检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2011年第7期31卷 98-103页

作者：杨双马军武周广青林密冯霞刘涛代鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简... 详细信息

目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简称SOE-PCR)技术连接VH-VL基因,同时引入T7启动子和核糖体结合位点序列,体外构建核糖体展示scFv库模板,连接pMD18-T载体转化*** DH5α大肠杆菌,挑取阳性克隆测序以鉴定scFv组装。结果:成功构建了库容量达8.21×1013的兔源口蹄疫核糖体展示scFv库。结论:构建的大容量兔源性口蹄疫核糖体展示抗体库可以成为进一步筛选特异性口蹄疫单链抗体的实验平台,为开发诊断性口蹄疫单链抗体奠定了很好的实验基础。

关键词：核糖体展示技术重叠延伸PCR 单链抗体库口蹄疫病毒

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Toll样受体介导的信号转导通路及其调控分子的研究进展

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中国兽医科学 2011年第4期41卷 433-440页

作者：曾爽何小兵陈国华房永祥贾怀杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

概述了Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的基本结构、识别的配体及亚细胞定位,重点介绍了TLRs信号转导通路的类型、作用机制以及在信号转导通路中起调控作用的关键分子,提出了对TLRs信号转导通路的研究必将有助于安全高效新型疫苗... 详细信息

概述了Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的基本结构、识别的配体及亚细胞定位,重点介绍了TLRs信号转导通路的类型、作用机制以及在信号转导通路中起调控作用的关键分子,提出了对TLRs信号转导通路的研究必将有助于安全高效新型疫苗、药物的设计和研发。

关键词： Toll样受体信号转导通路调控分子天然免疫

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猪γδ T淋巴细胞亚群的研究进展

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 646-650页

作者：李玩生曾爽陈国华景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

在概述猪γδ T淋巴细胞亚群的发现、组织分布及其细胞所占比例的基础上,重点介绍了其基因结构与多样性以及细胞的功能和抗原识别的机制,以加深对猪天然免疫应答独特性的理解。

关键词：猪γδ T淋巴细胞 T细胞抗原受体组织分布基因结构天然免疫

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线虫线粒体基因组全序列分析研究进展

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中国农业科学 2011年第6期44卷 1255-1265页

作者：贾万忠闫鸿斌倪兴维曹平娄忠子付宝权史万贵中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃省动物疫病控制中心

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应... 详细信息

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应用和今后发展方向做一简要综述。迄今,已完成46种线虫的线粒体基因组全序列测定和分析。线虫线粒体基因组的碱基组成、基因结构、基因变异等方面有其特点,这些分析结果为线形动物门线粒体功能基因组学研究、比较基因组学研究、分子分类学研究、虫种(株)鉴定与分类、分子系统发育和进化分析等提供了重要依据和指导作用,为线虫病诊断、分子流行病学调查等分子检测方法的建立提供参考依据。

关键词：线虫线粒体基因组基因结构分类

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棘球蚴体外培养技术的应用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第4期29卷 314-318页

作者：倪兴维贾万忠者永辉金科中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046 西宁市动物卫生监督所西宁810003

随着棘球绦虫体外培养技术的发展和日趋成熟,该技术被用于棘球蚴病病原生物学特性、感染与致病机制,以及新型药物制剂等方面的研究,从而为该病的有效治疗和控制提供重要理论依据和指导。本文就棘球绦虫体外培养技术在棘球蚴病研究中的... 详细信息

随着棘球绦虫体外培养技术的发展和日趋成熟,该技术被用于棘球蚴病病原生物学特性、感染与致病机制,以及新型药物制剂等方面的研究,从而为该病的有效治疗和控制提供重要理论依据和指导。本文就棘球绦虫体外培养技术在棘球蚴病研究中的应用作一综述。

关键词：棘球蚴病体外培养发育免疫治疗药物

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猪瘟病毒GSLZ株的分离与鉴定

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中国兽医科学 2011年第2期41卷 131-137页

作者：何小兵贾怀杰陈国华房永祥李玩生曾爽景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名... 详细信息

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株。对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株以及国内外分离株的同源性为83.1%～99.8%,预测的抗原表位与中国C株相比发生了漂移。将GSLZ分离株细胞培养物分别接种家兔和仔猪,结果家兔无体温变化,而仔猪可复制出典型的猪瘟临床症状和病理变化。表明,分离的GSLZ株是1株CSFV野毒株,其对仔猪有很强的毒力,但不引起家兔发病,能产生免疫反应。

关键词：猪瘟病毒分离鉴定

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旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因TsCystatin1的克隆及序列分析

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 569-574页

作者：姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的... 详细信息

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行了预测分析。结果表明,TsCystatin1 cDNA序列含有一个由666个核苷酸组成的开放阅读框架,编码由221个氨基酸残基组成的多肽,蛋白分子质量理论值为24.3ku,理论等电点为4.44。TsCystatin1第1～25位氨基酸残基为信号肽序列,具有半胱氨酸蛋白酶抑制剂的保守序列QVVAG,其C末端具有3处N-糖基化位点以及4个链内二硫键所需的半胱氨酸残基。该蛋白的二级结构中α螺旋占18.6%,β折叠占23.5%,其余57.9%为转角。结构域分析表明,该蛋白具有一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域,属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族2,与其他线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的同源性较高。

关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂克隆序列分析

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抗菌肽Shiva 1a基因真核表达载体的构建及序列分析

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中国畜牧兽医 2011年第12期38卷 96-100页

作者：宫晓炜郑福英蔺国珍曹小安王光华周继章才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-... 详细信息

为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-Shiva 1a重组表达质粒,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染将重组质粒转染到CHO-K1细胞,荧光显微镜观察其表达情况。通过生物信息学软件对抗菌肽Shiva 1a的二级结构和三级结构进行预测分析。其结果为进一步研究Shiva 1a的抗菌活性和在动物抗病育种方面的应用奠定了基础。

关键词：抗菌肽 Shiva 1a 真核表达序列分析

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副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶基因序列分析与推导蛋白三维结构的分子模拟

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中国兽医学报 2011年第1期31卷 40-44页

作者：马艳平张杰陈豪泰马丽娜赵娜丁耀忠刘文倩王猛刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东广州510640

利用PCR方法获得副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA,将PCR纯化产物与pMD18-T载体连接并转化*** DH5α菌株,重组阳性质粒测序并采用生物信息学软件对所推导的氨基酸序列进行三维结构分析。结果表明,该基因全长510bp,并... 详细信息

利用PCR方法获得副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA,将PCR纯化产物与pMD18-T载体连接并转化*** DH5α菌株,重组阳性质粒测序并采用生物信息学软件对所推导的氨基酸序列进行三维结构分析。结果表明,该基因全长510bp,并与GenBank中登录的其他5株菌株luxS基因完整参考序列进行比较,同源性均在70%以上。用ExPAsy软件包预测了推导蛋白的特性,运用Swiss-PDB viewer软件的SWISS-Model处理器,并利用同源建模的思想建立HPS-luxS的三维结构。拉马钱德兰图证明,构建的luxS蛋白的空间结构是合理的。

关键词：副猪嗜血杆菌 S-核糖基高半胱氨酸酶序列分析分子模拟

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反向遗传技术在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用

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中国农学通报 2011年第7期27卷 364-368页

作者：谷元兴王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯救、疫苗研制、分子病原学诊断等方面的内容,对反向遗传技术在PRRS研究中的应用作一综述。

关键词：反向遗传技术病毒拯救 RNA病毒猪繁殖与呼吸综合征应用

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