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弓形虫代谢分泌抗原对猪IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α表达水平的影响

弓形虫代谢分泌抗原对猪IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α表达水平的影...

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：蔡志杰芦赟张燕丽曹丽艳王艳华付宝权李文卉张德林甘肃业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为了探索弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)免疫仔猪后,对机体白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+Cp G组(未乳化)、E/SA+Cp G组、E/SA+... 详细信息

为了探索弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)免疫仔猪后,对机体白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+Cp G组(未乳化)、E/SA+Cp G组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+Cp G组及对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、感染后1周及感染后2周采血分离血清,用ELISA试剂盒检测IL-2、IL-4

关键词：代谢分泌抗原弓形虫 IFN TNF

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多头带绦虫多头蚴cDNA表达文库的构建及初步分析

多头带绦虫多头蚴cDNA表达文库的构建及初步分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：李文卉盖文燕王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林贾万忠 Radu Blaga 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary Medicine

本研究从甘肃景泰羊源多头蚴原头节提取总RNA,以Oligo d(T)纤维素柱纯化mRNA,利用Lambda ZAPIIXR文库构建试剂盒构建了多头蚴cDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR鉴定及测序分析,确定文库重组率和插入外源基因片... 详细信息

本研究从甘肃景泰羊源多头蚴原头节提取总RNA,以Oligo d(T)纤维素柱纯化mRNA,利用Lambda ZAPIIXR文库构建试剂盒构建了多头蚴cDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR鉴定及测序分析,确定文库重组率和插入外源基因片段大小。结果表明多头蚴cDNA表达文库的原始库容量为1.0x10～6噬

关键词：多头带绦虫脑多头蚴 cDNA表达文库 EST

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弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达

弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张燕丽曹丽艳芦赟苟惠天王艳华付宝权李文卉张德林甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明质粒... 详细信息

采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液及上清样品中有一条约39.2ku的条带,可被山羊抗弓形虫高免血清所识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。

关键词：刚地弓形虫微线体蛋白3 基因克隆真核表达

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弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究

弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张燕丽曹丽艳芦赟蔡志杰王艳华付宝权李文卉张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

根据Genbank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。重组质粒pc... 详细信息

根据Genbank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。重组质粒pcDNA3-MIC3肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清特异抗体;经腹腔攻击感染弓形虫GJS株速殖子,观察小鼠的生存时间。结果成功构建了pcDNA3-MIC3质粒;免疫组小鼠血清检测到特异性抗体;攻击感染后免疫组小鼠平均存活时问较对照组明显延长。表明该核酸疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。

关键词：刚地弓形虫微线体蛋白3(MIC3) 核酸疫苗免疫保护

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弓形虫代谢分泌抗原疫苗对猪T细胞亚群的影响

弓形虫代谢分泌抗原疫苗对猪T细胞亚群的影响

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：蔡志杰王艳华付宝权李文卉芦赟张燕丽曹丽艳张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院

为了研究弓形虫代谢分泌抗原疫苗对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG（未乳化）组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、感染后1周... 详细信息

为了研究弓形虫代谢分泌抗原疫苗对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG（未乳化）组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后2周、免疫后4周、感染后1周及感染后2周采取仔猪外周血,用流式细胞仪对各试验组外周血中CD4及

关键词：代谢分泌抗原弓形虫细胞亚群

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弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：曹丽艳张德林张燕丽芦赟蔡志杰王艳华赵晋军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核... 详细信息

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接ELISA检测,小鼠免疫后产生了较高的抗体;动物保护性实验表明,虽然与对照组相比免疫组小鼠存活时间有一定的延长,但差异无显著性。结论成功构建了弓形虫SAG1重组表达质粒,SAG1蛋白疫苗诱导小鼠的免疫保护力不强。

关键词：弓形虫表面抗原1 克隆表达抗原性分析

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多头带绦虫甘肃分离株分子分类鉴定研究

多头带绦虫甘肃分离株分子分类鉴定研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：李文卉李永光盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林罗建勋 R.Blaga 付宝权甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine

多头带绦虫(Taenia multiceps)的成虫寄生于犬、狼、狐狸等犬科动物的小肠,其中绦期幼虫多头蚴通常寄生于绵羊、牛等中间宿主的大脑、脊髓等中枢神经系统,可以引起严重致死性的人兽共患多头蚴病。该病在非洲、美洲、欧洲及亚洲均有动物...

多头带绦虫(Taenia multiceps)的成虫寄生于犬、狼、狐狸等犬科动物的小肠,其中绦期幼虫多头蚴通常寄生于绵羊、牛等中间宿主的大脑、脊髓等中枢神经系统,可以引起严重致死性的人兽共患多头蚴病。该病在非洲、美洲、欧洲及亚洲均有动物感染及人体病例报道,在我国该病呈全国性分布,尤以西北、华北、东北等广大牧区常见

关键词：

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多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究

多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：李永光李文卉盖文燕王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林贾万忠 RaduBlaga 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary Medicine

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒p... 详细信息

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠埃希菌BL21后,以异丙基-β-D-

关键词：多头带绦虫脑多头蚴硫氧还蛋白过氧化物酶重组蛋白免疫原性

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应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：付宝权刘明远姚春雨李文卉李永光王艳华吴秀萍张德林才学鹏 Radu Blaga Pascal Boireau 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室吉林大学人兽共患病研究所内蒙古民族大学动物科技学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary MedicineCluj-Napoca

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明... 详细信息

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明,河南猪株、西安猪株、云南猪株、哈尔滨猪株、天津猪株、乌兰浩特犬株1旋毛虫的PCR扩增条带与T1一致,为旋毛虫***;而长春犬株与鸟兰浩特犬株2旋毛虫的PCR扩增条带与T2一致,为乡土旋毛虫***。同时对以上旋毛虫分离株5S rDNA内部基因间隔区序列进行测定,序列比对分析结果也证实这十个分离株分别属于旋毛虫***和乡土旋毛虫***,而且不同分离株5S RNA内部转录间隔区基因序列存在差异。建立的PCR方法可以应用于我国旋毛虫分离株的虫种分子分类鉴定,这对我国旋毛虫病分子病原学检测、分离株的分类鉴定以及种群遗传结构的研究都具有重要意义。

关键词：中国旋毛虫分离株 PCR 鉴定

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羊尤氏泰勒虫病的病理学观察

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畜牧兽医学报 2008年第11期39卷 1567-1574页

作者：李有全罗建勋关贵全马米玲高金亮刘志杰党志胜刘爱红任巧云刘军龙鲁炳义陈怀涛白启魏永红牛庆丽田占成殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心... 详细信息

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心肌细胞变性、坏死,染色不均;肠道固有膜明显充血、出血;肝细胞颗粒变性,有散在细胞坏死,汇管区和小叶间有淋巴网状细胞增生;瘤胃黏膜下层有散在性出血,肌层见灶状出血。

关键词：尤氏泰勒虫实验感染病理变化

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