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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：李永光李文卉盖文燕王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林贾万忠 RaduBlaga 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary Medicine

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒p... 详细信息

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠埃希菌BL21后,以异丙基-β-D-

关键词：多头带绦虫脑多头蚴硫氧还蛋白过氧化物酶重组蛋白免疫原性

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应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：付宝权刘明远姚春雨李文卉李永光王艳华吴秀萍张德林才学鹏 Radu Blaga Pascal Boireau 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室吉林大学人兽共患病研究所内蒙古民族大学动物科技学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary MedicineCluj-Napoca

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明... 详细信息

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明,河南猪株、西安猪株、云南猪株、哈尔滨猪株、天津猪株、乌兰浩特犬株1旋毛虫的PCR扩增条带与T1一致,为旋毛虫***;而长春犬株与鸟兰浩特犬株2旋毛虫的PCR扩增条带与T2一致,为乡土旋毛虫***。同时对以上旋毛虫分离株5S rDNA内部基因间隔区序列进行测定,序列比对分析结果也证实这十个分离株分别属于旋毛虫***和乡土旋毛虫***,而且不同分离株5S RNA内部转录间隔区基因序列存在差异。建立的PCR方法可以应用于我国旋毛虫分离株的虫种分子分类鉴定,这对我国旋毛虫病分子病原学检测、分离株的分类鉴定以及种群遗传结构的研究都具有重要意义。

关键词：中国旋毛虫分离株 PCR 鉴定

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牦牛IFN-γ基因的表达及其产物的生物学活性分析

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中国兽医科学 2008年第11期38卷 983-989页

作者：王生富窦永喜陈国华贾怀杰房永祥景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

用植物血凝素和脂多糖诱导牦牛外周血淋巴细胞,提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术克隆了牦牛IFN-γ(YakIFN-γ)基因,然后设计了1对表达引物,从pGEM-YakIFN-γ载体上扩增YakIFN-γ成熟蛋白基因,将牦牛IFN-γ基因与表达载体pET-30a连接,构建... 详细信息

用植物血凝素和脂多糖诱导牦牛外周血淋巴细胞,提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术克隆了牦牛IFN-γ(YakIFN-γ)基因,然后设计了1对表达引物,从pGEM-YakIFN-γ载体上扩增YakIFN-γ成熟蛋白基因,将牦牛IFN-γ基因与表达载体pET-30a连接,构建了重组表达质粒pET-30-YakIFN-γ。用IPTG诱导表达的可溶性表达产物经镍柱亲和纯化,用纯化的重组YakIFN-γ蛋白进行了MTT、抑制肿瘤细胞增殖和细胞病变抑制的生物学特性研究。结果显示,成功克隆和表达了YakIFN-γ基因;序列分析表明:克隆的YakIFN-γ基因序列与GenBank上登录的黄牛IFN-γ基因序列的同源性为99.0%。SDS-PAGE分析和Western-blot检测证实,获得了高纯度的重组YakIFN-γ蛋白。重组YakIFN-γ(rYakIFN-γ)对伪狂犬病病毒的活性单位为2.2×103U/mg。表明表达并纯化的rYakIFN-γ蛋白具有较高的生物学活性和干扰病毒复制的活性。

关键词：牦牛 IFN-γ 基因表达生物学活性

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猪带绦虫10ku蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其初步应用

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畜牧兽医学报 2008年第10期39卷 1402-1405页

作者：吴国华郑亚东贾万忠张少华景志忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

将猪带绦虫六钩蚴10 ku蛋白(TSO10)和囊尾蚴10 ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T-TSO10和pGEX-4T-CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western-blot和薄层... 详细信息

将猪带绦虫六钩蚴10 ku蛋白(TSO10)和囊尾蚴10 ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T-TSO10和pGEX-4T-CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测表达产物。表达的目的蛋白纯化后用于血清样品ELISA检测。SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测结果表明,六钩蚴和囊尾蚴10 ku蛋白基因均能在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白的相对分子质量约为35 ku,并能被囊虫病人阳性血清所识别,具有反应原性,表达量分别占菌体蛋白总量的25%和30%。ELISA检测结果显示,10 ku蛋白可用于囊虫病的诊断。

关键词：猪带绦虫 10 ku蛋白基因表达初步应用

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羊尤氏泰勒虫病的病理学观察

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畜牧兽医学报 2008年第11期39卷 1567-1574页

作者：李有全罗建勋关贵全马米玲高金亮刘志杰党志胜刘爱红任巧云刘军龙鲁炳义陈怀涛白启魏永红牛庆丽田占成殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心... 详细信息

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心肌细胞变性、坏死,染色不均;肠道固有膜明显充血、出血;肝细胞颗粒变性,有散在细胞坏死,汇管区和小叶间有淋巴网状细胞增生;瘤胃黏膜下层有散在性出血,肌层见灶状出血。

关键词：尤氏泰勒虫实验感染病理变化

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