医学进展 2010年第10期31卷 1-5页

作者：杨顺利尹双辉杨亚民刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

参考GenBank中发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因序列,设计一对PCR引物,从病料中扩增获得4株PCV-2的全基因组序列,分别命名为SDNY-PCV-2、ShD-PCV-2、HBbd-PCV-2、GSLN-PCV-2,经测序确定长度均为1 767 bp。应用DNA Star序列分析表明,4... 详细信息

参考GenBank中发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因序列,设计一对PCR引物,从病料中扩增获得4株PCV-2的全基因组序列,分别命名为SDNY-PCV-2、ShD-PCV-2、HBbd-PCV-2、GSLN-PCV-2,经测序确定长度均为1 767 bp。应用DNA Star序列分析表明,4个PCV-2分离株与国外部分分离株的核苷酸序列同源性达95.5%-99.8%,与PCV-1毒株的序列同源性为76.2%-77.6%。与国内外部分分离毒株序列进化树分析表明,4个PCV-2分离毒株处于不同分支中,存在一定差异。

关键词：猪圆环病毒2型全基因克隆序列分析

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转基因克隆动物的发展及其应用

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动物医学进展 2010年第7期31卷 103-106页

作者：骆继怀独军政常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应... 详细信息

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应器方面的应用,存在的问题与安全性评价等方面做了较系统的阐述,并预测了转基因克隆动物应用的发展前景及其给社会带来的深远影响。

关键词：转基因克隆动物异体器官移植抗病育种乳腺生物反应器

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