检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2010年第4期26卷 755-759页

作者：丁耀忠张杰刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-... 详细信息

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。

关键词：牛朊蛋白 COS-7细胞间接免疫荧光检测技术

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口蹄疫新型疫苗的研究进展

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江苏农业科学 2010年第3期38卷 277-279页

作者：刘文倩刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各... 详细信息

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各种基因工程疫苗如核酸疫苗、可饲疫苗、病毒载体疫苗、基因工程亚单位疫苗和抗原表位疫苗等不断涌现,为口蹄疫新型疫苗的研究与利用带来了新的希望。

关键词：口蹄疫新型疫苗研究进展

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黑山羊传染性胸膜肺炎和羊口疮混合感染的诊断报告

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中国兽医杂志 2010年第8期46卷 80-81页

作者：张克山逯忠新储岳峰高鹏程刘湘涛尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

1发病情况2009年5月到6月湖北省某羊场从四川省某公司(每家每户散养后集中),分3批购得黑山羊847只。第1批羊购进后第3天出现咳嗽并死亡1只,第15天有30%羊群表现出咳嗽症状,第20天约有80%的羊表现为精神沉郁,食欲减退,咳嗽,消瘦同时,口... 详细信息

1发病情况2009年5月到6月湖北省某羊场从四川省某公司(每家每户散养后集中),分3批购得黑山羊847只。第1批羊购进后第3天出现咳嗽并死亡1只,第15天有30%羊群表现出咳嗽症状,第20天约有80%的羊表现为精神沉郁,食欲减退,咳嗽,消瘦同时,口、唇部结痂并出现大批死亡,第2批羊购进后和第1批羊混合饲养,其中第3批的192只羊买回后即转手卖给当地农户。[第一段]

关键词：传染性胸膜肺炎羊口疮黑山羊诊断报告混合感染发病情况食欲减退混合饲养

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转基因克隆动物的发展及其应用

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动物医学进展 2010年第7期31卷 103-106页

作者：骆继怀独军政常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应... 详细信息

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应器方面的应用,存在的问题与安全性评价等方面做了较系统的阐述,并预测了转基因克隆动物应用的发展前景及其给社会带来的深远影响。

关键词：转基因克隆动物异体器官移植抗病育种乳腺生物反应器

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猪圆环病毒2型的全基因克隆和序列分析

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动物医学进展 2010年第10期31卷 1-5页

作者：杨顺利尹双辉杨亚民刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

参考GenBank中发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因序列,设计一对PCR引物,从病料中扩增获得4株PCV-2的全基因组序列,分别命名为SDNY-PCV-2、ShD-PCV-2、HBbd-PCV-2、GSLN-PCV-2,经测序确定长度均为1 767 bp。应用DNA Star序列分析表明,4... 详细信息

参考GenBank中发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因序列,设计一对PCR引物,从病料中扩增获得4株PCV-2的全基因组序列,分别命名为SDNY-PCV-2、ShD-PCV-2、HBbd-PCV-2、GSLN-PCV-2,经测序确定长度均为1 767 bp。应用DNA Star序列分析表明,4个PCV-2分离株与国外部分分离株的核苷酸序列同源性达95.5%-99.8%,与PCV-1毒株的序列同源性为76.2%-77.6%。与国内外部分分离毒株序列进化树分析表明,4个PCV-2分离毒株处于不同分支中,存在一定差异。

关键词：猪圆环病毒2型全基因克隆序列分析

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口蹄疫病毒O/HN/93疫苗株的拯救及病毒活性鉴定

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华北农学报 2010年第3期25卷 32-37页

作者：曹伟军李平花白兴文卢曾军孙普刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

利用定点突变方法,构建含有预期突变的口蹄疫病毒O/HN/93株全长cDNA克隆,将全长cDNA的重组质粒线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,转染细胞盲传至第3代50 h后出现典型致细胞病变效应(CPE),第4代10 h出现典型... 详细信息

利用定点突变方法,构建含有预期突变的口蹄疫病毒O/HN/93株全长cDNA克隆,将全长cDNA的重组质粒线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,转染细胞盲传至第3代50 h后出现典型致细胞病变效应(CPE),第4代10 h出现典型的CPE。对收获的病毒分别用RT-PCR、分子标签测序、间接免疫荧光和电镜观察等进行鉴定,均证实成功拯救到了O/HN/93株FMDV。成功获得O/HN/93株的感染性分子克隆,为进一步研究抗原谱广、免疫原性好的候选疫苗株奠定了骨架基础。

关键词：口蹄疫病毒疫苗株感染性cDNA克隆病毒拯救

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口蹄疫病毒株AF72 P1的结构分析

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甘肃农业大学学报 2010年第3期45卷 7-13页

作者：陈启伟王永录杨孝朴甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

对口蹄疫病毒AF72株P1结构蛋白基因进行了扩增、克隆,并采用DNAStar Protean软件对P1蛋白的二级结构、可塑性、亲水性、表面可及性及抗原指数等参数进行分析,综合预测其B细胞表位分布.结果表明:FMDV AF72株P1基因全长2211bp,包含完整的... 详细信息

对口蹄疫病毒AF72株P1结构蛋白基因进行了扩增、克隆,并采用DNAStar Protean软件对P1蛋白的二级结构、可塑性、亲水性、表面可及性及抗原指数等参数进行分析,综合预测其B细胞表位分布.结果表明:FMDV AF72株P1基因全长2211bp,包含完整的开放阅读框,编码737个氨基酸,其中,VP1长639bp,编码213个氨基酸,VP2长654bp,编码218个氨基酸,VP3长663bp,编码221个氨基酸,VP4长255bp,编码85个氨基酸.P1结构蛋白的二级结构较为复杂,含有较多的β片层结构和转角结构,VP1、VP2和VP3上均有多个区域为B细胞优势表位,VP4上也有少量的潜在B细胞表位.

关键词：口蹄疫病毒结构蛋白 B细胞表位

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细菌生物被膜鉴定方法的研究进展

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中国兽医科学 2010年第11期40卷 1194-1199页

作者：胡锦松陈豪泰张杰刘永生徐志文朱玲徐凯年阳阳古峰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物生物技术中心四川雅安625014

概述了生物被膜鉴定方法(包括试管法、银染法、扫描电镜和透射电镜法、激光共聚焦扫描显微镜法和微量板定量检测法)的主要操作步骤和注意事项,以及在生物被膜研究中取得的成果。阐明了以上鉴定方法在生物被膜研究中的优缺点,并提出了弥... 详细信息

概述了生物被膜鉴定方法(包括试管法、银染法、扫描电镜和透射电镜法、激光共聚焦扫描显微镜法和微量板定量检测法)的主要操作步骤和注意事项,以及在生物被膜研究中取得的成果。阐明了以上鉴定方法在生物被膜研究中的优缺点,并提出了弥补上述鉴定方法缺点的建议。

关键词：生物被膜鉴定方法扫描电镜透射电镜

来源：评论

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猪流感的诊断技术研究进展

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生物技术通报 2010年第6期26卷 75-79页

作者：李国娟柳纪省李宝玉田永强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046 兰州交通大学化工学院兰州730070

猪流感是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、高度接触性呼吸道传染病,不仅给畜禽养殖造成重大经济损失,而且还对人类健康造成威胁,因此快速、敏感、准确诊断猪流感,具有重要的经济价值和公共卫生意义。从传统的实验室诊断技术和分子生物... 详细信息

猪流感是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、高度接触性呼吸道传染病,不仅给畜禽养殖造成重大经济损失,而且还对人类健康造成威胁,因此快速、敏感、准确诊断猪流感,具有重要的经济价值和公共卫生意义。从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术两方面综合阐述了猪流感的诊断研究进展。

关键词：猪流感诊断技术研究进展

来源：评论

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截短的猪繁殖与呼吸综合征ORF5基因及重组蛋白的原核表达

引用

生物技术通报 2010年第3期26卷 131-134页

作者：李国娟柳纪省李宝玉娄忠子田永强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046 兰州交通大学化工学院兰州730070

通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5)。将dORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-1,在***细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明dORF5基因得到表达... 详细信息

通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5)。将dORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-1,在***细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明dORF5基因得到表达。本试验得到的重组蛋白,为进一步研究PRRS病毒结构蛋白的结构和功能奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征 ORF5基因原核表达

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