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文献类型

134 篇 期刊文献
51 篇 会议

馆藏范围

185 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

140 篇 农学
- 128 篇 兽医学
- 11 篇 作物学
- 4 篇 畜牧学
- 1 篇 农业资源与环境
36 篇 医学
- 29 篇 基础医学(可授医学...
- 8 篇 临床医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
26 篇 理学
- 24 篇 生物学
- 1 篇 化学
- 1 篇 生态学
15 篇 工学
- 11 篇 生物工程
- 4 篇 化学工程与技术
- 1 篇 食品科学与工程（可...

主题

16 篇 原核表达
16 篇 多头带绦虫
13 篇 序列分析
10 篇 弓形虫
10 篇 刚地弓形虫
10 篇 旋毛虫
9 篇 克隆
9 篇 流行病学
8 篇 脑多头蚴
8 篇 猪带绦虫
7 篇 真核表达
7 篇 代谢分泌抗原
7 篇 棘球蚴病
6 篇 抗原性
6 篇 基因克隆
6 篇 猪囊尾蚴
6 篇 表达
5 篇 豆状囊尾蚴
5 篇 细粒棘球绦虫
5 篇 绦虫

机构

45 篇 中国农业科学院兰...
38 篇 中国农业科学院兰...
38 篇 中国农业科学院兰...
35 篇 甘肃农业大学
16 篇 江苏省动物重要疫...
14 篇 中国农业科学院兰...
11 篇 中国农业科学院兰...
5 篇 家畜疫病病原生物...
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 中国农业科学院兰...
3 篇 新疆维吾尔自治区...
3 篇 中国农业科学院兰...
3 篇 中国农业科学院
3 篇 甘肃省动物疫病控...
3 篇 university of ag...
3 篇 吉林大学
3 篇 甘肃省动物疾病控...
3 篇 甘肃业大学
2 篇 宁夏大学
2 篇 内蒙古民族大学

作者

66 篇 付宝权
63 篇 贾万忠
49 篇 李文卉
44 篇 闫鸿斌
40 篇 张德林
40 篇 才学鹏
36 篇 景志忠
36 篇 骆学农
33 篇 王艳华
24 篇 张少华
23 篇 房永祥
23 篇 李立
22 篇 郭爱疆
22 篇 娄忠子
20 篇 曲自刚
17 篇 张燕丽
17 篇 殷宏
17 篇 盖文燕
17 篇 芦赟
17 篇 曹丽艳

语言

185 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室"

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猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张少华骆学农贾万忠郭爱疆景志忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

囊尾蚴病(Cysticercosis)是危害严重的食源性人兽共患病之一。利用重组蛋白和合成肽作为替代抗原,是解决该病诊断抗原来源问题的一条理想途径。目的制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并鉴定其抗原特性,建立猪囊尾蚴间接ELISA检测方法... 详细信息

囊尾蚴病(Cysticercosis)是危害严重的食源性人兽共患病之一。利用重组蛋白和合成肽作为替代抗原,是解决该病诊断抗原来源问题的一条理想途径。目的制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并鉴定其抗原特性,建立猪囊尾蚴间接ELISA检测方法。方法通过RT-PCR从猪带绦虫囊尾蚴mRNA中扩增出TS-CC18ORF,将TS-CC18 ORF亚克隆到表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株,采用Ni-FF亲和层析柱提纯表达蛋白。Tricine-SDS—PAGE及Western blotting分析抗原特性。以TS-CC18作为包被抗原,优化各种ELISA反应条件,并与全囊虫层析抗原ELISA进行诊断效果比较。结果测序确证TS-CC18ORF大小约为261bp,与GenBank上发表的AF356330核苷酸相似性为85.1%,氨基酸相似性为73.6%。Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.4 mmol/L IPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性TS-CC18重组蛋白,其相对分子质量约16 kD。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应,与细颈囊尾蚴、旋毛虫、弓形虫病猪血清无交叉反应。确定的TS-CC18抗原最佳包被量为10μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:50,兔抗猪IgG-HRP的工作浓度为1:6000,作用时间为60 min。结果判定以P/N≥12.0为阳性,P/N<2.0为阴性。以全囊虫层析抗原ELISA检测结果为参照标准,该方法的相对敏感性达88%,相对特异性为100%,总符合率为97.4%。将该方法按试剂盒要求标准化,4℃至少可放置6个月。结论成功建立了猪囊尾蚴TS-CC18间接ELISA抗体检测方法,其特异性、敏感性及稳定性良好,对于快速诊断猪囊尾蚴病及血清流行病学调查具有应用价值。

关键词：猪囊尾蚴 TS-CC18抗原原核表达间接ELISA

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猪病原抗原免疫识别关键分子基因结构与多样性研究

猪病原抗原免疫识别关键分子基因结构与多样性研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：景志忠莫斯科冯海燕李玩生王生富房永祥陈国华曾爽贾怀杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

机体获得性免疫主要与抗原递呈细胞(APCs)和T、B淋巴细胞上的许多免疫识别关键分子如MHC、T细胞受体(TCR)和CD4/8分子等密切相关,本研究以中国合作猪的这些分子为对象,在核酸水平分析其基因组、功能分子基因结构及其多样性,探讨与病原... 详细信息

机体获得性免疫主要与抗原递呈细胞(APCs)和T、B淋巴细胞上的许多免疫识别关键分子如MHC、T细胞受体(TCR)和CD4/8分子等密切相关,本研究以中国合作猪的这些分子为对象,在核酸水平分析其基因组、功能分子基因结构及其多样性,探讨与病原抗原复杂性的统一。(1)、克隆和鉴定了猪MHCⅠ、MHCⅡ类分子的12个完整基因组序列和14个全长基因,包括SLA-1、2、3和DRA、DQA、DQB、DRB基因等。基因组序列分析发现经典SLAⅠ和Ⅱ类含有1个5′UUR、8个外显子(SLAⅠ类)、4个外显子(DRA和DQA)/5个外显子(DQB)/6个外显子(DRB)和1个3′UTR,具有十分丰富的遗传多样性。基因间的差异主要存在于与抗原肽结合部位有关的部分序列,其他部位序列相对比较保守。(2)、分别克隆和鉴定了猪TCR的α、β、γ和δ链基因,分别获得其36、34、8、5个转录本,均含有特异性识别、结合抗原的V区、D/J区和C区,主要差异在V区,表现出明显的遗传多态性,与pMHC-Ag的多样性相对应。(3)、克隆鉴定了CD4基因、CD8α/β链基因,在基因序列上均含有胞外区、跨膜区和胞浆区基因结构,其中胞外区含有编码识别和结合pMHCⅡ/Ⅰ-Ag的序列结构。

关键词：合作猪 SLAⅠ/Ⅱ类分子 T细胞受体 CD4/8分子多样性

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猪带绦虫/囊尾蚴病研究

猪带绦虫/囊尾蚴病研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：才学鹏骆学农张少华侯俊玲郭爱疆刘振勇中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

人神经脑囊尾蚴病(NCC)是一种最严重的囊虫病,是由于食入猪带绦虫病患者排出的绦虫虫卵而导致的粪源性感染。猪带绦虫作为一种主要的人兽共患寄生虫病,人是其唯一的终末宿主,此时人是绦虫病患者,而猪和人都可作为其中间宿主,感染其幼虫... 详细信息

人神经脑囊尾蚴病(NCC)是一种最严重的囊虫病,是由于食入猪带绦虫病患者排出的绦虫虫卵而导致的粪源性感染。猪带绦虫作为一种主要的人兽共患寄生虫病,人是其唯一的终末宿主,此时人是绦虫病患者,而猪和人都可作为其中间宿主,感染其幼虫而成为囊虫病患者。近年来,尽管在绦虫病和猪囊虫病的诊断、治疗和免疫预防等方

关键词：囊尾蚴病猪带绦虫囊虫病

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长角血蜱成蜱免疫家兔模型的建立及对生长发育的影响

长角血蜱成蜱免疫家兔模型的建立及对生长发育的影响

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：谢俊仁刘光远田占成龚真莉刘建刚张丽艳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐地上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔... 详细信息

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐地上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔对长角血蜱成蜱的吸血和生长发育影响显著,其抗体水平与长角血蜱成蜱在兔体的吸血周期、死亡率成正相关,与雌蜱的饱血脱落率、饱血体重成负相关。结果进一步证明,蜱的唾液腺是其主要的免疫器官之一。家兔抗体水平的持续期足以使长角血蜱完成一个世代,可以满足试验需求,是抗蜱免疫研究理想的阳性对照模型。同时,血清中特异性抗体的效价也可以作为判定动物对长角血蜱抵抗力强弱的重要指标之一。

关键词：长角血蜱成蜱免疫模型生长发育

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青海血蜱核糖体蛋白L23a基因克隆与分析

青海血蜱核糖体蛋白L23a基因克隆与分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋李有全樊瑞泉赵海平关贵全刘军龙殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

通过对青海血蜱cDNA表达文库进行筛选获得了一个阳性克隆(Hq22)。利用5′RACE技术克隆到了该阳性克隆的全长cDNA序列。BLASTN/P(NCBI)分析表明其编码产物为蜱的核糖体蛋白L23a(Rp123a)。RT-PCR分析表明该基因在蜱的不同发育阶段和不同... 详细信息

通过对青海血蜱cDNA表达文库进行筛选获得了一个阳性克隆(Hq22)。利用5′RACE技术克隆到了该阳性克隆的全长cDNA序列。BLASTN/P(NCBI)分析表明其编码产物为蜱的核糖体蛋白L23a(Rp123a)。RT-PCR分析表明该基因在蜱的不同发育阶段和不同组织中广泛表达。根据青海血蜱Rp123a的序列信息,成功克隆了长角血蜱和微小牛蜱的Rp123a。序列分析表明蜱的Rp123a基因高度保守。在大肠杆菌中表达的青海血蜱Rp123a重组蛋白不能刺激动物产生抗蜱免疫保护性。

关键词：青海血蜱核糖体蛋白克隆与分析

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旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的表达及抗原性分析

旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的表达及抗原性分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：盖文燕李文卉王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerPIN)基因序列设计引物,从中国河南猪旋毛虫分离株肌幼虫总RNA应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,克隆到pMD-18T载体并测序鉴定。对重组质粒pMD-18T-TsSerPIN进行限制性酶切,获取目的基因片段... 详细信息

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerPIN)基因序列设计引物,从中国河南猪旋毛虫分离株肌幼虫总RNA应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,克隆到pMD-18T载体并测序鉴定。对重组质粒pMD-18T-TsSerPIN进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-TsSerPIN,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Western-blot方法和ELISA鉴定TsSerPIN重组蛋白的抗原性。构建的重组表达质粒pET30a-TsSerPIN阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致,测序鉴定无基因突变,开放阅读框正确。含有pET30a-TsSerPIN重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为42.5kDa,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot和ELISA结果表明TsSerPIN重组抗原可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。

关键词：旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂重组抗原抗原性

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青海血蜱钙网蛋白基因的克隆与分析

青海血蜱钙网蛋白基因的克隆与分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全刘志杰李有全赵海平马米玲刘军龙刘爱红任巧云殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

与化学杀蜱剂相比,利用疫苗免疫来防制蜱的危害具有诛多优越性。但发现良好的候选抗原分子是疫苗研发的关键。之前,通过对青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选共获得了21个阳性克隆(Hq02-Hq22)。但遗憾的是这些克隆多数都不合完整的开放... 详细信息

与化学杀蜱剂相比,利用疫苗免疫来防制蜱的危害具有诛多优越性。但发现良好的候选抗原分子是疫苗研发的关键。之前,通过对青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选共获得了21个阳性克隆(Hq02-Hq22)。但遗憾的是这些克隆多数都不合完整的开放阅读框(ORF)。本研究利用5′RACE技术克隆了Hq07的全长cDNA序列。该基因含有一个长度为1233bp的ORF,编码蛋白分子量为47kDa。BLASTN/P(NCBI)分析表明编码产物为蜱的钙网蛋白。RT-PCR分析表明此基因在青海血蜱的不同发育阶段和不同组织中都表达。Western blot研究提示蜱吸血时能向其宿主体内分泌天然钙网蛋白。该基因在大肠杆菌中进行了分泌型表达,所表达的的重组Hq07蛋白能刺激绵羊产生部分抗蜱免疫保护性。

关键词：青海血蜱 Hq07 钙网蛋白

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青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全任巧云马米玲殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能... 详细信息

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能与这两个蛋白发生反应。利用这两个天然蛋白免疫家兔产生的抗血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选获得了一个长度为1085bp的cDNA阳性克隆(Hq02)。Hq02含有483bp的开放阅读框,编码一个分子量约为18kDa的蛋白。RT-PCR分析表明此基因在青海血蜱的唾液腺、中肠、一些其它器官和该蜱的不同发育阶段表达。所预测的Hq02基因的氨基酸序列与一些已知的肌球蛋白碱性轻链蛋白有很高的同源性。该蛋白在大肠杆菌中与,17基因10蛋白得到了融合表达。Western blot分析表明此重组蛋白只能与利用P22和P37免疫家兔产生的阳性血清反应,而不能与蜱叮咬家兔产生的阳性血清发生反应,说明此阳性克隆所编码的蛋白是青海血蜱的"隐藏"抗原。利用该重组蛋白免疫绵羊产生的抗体能使青海血蜱雌蜱的饱血体重下降21.8%。这是关于蜱的肌球蛋白碱性轻链蛋白的首次报道。

关键词：青海血蜱 Hq02基因肌球蛋白碱性轻链 "隐藏"抗原

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青海血蜱隐藏抗原基因Hq05的克隆、表达及其抗蜱免疫保护性分析

青海血蜱隐藏抗原基因Hq05的克隆、表达及其抗蜱免疫保护性分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全赵海平李有全任巧云马米玲刘志杰刘爱红党志胜殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

利用兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对该蜱的cDNA表达文库进行差异筛选,获得了一个阳性克隆(Hq05)。该阳性克隆含有一个540bp的开放阅读框,编码蛋白的分子量为20kDa。生物信息学分析表明Hq05是一个新发... 详细信息

利用兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对该蜱的cDNA表达文库进行差异筛选,获得了一个阳性克隆(Hq05)。该阳性克隆含有一个540bp的开放阅读框,编码蛋白的分子量为20kDa。生物信息学分析表明Hq05是一个新发现的基因。RT-PCR分析提示此基因在青海血蜱的若蜱和成蜱阶段表达,并在成蜱的唾液腺中大量表达,而不在中肠中表达。在大肠杆菌中表达的重组Hq05蛋白只能与兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清发生免疫学反应,而不与兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清及阴性血清反应,说明Hq05蛋白是青海血蜱的隐藏抗原。利用重组Hq05蛋白免疫绵羊产生的保护性抗体能使蜱的产卵量下降40%,卵的孵化率下降37%。结果表明Hq05可作为研制抗青海血蜱基因工程疫苗的候选抗原。

关键词：青海血蜱差异筛选 Hq05 隐藏抗原保护性免疫

来源：评论

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青海血蜱肌原蛋白T亚基基因全长cDNA的克隆和分析

青海血蜱肌原蛋白T亚基基因全长cDNA的克隆和分析

引用

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

肌原蛋白T亚基在肌肉的收缩过程中发挥着重要作用。本研究克隆了青海血蜱的肌原蛋白T亚基(HqTnT)基因的全长cDNA序列。此序列含有一个长度为1170bp的开放阅读框,编码产物的分子量为46.5kDa。通过序列比对发现此基因含有两个很保守的结构... 详细信息

肌原蛋白T亚基在肌肉的收缩过程中发挥着重要作用。本研究克隆了青海血蜱的肌原蛋白T亚基(HqTnT)基因的全长cDNA序列。此序列含有一个长度为1170bp的开放阅读框,编码产物的分子量为46.5kDa。通过序列比对发现此基因含有两个很保守的结构域,一个在其序列的中部(氨基酸残基54-78),另一个靠近序列的C末端(氨基酸残基181-229)。青海血蜱的肌原蛋白的T亚基应该通过这两个结构域分别与其原肌球蛋白和肌原蛋白的I亚基相互作用。RT-PCR显示此基因在蜱的不同发育阶段和不同组织中广泛表达。利用在大肠杆菌中表达的的重组HqTnT蛋白免疫绵羊能诱导特异性抗体的产生,但该抗体无免疫保护性。本研究是对蜱的肌原蛋白T亚基的首次报道。

关键词：青海血蜱肌原蛋白T亚基

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