检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业科学 2009年第3期37卷 244-246页

作者：马艳平刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

副猪嗜血杆菌是存在于健康猪上呼吸道的一种致病菌,也是格拉泽氏病的病原。副猪嗜血杆菌生物膜的形成与其致病力的变化和造成慢性感染有直接关系,研究副猪嗜血杆菌生物膜的形成及功能对阐明致病菌的慢性感染和抗生素的耐受性具有重要的... 详细信息

副猪嗜血杆菌是存在于健康猪上呼吸道的一种致病菌,也是格拉泽氏病的病原。副猪嗜血杆菌生物膜的形成与其致病力的变化和造成慢性感染有直接关系,研究副猪嗜血杆菌生物膜的形成及功能对阐明致病菌的慢性感染和抗生素的耐受性具有重要的科学意义。本文就副猪嗜血杆菌生物被膜的形成机制、影响因素、功能、及其研究方法进行综述。

关键词：副猪嗜血杆菌生物被膜形成机制功能

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口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备

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中国预防兽医学报 2009年第1期31卷 69-73页

作者：田美娜李永亮付元芳卢曾军袁明吴磊刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点实验室／口蹄疫国家参考实验室甘肃兰州730046 河北畜牧良种工作站河北石家庄050061

本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Do... 详细信息

本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C'3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白2C 大肠杆菌表达单克隆抗体

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副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

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西南农业学报 2009年第3期22卷 834-837页

作者：马艳平张杰陈豪泰马丽娜丁耀忠杨生海刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPG)是鸡传染性鼻炎的病原菌。近年来,北京、陕西、四川等地证明了该病的发生。为了了解该病在山东省的流行状况,从山东德州地区5个鸡场的20只疑似鸡传染性鼻炎鸡体内共分离到6株细菌,经细菌... 详细信息

副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPG)是鸡传染性鼻炎的病原菌。近年来,北京、陕西、四川等地证明了该病的发生。为了了解该病在山东省的流行状况,从山东德州地区5个鸡场的20只疑似鸡传染性鼻炎鸡体内共分离到6株细菌,经细菌分离培养、生化试验、鸡胚接种试验和16s rDNA基因序列分析等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌。并经玻片凝集试验、Dot-ELISA、血凝试验分型研究,证实6株分离菌株均为副猪嗜血杆菌A型。从而为以后鸡传染性鼻炎的免疫治疗提供理论依据。

关键词：副鸡嗜血杆菌分离鉴定 16s rDNA 鸡胚接种试验血清分型

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防御素临床应用现状的研究进展

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江苏农业科学 2009年第6期37卷 26-28页

防御素是广泛存在于动植物及人体内的一类不含糖链的碱性阳离子多肽,具有广谱抗菌活性。在杀灭细菌、对抗癌症、杀伤病毒、转基因工程及食品方面有重要作用。本文从防御素的结构、生物学活性、临床应用等方面进行综述,从而为临床医学提... 详细信息

防御素是广泛存在于动植物及人体内的一类不含糖链的碱性阳离子多肽,具有广谱抗菌活性。在杀灭细菌、对抗癌症、杀伤病毒、转基因工程及食品方面有重要作用。本文从防御素的结构、生物学活性、临床应用等方面进行综述,从而为临床医学提供参考。

关键词：防御素结构生物学活性临床应用

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表达Asia 1型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因的重组山羊痘病毒弱毒株的构建

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中国兽医科学 2009年第3期39卷 209-213页

作者：张强鞠厚斌吴国华颜新敏李健朱海霞马维民郑海学朱彩珠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161

为构建表达Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A和3C基因的重组山羊痘病毒(GTPV)弱毒株,将Asia 1型FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因、蛋白酶3C基因、绿色荧光蛋白(EGFP)基因、痘苗病毒启动子(p7.5)相连,构建成一整体基因表达盒p7.5-EGFP-P12A3C。... 详细信息

为构建表达Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A和3C基因的重组山羊痘病毒(GTPV)弱毒株,将Asia 1型FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因、蛋白酶3C基因、绿色荧光蛋白(EGFP)基因、痘苗病毒启动子(p7.5)相连,构建成一整体基因表达盒p7.5-EGFP-P12A3C。以GTPV胸苷激酶基因序列中的KpnⅠ酶切位点为插入位点,将整体基因表达盒插入转移载体骨架pUC119-TK中,构建GTPV转移载体pTK-p7.5-EGFP-P12A3C。将转移载体转染GTPV弱毒株AV 41感染的BHK-21细胞,转染后24 h就可见到绿色荧光,表明,成功获得了能表达目的蛋白的重组山羊痘病毒株TK-/EGFP+/FMDV P1-2A3C+/GTPV。

关键词：口蹄疫病毒山羊痘病毒 P1 2A基因 3C基因胸苷激酶基因

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口蹄疫A型病毒AF/72株标准细胞毒株的研制

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华北农学报 2009年第3期24卷 74-77页

作者：杜进鑫王永录张永光方玉珍蒋守田吕建亮潘丽刘力宽中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

用口蹄疫A型病毒AF/72株的第3代乳鼠组织毒,通过乳鼠继续适应3代后,转适BHK-21细胞,获得该毒株的细胞毒AF/72/MF6/BF12,经测定其TCID50为10-8.0/mL;经RT-PCR获得其VP1基因序列,并与GenBank中的其他6株口蹄疫A型病毒株比对,同源性均大于8... 详细信息

用口蹄疫A型病毒AF/72株的第3代乳鼠组织毒,通过乳鼠继续适应3代后,转适BHK-21细胞,获得该毒株的细胞毒AF/72/MF6/BF12,经测定其TCID50为10-8.0/mL;经RT-PCR获得其VP1基因序列,并与GenBank中的其他6株口蹄疫A型病毒株比对,同源性均大于85%;经无菌检验和外源病毒检验,纯净性达到兽用生物制品标准要求;经间接夹心ELISA测定,OD值均大于0.2,且该毒仅能被口蹄疫A型标准血清中和,具有型特异性;经紫外分光光度法测定其146S含量,均值为189 ng/mL,远大于22 ng/mL的国际标准。综合纯净性检验结果、特异性检验结果和146S含量,确定AF/72/MF6/BF12为口蹄疫A型病毒株AF/72的标准细胞毒。

关键词：口蹄疫A型病毒 FMD 毒株

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口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第7期25卷 625-627页

作者：田美娜李永亮卢曾军付元芳袁明刘湘涛刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 河北畜牧良种工作站河北石家庄050061

目的:制备并鉴定口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3D的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的原核表达3D蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用We... 详细信息

目的:制备并鉴定口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3D的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的原核表达3D蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Western blot以及间接免疫荧光法对mAbs的特异性等进行鉴定。结果:免疫的BALB/c小鼠经过多次融合筛选,共获得5株抗pET28a-3D的mAb,其亚类鉴定3株为IgG1,2株为IgG2b,初步判定所得5株mAb识别2个不同表位。Western blot显示这些mAbs与重组3D蛋白和FMDVO/China99感染的BHK-21细胞中的3D抗原均特异性结合,免疫荧光结果显示这5株mAb能够特异结合FMDV感染细胞中的3D蛋白。结论:成功获得了能识别自然3D蛋白的特异性mAb,为进一步研究3D蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定基础。

关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白3D 单克隆抗体原核表达

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猪圆环病毒2型致病机制研究进展

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畜牧与兽医 2009年第11期41卷 95-97页

作者：杨顺利尹双辉刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

猪圆环病毒2型是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMW S)的主要病原。PMW S主要以进行性消瘦和多系统病理损伤为特征,近些年来流行很广,给世界养猪业带来巨大损失。本文对该病毒致病机制的研究进展作一综述。

关键词：猪圆环病毒多系统衰竭综合征致病机制

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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建

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华北农学报 2009年第1期24卷 83-86页

作者：赵娜田宏吴锦艳满自萍尚佑军何生虎刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5... 详细信息

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF5转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF5;并成功构建了PRRSV LZH株ORF5基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因克隆杆状病毒表达

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整联蛋白αvβ3与口蹄疫病毒感染

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中国兽医杂志 2009年第9期45卷 46-48页

作者：赵建勇高闪电独军政伏小平常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一,其本质是糖蛋白、蛋白聚糖、脂类或糖脂,多数属于蛋白质。大多数病毒受体分布于细胞表面,病毒需要细胞受体的参与才能进入细胞并进行复制、转录、包装成病毒粒子。整联蛋白αvβ... 详细信息

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一,其本质是糖蛋白、蛋白聚糖、脂类或糖脂,多数属于蛋白质。大多数病毒受体分布于细胞表面,病毒需要细胞受体的参与才能进入细胞并进行复制、转录、包装成病毒粒子。整联蛋白αvβ3具有多种配体其主要包括:细胞间配体、[第一段]

关键词：病毒感染整联蛋白口蹄疫病毒受体细胞表面宿主特异性组织嗜性蛋白聚糖

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