检索结果-内蒙古大学图书馆

豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)的多抗制备、组织分布及活性研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第5期38卷 595-601页

作者：王莉杰王立群刘婷丽张少华刘光学李艳萍梁盼红骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

目的研究豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(Cpserpin)的组织分布及其对丝氨酸蛋白酶的抑制效果。方法利用原核表达的重组Cpserpin (rCpserpin)免疫家兔,采用间接ELISA检测免疫后血清的效价,取免疫兔血清,制备抗体并纯化后,采用Western blot... 详细信息

目的研究豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(Cpserpin)的组织分布及其对丝氨酸蛋白酶的抑制效果。方法利用原核表达的重组Cpserpin (rCpserpin)免疫家兔,采用间接ELISA检测免疫后血清的效价,取免疫兔血清,制备抗体并纯化后,采用Western blotting对多克隆抗体进行特异性分析,通过免疫组化试验分别观察rCpserpin在豆状带绦虫成虫和幼虫中的组织分布。构建重组质粒pPIC9K-Cpserpin,线性化后转化至毕赤酵母KM71感受态细胞,用G418筛选的高拷贝菌株进行诱导表达并纯化rCpserpin,采用发色底物法检测不同浓度(6、9、 18、 21μg/ml) rCpserpin对0.5μg/mlα-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶等3种丝氨酸蛋白酶活性的抑制效果。结果间接ELISA检测结果显示,免疫血清多抗IgG抗体的效价达1∶51 200。Western blotting分析结果显示,纯化后的多克隆抗体可与rCpserpin和兔豆状囊尾蚴虫体可溶性抗原产生特异性反应。免疫组化试验结果显示,Cpserpin在囊尾蚴阶段表达量很低,但在成节和孕节中高度表达,广泛分布于虫体体壁和虫卵中。酵母表达的rCpserpin随浓度增加对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制效果分别增强,在21μg/ml浓度时,对3种丝氨酸蛋白酶的抑制率最高,分别为(50.5±2.5)%、(71.5±1.5)%和(77.4±1.5)%(均P <0.05)。结论 rCpserpin多克隆抗体具有特异性,在豆状囊尾蚴成节和孕节中高表达,且其对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶有较强的抑制作用。

关键词：豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂组织分布酶活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

引用

2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第16次学术研讨会

作者：李文卉岳龙张念章刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh... 详细信息

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh基因家族成员基因组序列,获得6个含有N端信号肽和1个FnⅢ结构域的基因序列。序列预测分析发现6个TmAdh基因都由3个外显子和2个内含子组成;其蛋白序列一致性在44.9-99.2%;进化分析发现该蛋白属于带科绦虫免疫保护性抗原家族的一个新的亚类。将TmAdh1-4基因进行在pGEX4T-1表达系统成功表达出产物大小约为39.0、38.1、38.9和37.8ku的重组蛋白,并进行反应原性及细胞黏着活性检测。结果:脑多头蚴自然感染绵羊血清与TmAdh3重组蛋白反应明显,而与TmAdh1、TmAdh2和TmAdh4重组蛋白反应不明显,而且该蛋白都具有细胞黏着活性。免疫组化表明TmAdh1-4重组蛋白主要分布在脑多头蚴原头节的上皮、顶突、小钩、组织内部有零星分布。重组蛋白的动物免疫保护实验结果显示TmAdh1、TmAdh3和TmAdh4重组蛋白免疫绵羊后抗体水平都显著上升,三免后达到峰值,攻虫后抗体水平开始逐渐下降。动物免疫保护实验表明TmAdh1、TmAdh3、TmAdh4重组蛋白的减虫率分别为61.71%、53.17%、50.76%。结论:本研究为进一步研制脑多头蚴病疫苗奠定基础。

关键词：多头带绦虫 TmAdh 纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域原核表达黏着活性功能性抗原

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

引用

第九届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：李文卉张念章杨洋刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

引言脑多头蚴病是由多头带绦虫的幼虫(脑多头蚴)寄生于绵羊等中间宿主的中枢神经系统引起的一种绦虫蚴病,该病引起感染宿主的最终死亡,对养羊业造成巨大的经济损失,而且人也能被感染,是一种被忽视的人兽共患寄生虫病。

关键词：多头带绦虫发育阶段原头节不同部位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新疆部分地区蜱传斑点热立克次体的分子流行病学研究

引用

甘肃农业大学学报 2019年第5期54卷 10-16页

作者：曲志强林汉亮许肖枫马力克·艾则孜罗毅马站孙晓林刘光远甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 新疆维吾尔自治区动物卫生监督所新疆乌鲁木齐830011

【目的】调查新疆地区斑点热群立克次体(spotted fever group rickettsia,SFGR)在蜱虫中的感染情况及其分布.【方法】2018年4~5月,采用人工布旗法对新疆地区10个县(市)的游离蜱和寄生于家畜体表的蜱虫进行采集并鉴定.对采集的蜱虫提取... 详细信息

【目的】调查新疆地区斑点热群立克次体(spotted fever group rickettsia,SFGR)在蜱虫中的感染情况及其分布.【方法】2018年4~5月,采用人工布旗法对新疆地区10个县(市)的游离蜱和寄生于家畜体表的蜱虫进行采集并鉴定.对采集的蜱虫提取基因组,利用SFGR特异引物对提取的基因组进行PCR扩增及测序分析,用MEGA 6.0软件构建分子系统进化树.【结果】共采集蜱虫2 079只,经鉴定分析,采集的蜱种包括革蜱属、璃眼蜱属和扇头蜱属3属的7个种.扩增得到了包括拉欧蒂立克次体(Rickettsia raoultii)、斯洛伐克立克次体(Rickettsia slovaca)等在内的4种已知SFGR和2株未定种.对其阳性率进行统计结果表明,不同地区的蜱虫阳性率为40%~80%,平均阳性率为51.5%;不同蜱种间的感染率为1.1%~80%.【结论】通过对新疆地区SFGR病原的流行病学调查表明,被检地区SFGR病原阳性率较高,存在2种病原交叉感染现象,且扩增到的病原多属我国少见的人兽共患病病原.

关键词：蜱斑点热立克次体阳性率系统进化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于serpin重组蛋白的豆状囊尾蚴病间接ELISA诊断方法的初步建立

引用

中国兽医科学 2018年第4期48卷 443-449页

作者：王莉杰张少华毛立梁盼红王力王立群骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为检测兔豆状囊尾蚴（Cysticercus pisiformis）感染，利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）扩增豆状囊尾蚴serpin基因，并对其开放阅读框（ORF）及编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。构建pET-30a（＋）-Cpserpin重组表达载体，并在大... 详细信息

为检测兔豆状囊尾蚴（Cysticercus pisiformis）感染，利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）扩增豆状囊尾蚴serpin基因，并对其开放阅读框（ORF）及编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。构建pET-30a（＋）-Cpserpin重组表达载体，并在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。以纯化的重组蛋白（rCpserpin）为包被抗原．优化反应条件，建立检测兔豆状囊尾蚴病血清抗体的间接ELISA方法。结果表明，Cpserpin基因的完整ORF长为l149bp，含有serpin家族保守基序（DEEGAE）、serpin标签序列（FKVDHPFIFFI）以及serpin特有的反应中心环结构域（RCL）；rCpserpin主要以包涵体形式表达，且能被家兔豆状囊尾蚴阳性血清所识别。所建立的间接ELISA的最佳反应条件包括：rCpserpin包被质量浓度为2μg／mL，待检血清和酶标二抗的稀释度分别为1：100和1：2500，包被液和封闭液分别为pH9．6碳酸盐缓冲液和10g/L牛血清白蛋白。利用上述条件检测60份家兔豆状囊尾蚴阳性血清和108份阴性血清，证实该方法的临界值为0．368，敏感性和特异性分别为96．7％和93．5％。结果表明，基于Cpserpin重组蛋白的间接ELISA方法可用于家兔豆状囊尾蚴病的血清学诊断。

关键词：豆状囊尾蚴 Cpserpin 原核表达间接ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽滑液囊支原体诊断与防控技术研究进展

引用

黑龙江畜牧兽医 2018年第9期 31-34,245页

作者：王昆宫晓炜陈启伟郑福英中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室/草食动物细菌病创新团队

禽滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）感染是一种以亚临床型上呼吸道感染为最常表现特征的禽支原体感染,一经发病,会给养殖户带来严重的经济损失。MS感染引起的滑膜炎可引起鸡关节肿大,同时累及气囊、腱鞘和胸骨。肿胀的足垫和关... 详细信息

禽滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）感染是一种以亚临床型上呼吸道感染为最常表现特征的禽支原体感染,一经发病,会给养殖户带来严重的经济损失。MS感染引起的滑膜炎可引起鸡关节肿大,同时累及气囊、腱鞘和胸骨。肿胀的足垫和关节可作为MS感染进展的指标,会导致鸡进行性消瘦。文章从MS诊断方法、药物治疗、疫苗免疫及净化鸡群等方面综合阐述了实验室检测MS所涉及的相关技术要点、鸡场MS防治所采取的相关措施及研究进展,旨在为鸡场MS清除计划提供最佳方案。

关键词：滑液囊支原体(MS) 流行病学诊断方法耐药性疫苗防控措施

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽滑液囊支原体WF224株的分离鉴定及其致病性的研究

引用

中国兽医科学 2018年第4期48卷 472-478页

作者：王昆宫晓炜郑福英陈启伟刘永生杜晓华甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

摘要：用禽支原体16SrRNA引物对山东省潍坊市某养鸡场疑似禽滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae，MS）感染的气管棉拭子病料进行了PCR鉴定。结果可扩增到特异性条带。通过分离纯化获得MS分离株CHN—WF224—2016；低倍显微镜观察到，菌... 详细信息

摘要：用禽支原体16SrRNA引物对山东省潍坊市某养鸡场疑似禽滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae，MS）感染的气管棉拭子病料进行了PCR鉴定。结果可扩增到特异性条带。通过分离纯化获得MS分离株CHN—WF224—2016；低倍显微镜观察到，菌落呈典型的“荷包蛋”状；生化鉴定结果表明，该分离株能发酵葡萄糖，不水解精氨酸，不利用尿素。然后，将测序后的16SrRNA序列上传GenBank。MEGA分析和构建的系统发育树表明，CHN—WF224—2016分离株与其他MS菌株在同一进化分支上，为禽滑液囊支原体；其中与MS标准菌株（WVU1853）和河南商丘分离株（CHN-SQ27—2017）的相似性分别为99％和98％。用MS分离株CHN-WF224—2016感染21日龄的鸡．攻毒后第11天和第21天进行实验室解剖，观察临床症状及气管粘膜病理形态学改变：结果表明．分离株CHN—WF224-2016能引起典型的足垫肿胀和关节滑液囊炎。本研究结果证实。CHN—WF224—2016分离株致病性强，可作为今后疫苗研究的候选菌株。

关键词：禽滑液囊支原体 16sRNA 系统发育树致病性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新疆边境地区蜱源巴贝斯虫的分子流行病学研究

新疆边境地区蜱源巴贝斯虫的分子流行病学研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第一届青年科学家学术论坛

作者：许肖枫曲志强谭阳春倪军吴泽功刘文阁林汉亮马力克·艾则孜罗毅马站陈泽任巧云罗金罗建勋殷宏刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室新疆维吾尔自治区动物卫生监督所

[目的]调查新疆边境地区巴贝斯虫在蜱虫中的感染情况及其分布。[方法]2018-2019年的4月-5月,采用人工布旗法对新疆地区18个县(市)的游离蜱和寄生于家畜体表的蜱虫进行采集并鉴定。对采集的蜱虫提取基因组,利用巴贝斯虫特异引物对提取的... 详细信息

[目的]调查新疆边境地区巴贝斯虫在蜱虫中的感染情况及其分布。[方法]2018-2019年的4月-5月,采用人工布旗法对新疆地区18个县(市)的游离蜱和寄生于家畜体表的蜱虫进行采集并鉴定。对采集的蜱虫提取基因组,利用巴贝斯虫特异引物对提取的基因组进行PCR扩增及测序分析,用MEGA 6.0软件构建分子系统进化树。[结果]共采集蜱虫2279只,经鉴定分析,采集的蜱种包括森林革蜱,胫距革蜱,边缘革蜱,草原革蜱,银盾革蜱,小亚璃眼蜱,亚洲璃眼蜱,麻点璃眼蜱,血红扇头蜱,长角血蜱,刻点血蜱,4属的11个种。扩增得到了包括莫氏巴贝斯(Babesia motasi)、驽巴贝斯虫(Babesia caballi)、粗糙巴贝斯(Babesia crassa)、马巴贝斯虫(Babesia equi)4种已知巴贝斯虫和4株未定种。对其阳性率进行统计结果表明,不同地区的蜱虫阳性率为3.25%～79.17%,平均阳性率为19.85%。[结论]本研究首次利用巢式PCR对我国蜱源巴贝斯虫病的流行状况进行大范围的调查,为制定巴贝斯虫病防控策略提供了可靠的分子流行病学信息。

关键词：蜱巴贝斯虫阳性率系统进化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蜱虫microRNA研究进展

蜱虫microRNA研究进展

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第一届青年科学家学术论坛

作者：谭阳春刘文阁倪军许肖枫吴泽功仇晓飞林汉亮马力克·艾则孜罗毅马站罗金任巧云殷宏罗建勋刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室新疆维吾尔自治区动物卫生监督所

蜱可以传播多种人畜共患病,对养殖业和人类健康构成巨大威胁,因此对于蜱的防控和研究很有必要。microRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。miRNA可能在蜱各种发育... 详细信息

蜱可以传播多种人畜共患病,对养殖业和人类健康构成巨大威胁,因此对于蜱的防控和研究很有必要。microRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。miRNA可能在蜱各种发育过程中发挥着重要作用,Barrero R A等在对微小牛蜱miRNA的研究中发现和鉴定了51种进化保守的miRNA;Zhou JL等发现在长角血蜱中miR-1,miR-375,miR-184,miR-263a,miR-739和bantam可能参与长角血蜱吸血过程;袁小松等分析发现亚洲璃眼蜱miR-10在不同发育阶段和各组织器官的表达具有选择性;对rmi-miR-5316b和rmi-miR-5331的研究表明,这两种miRNA可能在卵发育阶段发挥着重要作用;研究rmi-miR-3931和rmi-miR-5308发现,这两种miRNA参与调控幼蜱的生长发育;郝嘉伟等发现miR-275通过调控Vg-2基因参与长角血蜱的卵巢发育和血液消化过程;rmi-let-7a被发现对维持雌蜱正常的繁殖和产卵有着一定作用。目前对蜱miRNA的研究还甚少,对于蜱中microRNA所参与的生物过程缺乏实验性的功能验证。本文综述了miRNA在蜱体内的研究概况及其生物学功能的研究进展,以期为从后转录水平了解蜱的各种发育过程、先天性免疫机制和蜱传病的抑制或治疗提供参考。

关键词：蜱虫 miRNA 靶基因功能研究

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

畜禽支原体耐药性及耐药机制研究进展

引用

中国畜牧兽医 2017年第8期44卷 2489-2495页

作者：宫晓炜马文瑛陈启伟郑福英刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室草食动物细菌病创新团队兰州730046

支原体感染给畜禽养殖造成的危害已受到国内外科研人员的广泛重视。目前控制畜禽支原体感染、降低畜禽养殖经济损失的切实有效方法是大量使用抗生素,其中四环素、大环内酯类及喹诺酮类药物是现阶段临床兽医首选的3类抗菌药。但短短几十... 详细信息

支原体感染给畜禽养殖造成的危害已受到国内外科研人员的广泛重视。目前控制畜禽支原体感染、降低畜禽养殖经济损失的切实有效方法是大量使用抗生素,其中四环素、大环内酯类及喹诺酮类药物是现阶段临床兽医首选的3类抗菌药。但短短几十年的临床实践表明,滥用抗生素已经严重威胁畜禽健康,许多畜禽支原体临床分离株不仅仅对单一抗生素产生耐药性,而且同时对多种抗生素耐药。作者从药物靶位点改变、外排泵系统形成、抗菌药物灭活酶产生等方面对上述抗畜禽支原体药物的耐药机制进行阐述,以期为建立支原体耐药性检测体系、指导临床合理用药、开发新的药物等提供理论依据和策略。

关键词：畜禽支原体耐药性耐药机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：