检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2019年第1期53卷 112-117页

作者：朱国强李立闫鸿斌吴燕涛李文卉付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

棘球蚴病是一种长期严重危害畜牧业和人类健康的古老疾病。石渠棘球绦虫作为一个新发现的棘球属物种,具有潜在的公共卫生意义,可能会引起一种潜在的人兽共患寄生虫病。本文通过对石渠棘球绦虫的病原学、生活史、流行病学、检测与诊断、... 详细信息

棘球蚴病是一种长期严重危害畜牧业和人类健康的古老疾病。石渠棘球绦虫作为一个新发现的棘球属物种,具有潜在的公共卫生意义,可能会引起一种潜在的人兽共患寄生虫病。本文通过对石渠棘球绦虫的病原学、生活史、流行病学、检测与诊断、公共卫生问题等方面做一综述,并且对我国流行的细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、石渠棘球绦虫等三种病原进行系列比较。

关键词：分类法流行病学诊断石渠棘球绦虫病原学

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近交合作猪血液生理生化指标的测定及分析

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动物医学进展 2020年第8期41卷 73-77页

作者：杨帆房永祥贾怀杰何小兵陈国华孙微微赵波沈岩尔李政厅宋世斌陈智华景志忠甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业职业技术学院甘肃兰州730020

动物机体健康状态及免疫功能与其血液生理生化指标紧密相关,同时该指标也可反映不同物种的独特生物学特性。近交系动物具有遗传稳定、个体差异小的特点而被广泛应用于科学研究中。为了探究近交合作猪血液生理和生化的特性,采用兽用全自... 详细信息

动物机体健康状态及免疫功能与其血液生理生化指标紧密相关,同时该指标也可反映不同物种的独特生物学特性。近交系动物具有遗传稳定、个体差异小的特点而被广泛应用于科学研究中。为了探究近交合作猪血液生理和生化的特性,采用兽用全自动血液细胞分析仪和全自动生化分析仪,对58头近交合作猪和34头原产地合作猪血液中12项生理指标和16项生化指标进行了测定。结果表明,近交合作猪相对于原产地合作猪而言,其10项生理指标和8项生化指标均存在显著差异,说明近交合作猪具有独特的生理和生化特性,这为其实验动物化培育提供了科学依据。

关键词：近交合作猪血液生理指标生化指标

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猪环鸟苷酸-腺苷酸合成酶cGAS基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析

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中国兽医科学 2019年第10期49卷 1324-1330页

作者：龙朝琳何小兵陈国华贾怀杰王国蒨房永祥景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

为获得具有生物学活性的环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)蛋白与第二信使分子2′3′-cGAMP,构建了猪源cGAMP合成酶pcGAS基因的原核表达载体pET-28a-SUMO-pcGAS,将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),并通过优化诱导条件... 详细信息

为获得具有生物学活性的环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)蛋白与第二信使分子2′3′-cGAMP,构建了猪源cGAMP合成酶pcGAS基因的原核表达载体pET-28a-SUMO-pcGAS,将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),并通过优化诱导条件实现了可溶性表达;利用镍柱亲和层析对表达的重组蛋白产物进行初步纯化,随后切除SUMO标签蛋白,再用亲和层析进一步纯化,获得了纯度较高的重组蛋白pcGAS;将获得的重组蛋白pcGAS通过体外酶促反应生物合成了2′3′-cGAMP,且合成产物能够诱导启动细胞Ⅰ型IFNs的产生。结果表明,pcGAS重组蛋白和2′3′-cGAMP均具有生物活性,这为后续抗病毒、抗肿瘤药物以及免疫增强剂的开发奠定了基础。

关键词： cGAS 2′3′-cGAMP 原核表达纯化活性分析

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牛结节性皮肤病的流行现状与传播特征及其我国的防控策略

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中国兽医科学 2019年第10期49卷 1297-1304页

作者：景志忠贾怀杰陈国华何小兵房永祥王国蒨陈思睿杨帆吕彦蓉 Takele Tesgera HURISA 殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

2019年8月12日我国首次确诊在新疆伊犁地区爆发牛结节性皮肤病,为充分认识和做好该病的防控工作,防止外来疫情扩散蔓延到我国内地,现将该病的世界流行现状、传播特征以及我国的防控对策进行概括介绍,为有效控制、净化和根除该病提供指导。

关键词：牛结节性皮肤病外来病流行现状生物媒介传播防控策略

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MPLA对口蹄疫O型灭活疫苗的免疫增强效应

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甘肃农业大学学报 2019年第5期54卷 1-9页

作者：赵波房永祥贾怀杰陈国华何小兵杨孝朴景志忠甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

【目的】探讨单磷酰脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)对口蹄疫(food and mouth disease,FMD)O型灭活疫苗的免疫增强效应,提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果.【方法】通过检测MPLA刺激脾脏细胞的增殖情况和刺激DC后成熟及吞噬能力的大小,... 详细信息

【目的】探讨单磷酰脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)对口蹄疫(food and mouth disease,FMD)O型灭活疫苗的免疫增强效应,提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果.【方法】通过检测MPLA刺激脾脏细胞的增殖情况和刺激DC后成熟及吞噬能力的大小,对MPLA的体外免疫刺激效应进行评价;将MPLA与ISA 206和灭活FMDVO型抗原配制疫苗后免疫小鼠,通过检测抗体水平、T细胞亚群、抗原特异性淋巴细胞增殖及浆细胞的比例,评价MPLA对口蹄疫O型灭活疫苗的免疫增强作用.【结果】MPLA体外可刺激B淋巴细胞增殖,上调DC表面共刺激分子的表达,使其吞噬能力减弱;制备疫苗免疫小鼠,血清抗体水平检测发现,MPLA组在7、14 d时抗体水平显著高于ISA 206组,且其抗原特异性的B淋巴细胞增殖,外周血中CD19+CD27+CD38+浆细胞的比例也显著高于ISA 206组.【结论】MPLA通过促进B淋巴细胞的增殖与活化增加了抗体的产生,增强了小鼠对口蹄疫疫苗的免疫应答能力,证实MPLA是口蹄疫疫苗的良好候选免疫佐剂.

关键词： MPLA 口蹄疫免疫疫苗佐剂

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羊口疮病毒ORF128锚蛋白对HEK293T细胞NF-κB信号通路的调节作用及机制

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第3期35卷 243-249页

作者：安雪珂贾怀杰冯园陈国华何小兵景志忠王晓霞兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 湘潭市中心医院湖南湘潭411100

目的研究羊口疮病毒(ORFV)感染HEK293T宿主细胞后,其编码的锚蛋白ORF128蛋白对宿主核因子κB(NF-κB)信号通路的影响及其机制。方法将来自ORFV/QH02/2010株的ORF128 DNA序列分别构建至真核表达载体pCMV-tag2B和pEGFP-N1;在病毒感染细胞... 详细信息

目的研究羊口疮病毒(ORFV)感染HEK293T宿主细胞后,其编码的锚蛋白ORF128蛋白对宿主核因子κB(NF-κB)信号通路的影响及其机制。方法将来自ORFV/QH02/2010株的ORF128 DNA序列分别构建至真核表达载体pCMV-tag2B和pEGFP-N1;在病毒感染细胞期间,利用反转录PCR检测ORF128 mRNA水平、激光共聚焦显微镜检测ORF128蛋白的亚细胞定位;利用双荧光素酶报告基因检测系统分析ORF128对NF-κB信号通路的调节作用, Western blot法检测NF-κBp65的核移位以及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白磷酸化水平。结果 ORF128蛋白在病毒感染早期表达且定位于宿主细胞核, ORF128蛋白可抑制NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性; ORF128的表达抑制NF-κBp65的核移位和磷酸化的IκBα(p-IκBα)的降解。结论 ORF128蛋白通过抑制p-IκBα蛋白的降解过程,阻止NF-κBp65蛋白核移位,进而抑制宿主NF-κB信号通路的活化。

关键词：羊口疮病毒(ORFV) 锚蛋白核因子κB( NF-κB) 羊口疮病毒蛋白128(ORF128)

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多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

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第九届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：李文卉张念章杨洋刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

引言脑多头蚴病是由多头带绦虫的幼虫(脑多头蚴)寄生于绵羊等中间宿主的中枢神经系统引起的一种绦虫蚴病,该病引起感染宿主的最终死亡,对养羊业造成巨大的经济损失,而且人也能被感染,是一种被忽视的人兽共患寄生虫病。

关键词：多头带绦虫发育阶段原头节不同部位

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羊口疮病毒ORF019基因的克隆及表达

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甘肃农业大学学报 2019年第6期54卷 1-7页

作者：沈岩尔贾怀杰王晓霞陈国华何小兵房永祥薛慧文景志忠甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所甘肃兰州730000

【目的】克隆、分析羊口疮病毒(ORFV)的ORF019基因,进而表达、纯化和鉴定重组表达产物.【方法】根据GenBank登录的ORFV OV-SA00株(AY386264)E2L基因序列设计1对引物,以提取的ORFV/QH02/2010株基因组DNA为模板,通过PCR获得该毒株的ORF01... 详细信息

【目的】克隆、分析羊口疮病毒(ORFV)的ORF019基因,进而表达、纯化和鉴定重组表达产物.【方法】根据GenBank登录的ORFV OV-SA00株(AY386264)E2L基因序列设计1对引物,以提取的ORFV/QH02/2010株基因组DNA为模板,通过PCR获得该毒株的ORF019基因,将该基因连接至原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET-32a-ORF019,并对其测序,测序结果与副痘病毒属及其脊椎动物痘病毒亚科代表毒株的E2L蛋白进行一致性分析;并转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得重组融合蛋白,用SDS-PAGE和Western-blot对表达的目的蛋白进行分析.【结果】成功获得重组质粒pET-32a-ORF019,读码框正确;生物信息学分析发现,ORF019基因在副痘病毒属各成员间高度保守,也在脊椎动物痘病毒亚科痘病毒的遗传进化过程中保留了相对稳定的氨基酸残基;获得了约100 ku的融合蛋白表达产物,并以包涵体的形式存在于宿主菌.【结论】成功对ORFV019基因进行系统的遗传演化分析,并利用原核表达系统获得了重组表达产物.

关键词：羊口疮病毒 ORF019基因进化分析,原核表达纯化

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羊传染性脓疱病毒ORF047基因表达及其蛋白在细胞中的定位分析

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中国人兽共患病学报 2018年第2期34卷 129-132页

作者：陈国华贾怀杰何小兵王春燕金启旺景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

目的克隆羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)ORF047基因,并进行真核表达及亚细胞定位,为筛选与其相互作用的蛋白提供依据。方法提取羊传染性脓疱病毒分离株的DNA,以其为模板,参照OV-SA00毒株(NC-005336.1)基因ORF047序列,采用PCR技术扩增... 详细信息

目的克隆羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)ORF047基因,并进行真核表达及亚细胞定位,为筛选与其相互作用的蛋白提供依据。方法提取羊传染性脓疱病毒分离株的DNA,以其为模板,参照OV-SA00毒株(NC-005336.1)基因ORF047序列,采用PCR技术扩增ORFV ORF047基因片段,凝胶回收后将其插入pEGFP-N1载体,构建重组质粒pEGFPORF047,测序后重组质粒共转染293T细胞,Western blotting鉴定融合蛋白的表达。后将重组质粒pEGFP-ORF047与pHcRed1-Nuc、pHCRed1-mito、pHcRed1-ER分别共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦显微镜对融合蛋白进行亚细胞定位分析。结果 ORFV ORF047基因片段大小为735bp;重组质粒pEGFP-ORF047能够在293T细胞中明显表达融合有目的分子的绿色荧光蛋白,Western blotting检测表达的融合蛋白大小约54kD;亚细胞定位分析表明,ORF047蛋白主要定位于胞浆中,少量在线粒体中。结论成功分析了ORF047基因的表达与其蛋白在亚细胞定位。

关键词：羊传染性脓疱病毒 ORF047基因定位

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山羊痘病毒L1R蛋白的原核表达及其免疫原性的研究

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中国兽医科学 2018年第4期48卷 450-455页

作者：牛贤云贾怀杰陈国华何小兵张君房永祥成温玉景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

摘要：为探究山羊痘病毒LIR蛋白的免疫原性，将山羊痘病毒的LIR基因克隆到pET-30a（＋）原核表达载体并转化大肠杆菌BL21（DE3），挑取阳性克隆进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析后进行纯化．将纯化的重组L1R蛋白免疫... 详细信息

摘要：为探究山羊痘病毒LIR蛋白的免疫原性，将山羊痘病毒的LIR基因克隆到pET-30a（＋）原核表达载体并转化大肠杆菌BL21（DE3），挑取阳性克隆进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析后进行纯化．将纯化的重组L1R蛋白免疫BALB／c小鼠．通过间接ELISA、淋巴细胞增殖和微量中和试验研究重组LIR蛋白的免疫原性及其多克隆抗体的抗病毒作用。结果显示，成功表达出分子质量约为26ku的目的蛋白，其可被山羊抗绵羊痘阳性血清所特异性识别。重组LIR蛋白能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫，并且其多克隆抗体能够中和山羊痘病毒，从而证实山羊痘病毒LIR蛋白具有良好的免疫原性。

关键词：山羊痘病毒 LIR蛋白免疫原性

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