检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2007年第6期37卷 461-464页

作者：赵海平高金亮李有全樊瑞泉李金杰赵金国刘军龙殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

采用常规方法构建了青海血蜱幼蜱cDNA表达文库,初级文库的库容量为5.0×105PFU/mL,扩增后的库容量为8×109PFU/mL;用兔抗青海血蜱幼蜱阳性血清对该文库进行了免疫学筛选,对阳性噬菌体进行了亚克隆,提取质粒后转化宿主菌JM109,... 详细信息

采用常规方法构建了青海血蜱幼蜱cDNA表达文库,初级文库的库容量为5.0×105PFU/mL,扩增后的库容量为8×109PFU/mL;用兔抗青海血蜱幼蜱阳性血清对该文库进行了免疫学筛选,对阳性噬菌体进行了亚克隆,提取质粒后转化宿主菌JM109,最终共得到幼蜱基因11个,分别命名为HqL1、HqL2、HqL3、HqL4、HqL5、HqL6、HqL7、HqL8、HqL9、HqL10、HqL11。测序分析表明,其中的6个为新基因。分析发现HqL7、HqL8、HqL9和HqL11具有较高的研究价值。

关键词：青海血蜱幼蜱 cDNA表达文库免疫学筛选

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斯氏艾美耳球虫的致病性及病理学研究

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中国预防兽医学报 2007年第10期29卷 788-790页

作者：孟庆玲才学鹏田广孚乔军景志忠严鸿斌中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

用纯种斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊人工感染25只断奶幼兔,进行致病性和病理学研究。试验兔分为1个不感染对照组和4个感染组,各感染组每只幼兔分别口服感染2.0×103、1.0×104、5.0×104、2.5×105个孢子化卵囊。与对照组... 详细信息

用纯种斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊人工感染25只断奶幼兔,进行致病性和病理学研究。试验兔分为1个不感染对照组和4个感染组,各感染组每只幼兔分别口服感染2.0×103、1.0×104、5.0×104、2.5×105个孢子化卵囊。与对照组相比,接种2.0×103个和1.0×104个孢子化卵囊的两个感染组的平均病变记分、肝重指数、血清转氨酶活性有显著差异(P<0.05);接种5.0×104个和2.5×105个孢子化卵囊的两个感染组上述指标有极显著差异(P<0.01)。表明斯氏艾美耳球虫对幼兔具有很强的致病性,能导致严重的肝球虫病。

关键词：斯氏艾美耳球虫致病性病理学

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一种侧流试纸结合FAM重组酶聚合酶扩增(RPA)诊断布鲁氏菌感染的方法

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中国人兽共患病学报 2019年第10期35卷 905-908页

作者：葛志毅周建华尚佑军李学瑞刘永生赵鹭孙晶晶曹小安中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

目的为了更加方便布鲁氏菌病(布病)检测,增加布病检测方法的多样性。方法根据布鲁氏菌特异基因的保守序列,设计引物与探针,利用Twist Amp? nfo试剂盒提供的聚合酶扩增体系对布鲁氏菌基因组进行快速等温扩增,扩增产物用PCRD试剂盒侧流试... 详细信息

目的为了更加方便布鲁氏菌病(布病)检测,增加布病检测方法的多样性。方法根据布鲁氏菌特异基因的保守序列,设计引物与探针,利用Twist Amp? nfo试剂盒提供的聚合酶扩增体系对布鲁氏菌基因组进行快速等温扩增,扩增产物用PCRD试剂盒侧流试纸进行检测,进而判断结果。其实验过程为确定最佳反应条件,检测特异性和敏感性,并与QPCR同时检测样品,比较符合率。结果 38℃反应10 min为最佳条件,特异性结果良好,敏感性能达到10-5(8拷贝),与QPCR检测结果符合率高,以此建立本方法。结论该方法具有特异性强、敏感性好、操作过程简单、检测快速等优点,增加了布病检测方法的多样性,同时为野外田间布病的检测提供了一种可能。

关键词：布鲁氏菌 RPA 侧流试纸田间检测

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表达H120 S基因膜外区段的重组鸡传染性支气管炎病毒的拯救

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病毒学报 2014年第6期30卷 668-674页

作者：魏衍全郭慧琛王海明孙德惠韩世充孙世琪中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

为探索以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)Beaudette毒株为骨架表达H120纤突蛋白膜外区的可行性,本研究利用RT-PCR技术,扩增得到H120纤突基因膜外区段(1 302bp),将其置换到IBV Beaudette株全长cDNA克隆相应区段,... 详细信息

为探索以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)Beaudette毒株为骨架表达H120纤突蛋白膜外区的可行性,本研究利用RT-PCR技术,扩增得到H120纤突基因膜外区段(1 302bp),将其置换到IBV Beaudette株全长cDNA克隆相应区段,构建了含有上述区段的重组IBV cDNA克隆BeauR-H120(S1)。然后直接将BeauR-H120(S1)作为DNA模板在体外转录出病毒基因组RNA,该转录产物电转入Vero细胞后48h收获细胞继续传代,直至第4代时出现合胞体,拯救获得一株重组IBV(rBeau-H120(S1))。通过RT-PCR方法证明rBeauH120(S1)基因组中包含有完整的H120纤突基因膜外区段。Western-blot试验证实rBeau-H120(S1)的N蛋白有表达,表明重组病毒在Vero细胞内进行了增殖。经连续传代后测定rBeau-H120(S1)的TCID50和EID50,结果显示,该重组病毒在Vero细胞中的滴度可达到105.90±0.22 TCID50/mL,在9日龄SPF鸡胚中生长滴度为106.13±0.23EID50/mL。免疫保护实验表明,在接种重组病毒21d时,鸡群抗体阳性率达到90%,使用强毒株M41(103 EID50/只)攻毒时免疫保护率为85%。本研究采用反向遗传操作技术构建的重组IBV,为进一步研制IBV重组基因工程疫苗奠定了基础。

关键词：传染性支气管炎病毒重组病毒纤突蛋白膜外区 H120株

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流产布鲁氏菌omp25基因毕赤酵母表达载体的构建和鉴定

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中国人兽共患病学报 2007年第7期23卷 693-695页

作者：杨春华邱昌庆曹小安中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

目的构建流产布鲁氏菌omp25基因毕赤酵母分泌型表达载体。方法根据目的基因序列分析结果和毕赤酵母对密码子的优先选择性,选择了抗原性较强的长471bp的基因片段进行克隆和构建流产布鲁氏菌omp25基因毕赤酵母分泌型表达载体,并予鉴定。... 详细信息

目的构建流产布鲁氏菌omp25基因毕赤酵母分泌型表达载体。方法根据目的基因序列分析结果和毕赤酵母对密码子的优先选择性,选择了抗原性较强的长471bp的基因片段进行克隆和构建流产布鲁氏菌omp25基因毕赤酵母分泌型表达载体,并予鉴定。结果鉴定结果表明目的基因片段与发表的序列完全一致并正确地插入到酵母表达载体pPIC9Kα因子分泌信号肽下游。结论成功地构建了流产布鲁氏菌omp25基因的毕赤酵母表达载体pPIC9K-omp25。

关键词：流产布鲁氏菌 omp25基因毕赤酵母表达载体构建

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塔里木马鹿自然感染住肉孢子虫病的病理学观察

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兽类学报 2007年第3期27卷 263-266页

作者：乔军孟庆玲才学鹏高庆华廖秋萍贾桂珍中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室塔里木大学动物科技学院

对一例自然感染住肉孢子虫的塔里木马鹿进行病理组织学观察。采集濒死期的塔里木马鹿心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、淋巴结、胃、肠等脏器,10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片、H·E染色,作病理组织学观察。结果表明:各组织瘀血、出血,... 详细信息

对一例自然感染住肉孢子虫的塔里木马鹿进行病理组织学观察。采集濒死期的塔里木马鹿心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、淋巴结、胃、肠等脏器,10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片、H·E染色,作病理组织学观察。结果表明:各组织瘀血、出血,均有炎性细胞浸润,尤以嗜酸性粒细胞多见。在骨骼肌组织中观察到了住肉孢子虫包囊,在肾小球入球小动脉内皮细胞中有裂殖子存在,其余各组织未见不同发育阶段的虫体。

关键词：塔里木马鹿住肉孢子虫病理学观察

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猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性分析

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畜牧兽医学报 2014年第11期45卷 1874-1882页

作者：曾爽李玩生房永祥冯海燕陈国华何小兵贾怀杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

设计猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了82个猪TCRβ基因(简称STB)。测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区... 详细信息

设计猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了82个猪TCRβ基因(简称STB)。测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区的基因片段,绝大部分基因间的核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的相似性在36.6%~99.9%,这与TCRβ链的基本基因结构特征相一致。猪TCRβ基因的分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在同一类基因分子中其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区之间的差异主要由V基因片段的多态性引起,而CDR3区的差异主要由其D、J基因片段的多样性造成。同时发现猪TCRβ与人类的遗传演化关系较近,大部分基因序列都能找到与人类对应的TRBV、TRBD、TRBJ基因片段,但又存在一定的差异性。这表明,猪TCRβ基因既有应对外界复杂微生物环境的免疫多样性分子遗传基础,也有物种间的相似性与特异性。

关键词：合作小型猪 TCRβ基因生物信息学多样性

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Toll样受体对病原真菌的天然免疫识别

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中国生物工程杂志 2012年第12期32卷 86-92页

作者：何小兵贾怀杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

天然免疫系统是宿主抵御病原入侵的第一道防线,在机体抗感染免疫中发挥重要作用。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是天然免疫系统最重要的模式识别受体(pattern recognitionreceptors,PRRs)之一,通过识别病原真菌的病原相关分子模... 详细信息

天然免疫系统是宿主抵御病原入侵的第一道防线,在机体抗感染免疫中发挥重要作用。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是天然免疫系统最重要的模式识别受体(pattern recognitionreceptors,PRRs)之一,通过识别病原真菌的病原相关分子模式(pathogen-associated molecularpatterns,PAMPs),招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,引发炎症因子、趋化因子等的释放和树突状细胞(dendritic cells,DCs)的成熟,发挥抗真菌感染作用。通过简要介绍宿主的TLRs及信号通路的研究进展,总结了目前TLRs对不同病原真菌PAMPs的天然免疫识别及信号通路研究现状,以期对进一步研究宿主天然免疫系统与病原真菌相互作用的分子机制提供参考。

关键词：天然免疫模式识别受体病原相关分子模式 Toll样受体病原真菌

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机体识别病毒核酸的几种分子模式及途径

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畜牧兽医学报 2011年第3期42卷 311-322页

作者：景志忠何小兵房永祥陈国华曾爽贾怀杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

近些年机体病原相关模式受体及其识别分子机制的研究,极大地促进了先天性分子免疫学的发展,并成为现代免疫学研究的重点和热点领域。作者通过机体识别病毒核酸的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、RIG-I样受体(RIG-I like receptor... 详细信息

近些年机体病原相关模式受体及其识别分子机制的研究,极大地促进了先天性分子免疫学的发展,并成为现代免疫学研究的重点和热点领域。作者通过机体识别病毒核酸的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)、RIG-I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)、NOD样受体(NOD-like receptors,NLRs)和DAI(DNA-dependent activatorof interferon-regulatory factors,DAI)等模式识别分子的细胞定位、分子结构及其识别病毒核酸途径的介绍,系统、全面地探讨了宿主机体如何全方位识别和消除入侵病毒的分子免疫防御途径,为抗病毒药物和疫苗的设计以及抗病育种提供了理论依据。

关键词：病原相关分子模式模式识别受体病毒核酸先天性免疫

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正痘病毒干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径

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畜牧兽医学报 2011年第11期42卷 1503-1512页

作者：景志忠贾怀杰周涛何小兵中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

正痘病毒属的牛痘病毒、痘苗病毒以及猴痘病毒等成员是最重要的动物源性人兽共患病病原。作者围绕这些正痘病毒编码的干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径,重点介绍了病毒阻断宿主干扰素反应、抑制宿主TNF诱导的反应以及失活宿主防御反... 详细信息

正痘病毒属的牛痘病毒、痘苗病毒以及猴痘病毒等成员是最重要的动物源性人兽共患病病原。作者围绕这些正痘病毒编码的干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径,重点介绍了病毒阻断宿主干扰素反应、抑制宿主TNF诱导的反应以及失活宿主防御反应的免疫成分等策略,以加深对痘病毒感染的宿主特异性、免疫逃避以及致病的分子机制的理解。

关键词：正痘病毒病毒感染宿主免疫反应调节宿主免疫蛋白分子机制

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