检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2017年第5期47卷 582-586页

作者：何伟殷静岳生赟刘仲藜王帅才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组... 详细信息

为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果,成功利用RACE获得Ddi1-like基因的全长cDNA序列;在真核表达系统中,绦虫上的Ddi1-like重组蛋白获得表达;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,获得重组蛋白即为Ddi1-like蛋白;免疫后获得抗血清,其效价达到1∶12 800。上述结果为后续研究Ddi1-like蛋白的酶切活性研究提供了基础。

关键词：绦虫 Ddi1-like蛋白真核表达蛋白酶

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动物寄生性蠕虫基因组学研究进展

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畜牧兽医学报 2017年第6期48卷 979-989页

作者：杨洋付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次... 详细信息

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次地挖掘。本文中作者将就寄生性蠕虫全基因组测序现状、基因的组成及特征、功能基因组的研究等进行综述,为深入了解寄生性蠕虫的起源、进化和致病机制,以及为寄生性蠕虫病的诊断、新药设计和疫苗研发提供新的思路。

关键词：寄生性蠕虫基因组测序功能基因组学

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多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2858-2864页

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELIS... 详细信息

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达反应原性

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人工感染犬不同时间粪中细粒棘球绦虫相关蛋白质组分析

人工感染犬不同时间粪中细粒棘球绦虫相关蛋白质组分析

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：李双男闫鸿斌李立姚刚田文俊李文卉张念章吴燕涛付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

【目的】对不同感染时间(0 d、16 d、21 d、25 d、30 d、34 d、40 d)犬粪便中细粒棘球绦虫蛋白质组进行分析,探明感染犬不同时期粪便中寄生虫蛋白的表达谱,挑选细粒棘球绦虫特异性蛋白,为建立犬细粒棘球绦虫感染粪抗原检测方法和进一步... 详细信息

【目的】对不同感染时间(0 d、16 d、21 d、25 d、30 d、34 d、40 d)犬粪便中细粒棘球绦虫蛋白质组进行分析,探明感染犬不同时期粪便中寄生虫蛋白的表达谱,挑选细粒棘球绦虫特异性蛋白,为建立犬细粒棘球绦虫感染粪抗原检测方法和进一步研究细粒棘球绦虫代谢过程及其生活机制提供依据。【方法】收集感染细粒棘球绦虫后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,通过QE的液质联用仪分析后进而进行生物信息

关键词：细粒棘球绦虫人工感染抗原检测方法

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棘球蚴病防控技术的研究与应用

棘球蚴病防控技术的研究与应用

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：贾万忠闫鸿斌李立李文卉付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

(1)建立了棘球绦虫(蚴)病DNA-LAMP、多重PCR和PCR-RFLP方法等,为开展流行病学调查和创制DNA分子诊断制剂奠定了基础,初步解决了我国暂时因没有针对犬科动物多房棘球绦虫感染粪抗原检测试剂盒而无法开展对此棘球绦虫感染进行诊断与检测... 详细信息

(1)建立了棘球绦虫(蚴)病DNA-LAMP、多重PCR和PCR-RFLP方法等,为开展流行病学调查和创制DNA分子诊断制剂奠定了基础,初步解决了我国暂时因没有针对犬科动物多房棘球绦虫感染粪抗原检测试剂盒而无法开展对此棘球绦虫感染进行诊断与检测的困难。(2)建立了牛羊棘球蚴病血清学ELISA方法,研制出了相应的试剂盒,检出效果优于市场上现有的诊断试剂盒,增加了可选择的棘球蚴病诊断试剂的种类。(3)实现了棘球蚴病基因工程疫苗抗原EG95在毕赤酵母系统中的高效表达,目的蛋白的

关键词：棘球蚴病防控技术棘球绦虫感染研究与应用

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多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核表达

多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核...

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分... 详细信息

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,TmPKA-C基因开放阅读框的长度为1032 bp,编码343个氨基酸。TmPKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的大小约42 kDa。Western-blot

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达催化亚基

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加拿大棘球绦虫的基因分型与分子流行病学研究进展

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中国人兽共患病学报 2016年第4期32卷 392-399页

作者：李双男闫鸿斌李立娄忠子付宝权殷宏贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

通过比较加拿大棘球绦虫不同基因型的线粒体基因组,尤其是其中的cox1和nad1基因核苷酸序列的差异性,了解加拿大棘球绦虫各基因型的分子遗传标记特征与变异情况,阐明加拿大棘球绦虫基因型在棘球属中的分类地位、命名和进化关系。另外,本... 详细信息

通过比较加拿大棘球绦虫不同基因型的线粒体基因组,尤其是其中的cox1和nad1基因核苷酸序列的差异性,了解加拿大棘球绦虫各基因型的分子遗传标记特征与变异情况,阐明加拿大棘球绦虫基因型在棘球属中的分类地位、命名和进化关系。另外,本文通过对加拿大棘球绦虫各基因型的分子流行病学特征、研究意义、未来研究方向等进行综述,为从事该领域研究的学者和临床工作者提供丰富的分子流行病学信息或资料,并为棘球蚴病分子流行病学调查、预警预报和综合防治策略的制定等提供理论依据和指导。

关键词：加拿大棘球绦虫基因型分子遗传标记线粒体基因分类学流行病学

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猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基(PKA-C)基因的鉴定及表达

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中国兽医科学 2016年第6期46卷 671-677页

作者：刘光学王力郭爱疆张少华郑亚东侯俊玲骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为鉴定猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(Ts PKA-C),分析其作为诊断抗原的可行性,利用猪带绦虫基因组和转录组数据设计猪带绦虫Ts PKA-C特异引物,以猪带绦虫成虫总RNA为模板,通过RT-PCR扩增Ts PKA-C基因的完整ORF,并通过生物信... 详细信息

为鉴定猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(Ts PKA-C),分析其作为诊断抗原的可行性,利用猪带绦虫基因组和转录组数据设计猪带绦虫Ts PKA-C特异引物,以猪带绦虫成虫总RNA为模板,通过RT-PCR扩增Ts PKA-C基因的完整ORF,并通过生物信息学分析进行鉴定。构建p ET-30a(+)-Ts PKA-C重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明,Ts PKA-C的ORF由1 032个核苷酸组成,编码343个氨基酸残基,与细粒棘球蚴和多房棘球蚴氨基酸序列的一致性分别达78.7%和98.0%;Ts PKA-C具有蛋白激酶A的结构域及其催化亚基特征性活性位点,且存在9个潜在的线性B淋巴细胞抗原表位。Ts PKA-C基因的表达产物主要以包涵体形式存在,且可与猪囊尾蚴病阳性血清发生反应,在42 ku处产生特异条带。本研究克隆并鉴定了Ts PKA-C基因,其表达产物可被猪囊尾蚴病阳性血清所识别。

关键词：猪带绦虫 cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基鉴定表达诊断候选抗原

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多头带绦虫的分类研究进展

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中国兽医学报 2016年第8期36卷 1450-1454页

作者：李文卉付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

对于寄生在中枢神经系统外的多头蚴,有人将其命名为格氏多头蚴,并且认为是区别于脑多头蚴的一个新的株或基因型;也有人将其命名为斯氏多头蚴或认为是脑多头蚴的同种异名。现就目前报道的寄生在绵羊中枢神经系统及山羊中枢神经系统外的... 详细信息

对于寄生在中枢神经系统外的多头蚴,有人将其命名为格氏多头蚴,并且认为是区别于脑多头蚴的一个新的株或基因型;也有人将其命名为斯氏多头蚴或认为是脑多头蚴的同种异名。现就目前报道的寄生在绵羊中枢神经系统及山羊中枢神经系统外的多头带绦虫的分类现状进行简要综述,主要依据流行病学从传统形态学及现代分子生物学两方面进行阐述,为多头带绦虫的分类工作提供科学依据。

关键词：多头带绦虫格氏多头蚴斯氏多头带绦虫脑多头蚴

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羊绦虫蚴病免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2016年第5期36卷 885-888页

作者：李文卉付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

羊绦虫蚴病是以羊为中间宿主、犬为终末宿主的绦虫蚴病,常见的有羊棘球蚴病、羊囊尾蚴病、羊脑多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病。这些羊绦虫蚴病免疫学诊断方面如ELISA取得一些进展,但仍然缺乏高敏感性和特异性的诊断抗原,尸体剖检依然是临床... 详细信息

羊绦虫蚴病是以羊为中间宿主、犬为终末宿主的绦虫蚴病,常见的有羊棘球蚴病、羊囊尾蚴病、羊脑多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病。这些羊绦虫蚴病免疫学诊断方面如ELISA取得一些进展,但仍然缺乏高敏感性和特异性的诊断抗原,尸体剖检依然是临床诊断的金标准。

关键词：羊绦虫蚴病免疫学诊断

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