检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2011年第11期41卷 1101-1105页

作者：张芳芳王光华郑福英宫晓炜周继章吴润邱昌庆中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

采集青海省泽库县某牧户疑似牦牛病毒性腹泻病牛的样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种MDBK细胞,并盲传至第10代,检测每一代细胞中牛病毒性腹泻病毒的E0基因。通过分离株接种细胞后产生的病变效应观察、免疫荧光试验、电镜观察、RT... 详细信息

采集青海省泽库县某牧户疑似牦牛病毒性腹泻病牛的样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种MDBK细胞,并盲传至第10代,检测每一代细胞中牛病毒性腹泻病毒的E0基因。通过分离株接种细胞后产生的病变效应观察、免疫荧光试验、电镜观察、RT-PCR扩增以及序列分析鉴定了该病毒。结果表明,盲传的每代细胞中均可检测到E0基因;接毒后的细胞在盲传至第7代时出现明显的细胞病变;免疫荧光试验中能观察到细胞内发出的特异性荧光;经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈直径为40～60nm的病毒粒子,将其命名为QHZK株。对克隆的E0基因测序后提交至GenBank(登录号:JF927789),并将获得的序列与其他国内外分离株的E0序列比对,同源性为73.6%～98.2%;系统进化分析表明该分离株属于牛病毒性腹泻病毒1b亚型。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E0基因分离鉴定

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多头带绦虫甘肃分离株线粒体NADH脱氢酶亚基Ⅰ基因片段差异分析

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中国兽医学报 2011年第5期31卷 663-667,673页

作者：李文卉盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠罗建勋 R.Blaga 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca 400372Romania

应用线粒体DNA中的NADH脱氢酶亚基Ⅰ（ND1）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,构建系统进化树,分析其种内变异。结果表明,所有多头带绦虫（***）分离株均成功扩增出约0.5 kb的ND1基因片段。序列... 详细信息

应用线粒体DNA中的NADH脱氢酶亚基Ⅰ（ND1）基因作为分子标记,对我国甘肃省景泰和平凉地区10个绵羊源脑多头蚴进行分析,构建系统进化树,分析其种内变异。结果表明,所有多头带绦虫（***）分离株均成功扩增出约0.5 kb的ND1基因片段。序列分析显示,去除引物序列后多头带绦虫的ND1基因片段长为488bp,可以分为9类,共有22个核苷酸变异位点,变异率为0.20%~2.66%。基于ND1序列的系统进化树表明所有***分离株构成1个分支,可分为3个亚群,国内分离株分别处在不同的亚群中。国内分离株中除了与已知的遗传变异型Tm1（AY669089/Tm-JT081204/Tm-JT090331）和Tm3（DQ077820/Tm-JT080526）相同外,还存在新的遗传变异型（Tm-JT081008/Tm-JT090603/Tm-JT090115-2）,独立为一支,与其他分离株亲缘关系较远;表明ND1基因片段适合作为研究***分离株种内变异的分子标记。

关键词：多头带绦虫脑多头蚴 NADH脱氢酶亚基I基因种内变异

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棘球蚴体外培养研究进展

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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 559-562页

作者：倪兴维李宏民者永辉闫鸿斌金科贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所农业部兽医公共卫生重点开放实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 西宁市动物卫生监督所西宁810003

棘球属（Echinococcus）绦虫的幼虫-棘球蚴（echinococcus or hydatid cyst）寄生于动物（包括人）体内，引起一类严重危害人体健康和阻碍畜牧业发展的人兽共患寄生虫病即棘球蚴病（Echinococcosis），又称包虫病（hydatiddisease）。... 详细信息

棘球属（Echinococcus）绦虫的幼虫-棘球蚴（echinococcus or hydatid cyst）寄生于动物（包括人）体内，引起一类严重危害人体健康和阻碍畜牧业发展的人兽共患寄生虫病即棘球蚴病（Echinococcosis），又称包虫病（hydatiddisease）。呈世界性分布，我国是棘球蚴病的高发区。

关键词：棘球蚴病体外培养人兽共患寄生虫病畜牧业发展世界性分布人体健康棘球属包虫病

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多头带绦虫Tm16与Tm18抗原基因的克隆及原核表达

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中国预防兽医学报 2011年第1期33卷 76-79页

作者：李文卉盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠罗建勋 BLAGA R 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca 400372Romania

为原核表达Tm16和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头蚴原头节基因组DNA为模板分别扩增Tm16和Tm18抗原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表... 详细信息

为原核表达Tm16和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头蚴原头节基因组DNA为模板分别扩增Tm16和Tm18抗原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表达质粒pGEX-Tm16和pGEX-Tm18。转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物并进行纯化。结果显示:在大肠杆菌中表达出带有GST标签的大小约为39.6 ku和39.4 ku的重组蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖树脂纯化得到高纯度的可溶性的GST-Tm16及GST-Tm18重组蛋白,western blot分析表明重组蛋白均能够被兔抗GST单克隆抗体特异性识别。

关键词：多头带绦虫 Tm16 Tm18 原核表达

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蛋白质组学研究技术及其在弓形虫研究中的应用

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畜牧与兽医 2011年第2期43卷 91-94页

作者：周东辉赵付荣袁子国朱兴全林瑞庆华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

蛋白质组学是生命科学研究的一种重要的高通量方法,本文介绍了蛋白质组学的研究内容及主要技术,并对蛋白质组学在弓形虫研究中的应用进行了综述。

关键词：蛋白质组蛋白质组学双向电泳质谱弓形虫

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C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性

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江苏农业科学 2011年第4期39卷 38-40页

作者：刘文倩王猛张奕强刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物生物技术中心四川雅安625014

利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Mod... 详细信息

利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Model 422 Electro-Eluter切胶回收目的蛋白,并进行Western-Blotting分析。结果得到50 ku左右目的条带,证实融合蛋白VP3大肠杆菌中得到以包涵体形式表达,且使用切胶回收后的蛋白能被C型口蹄疫阳性血清识别,具有良好的反应原性。

关键词： C型口蹄疫结构蛋白VP3 原核表达生物活性

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绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况

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动物医学进展 2011年第11期32卷 46-48页

作者：许健储岳峰赵萍高鹏程贺英张莹剡根强逯忠新石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省生物检测工程技术研究中心甘肃兰州730046

绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的... 详细信息

绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。

关键词：绵羊肺炎支原体 MoGH3-3株增殖

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旋毛虫p53糖蛋白抗原研究进展

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动物医学进展 2011年第1期32卷 81-85页

作者：王鸿盛付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

旋毛虫p53糖蛋白是旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原的主要抗原组分之一,具有肌幼虫期特异表达特性,主要定位在肌幼虫β-杆细胞。不同旋毛虫种p53糖蛋白氨基酸序列相对保守,但抗原性有差异,在同一种内变异极少,具有种及属特异性抗原表位。论文... 详细信息

旋毛虫p53糖蛋白是旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原的主要抗原组分之一,具有肌幼虫期特异表达特性,主要定位在肌幼虫β-杆细胞。不同旋毛虫种p53糖蛋白氨基酸序列相对保守,但抗原性有差异,在同一种内变异极少,具有种及属特异性抗原表位。论文就旋毛虫p53糖蛋白抗原的分子结构、不同发育时期的特异性表达、抗原性等方面的研究进展进行综述。

关键词：旋毛虫 p53糖蛋白抗原

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抗菌肽Shiva-1a基因真核表达载体的构建及序列分析

抗菌肽Shiva-1a基因真核表达载体的构建及序列分析

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第3届全国人畜共患病学术研讨会

作者：宫晓炜郑福英蔺国珍曹小安王光华周继章才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室

抗菌肽是生物体与生俱来的抗病原微生物感染的小分子多肽,在先天性免疫抗感染的过程中起着十分重要的作用。天蚕素类(Cecropins)抗菌肽是由单基因编码的、细胞核糖体翻译的碱性小分子蛋白,具有分子量小、热稳定性强、无免疫性、水溶性... 详细信息

抗菌肽是生物体与生俱来的抗病原微生物感染的小分子多肽,在先天性免疫抗感染的过程中起着十分重要的作用。天蚕素类(Cecropins)抗菌肽是由单基因编码的、细胞核糖体翻译的碱性小分子蛋白,具有分子量小、热稳定性强、无免疫性、水溶性好、抗菌谱广等特点。此外,Cecropins抗菌肽对耐药菌株有明显的抑制作用,仅作用于原核细胞及发生病变的真核细胞,对正常宿主细胞无损伤,是生物体防御细菌、真菌、囊膜病毒等

关键词：真核表达载体 Shiva-1a 感受态细胞真核表达质粒序列分析酶切鉴定抗菌肽

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布鲁氏菌LAMP检测方法的建立

布鲁氏菌LAMP检测方法的建立

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第3届全国人畜共患病学术研讨会

作者：蔺国珍邱昌庆郑福英周继章曹小安宫晓炜王光华中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室

本研究旨在建立一种灵敏、特异、快速高效的布鲁氏菌体外等温扩增检测方法。首先基于新兴的环介导等温扩增技术,参考GenBank中流产布鲁氏菌omp25基因序列,应用DNAStar软件分析其序列,利用PrimerExplorer V3软件,设计了4条特异性引物,即... 详细信息

本研究旨在建立一种灵敏、特异、快速高效的布鲁氏菌体外等温扩增检测方法。首先基于新兴的环介导等温扩增技术,参考GenBank中流产布鲁氏菌omp25基因序列,应用DNAStar软件分析其序列,利用PrimerExplorer V3软件,设计了4条特异性引物,即2条内外引物和2条内引物。然后提取阳性质粒DNA作为模板,对引物、反应温度、时间等几个重要参数进行优化。试验结果表明:该方法对于耶尔森菌、大肠杆菌、根瘤菌等无非特异性扩增,表现出良好的特异性;敏感性高,最低可扩增到9 fg/μl的DNA,比普通PCR至少高出10倍;比PCR用时更短,可在2 h内完成;而且简单易行,不需要复杂的仪器,常规水浴锅在63.5℃即可进行,肉眼可直接观察检测结果。该方法是适合基层和现场检测的快速灵敏实用的分子生物学方法 ,为布病的广泛检测和筛查提供了新的方法和思路。

关键词：布鲁氏菌 LAMP

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