检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2016年第3期38卷 253-256页

作者：刘亚丽丁耀忠马小元张杰张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5... 详细信息

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5＇端非编码区的5端共价连接病毒自身编码的非结构蛋白（VPg）,而且还包含有S-片段、

关键词：口蹄疫病毒 FMDV 抗原结构非结构蛋白衣壳抗原位点正链病毒科病毒粒子编码区

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生物被膜主动分散机制研究进展

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中国生物工程杂志 2012年第2期32卷 117-122页

作者：高宗良谷元兴赵峰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部畜禽病毒学重点开放实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

细菌生物被膜(bacterial biofilm,BBF)为微生物栖息提供了所需要的保护屏障和生长微环境。生物被膜对抗菌药物的耐受性使得它在医学治疗等领域产生了严重的危害。因此如何分散被膜显得意义重大。综述了生物被膜主动分散的几种主要机制,... 详细信息

细菌生物被膜(bacterial biofilm,BBF)为微生物栖息提供了所需要的保护屏障和生长微环境。生物被膜对抗菌药物的耐受性使得它在医学治疗等领域产生了严重的危害。因此如何分散被膜显得意义重大。综述了生物被膜主动分散的几种主要机制,包括降解酶的合成、运动力的恢复、表面活性剂的产生和细胞死亡。

关键词：被膜分散降解酶种子分散细胞死亡

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核糖体展示口蹄疫单链抗体库的构建

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中国生物工程杂志 2011年第7期31卷 98-103页

作者：杨双马军武周广青林密冯霞刘涛代鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简... 详细信息

目的:构建库容量大、多样性好的核糖体展示口蹄疫单链抗体(scFv)库。方法:分离口蹄疫病毒免疫的兔脾细胞,提取总RNA,用RT-PCR扩增兔抗体的重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因,同时扩增作为间隔区的兔抗体Ck基因;采用重叠延伸PCR(简称SOE-PCR)技术连接VH-VL基因,同时引入T7启动子和核糖体结合位点序列,体外构建核糖体展示scFv库模板,连接pMD18-T载体转化*** DH5α大肠杆菌,挑取阳性克隆测序以鉴定scFv组装。结果:成功构建了库容量达8.21×1013的兔源口蹄疫核糖体展示scFv库。结论:构建的大容量兔源性口蹄疫核糖体展示抗体库可以成为进一步筛选特异性口蹄疫单链抗体的实验平台,为开发诊断性口蹄疫单链抗体奠定了很好的实验基础。

关键词：核糖体展示技术重叠延伸PCR 单链抗体库口蹄疫病毒

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反向遗传技术在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用

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中国农学通报 2011年第7期27卷 364-368页

作者：谷元兴王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯救、疫苗研制、分子病原学诊断等方面的内容,对反向遗传技术在PRRS研究中的应用作一综述。

关键词：反向遗传技术病毒拯救 RNA病毒猪繁殖与呼吸综合征应用

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磁小体研究进展

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中国农学通报 2011年第24期27卷 8-12页

作者：高宗良谷元兴赵峰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

趋磁细菌(magnetotactic bacteria,MTB)能够在细胞内合成由生物膜包裹的纳米级磁铁矿粒子——磁小体(magetosome)。磁小体的合成过程,尤其是铁离子的反应途径及吸收转运受到严格的生物调控。磁小体完美的晶体结构使其在医学成像、磁介... 详细信息

趋磁细菌(magnetotactic bacteria,MTB)能够在细胞内合成由生物膜包裹的纳米级磁铁矿粒子——磁小体(magetosome)。磁小体的合成过程,尤其是铁离子的反应途径及吸收转运受到严格的生物调控。磁小体完美的晶体结构使其在医学成像、磁介导热疗、药物输送等众多领域都有良好的应用价值。主要综述了磁小体矿化过程中铁的反应途径和吸收转运系统,以及磁小体在各方面的应用,并对未来的研究方向做了展望。

关键词：磁小体铁反应途径吸收转运应用

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RNA编辑功能和RNA干扰

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生物技术通报 2011年第5期27卷 21-25页

作者：代鹏沈辉马军武刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

RNA编辑被认为是生命体一种新的基因加工与修饰现象,是指DNA转录成RNA后除RNA剪切外的其他加工过程,以核苷酸的删除、插入或替换等方式改变遗传信息,揭示生物进化过程中基因修饰和调控的另一个重要途径,是对中心法则的重要补充。而RNAi... 详细信息

RNA编辑被认为是生命体一种新的基因加工与修饰现象,是指DNA转录成RNA后除RNA剪切外的其他加工过程,以核苷酸的删除、插入或替换等方式改变遗传信息,揭示生物进化过程中基因修饰和调控的另一个重要途径,是对中心法则的重要补充。而RNAi是一种由dsRNA介导的,在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因表达的基因调节途径。着重介绍RNA编辑功能、RNA编辑与RNA干扰关系。

关键词： RNA编辑功能插入/删除替换 RNA干扰

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副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶基因序列分析与推导蛋白三维结构的分子模拟

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中国兽医学报 2011年第1期31卷 40-44页

作者：马艳平张杰陈豪泰马丽娜赵娜丁耀忠刘文倩王猛刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东广州510640

利用PCR方法获得副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA,将PCR纯化产物与pMD18-T载体连接并转化*** DH5α菌株,重组阳性质粒测序并采用生物信息学软件对所推导的氨基酸序列进行三维结构分析。结果表明,该基因全长510bp,并... 详细信息

利用PCR方法获得副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA,将PCR纯化产物与pMD18-T载体连接并转化*** DH5α菌株,重组阳性质粒测序并采用生物信息学软件对所推导的氨基酸序列进行三维结构分析。结果表明,该基因全长510bp,并与GenBank中登录的其他5株菌株luxS基因完整参考序列进行比较,同源性均在70%以上。用ExPAsy软件包预测了推导蛋白的特性,运用Swiss-PDB viewer软件的SWISS-Model处理器,并利用同源建模的思想建立HPS-luxS的三维结构。拉马钱德兰图证明,构建的luxS蛋白的空间结构是合理的。

关键词：副猪嗜血杆菌 S-核糖基高半胱氨酸酶序列分析分子模拟

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猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入介体的研究进展

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中国兽医科学 2011年第3期41卷 325-330页

作者：张奕强刘文倩刘永生王印张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物医学院四川雅安625014

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵入宿主细胞的途径,介绍了PRRSV的细胞嗜性和其侵入的介体(硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素和CD163等),以及它在病毒侵入宿主细胞时所表现的生物学功能,提出了PRRSV入侵猪肺泡巨噬细胞的一般途径。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒受体硫酸乙酰肝素唾液酸黏附素 CD163

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猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立

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中国人兽共患病学报 2011年第5期27卷 418-422页

作者：张奕强刘文倩刘永生王印姚学萍张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046 四川农业大学动物医学院动物检疫实验室雅安625014

目的观察猪链球菌(Streptococcus suis)感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变... 详细信息

目的观察猪链球菌(Streptococcus suis)感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变化。并对病死小鼠做病原分离,通过培养特性鉴定、生化试验以及PCR鉴定确定其为猪链球菌。结果小鼠确由感染猪链球菌而致死,体内各组织、器官均产生典型的败血症病变。结论小鼠对猪链球菌易感,能够作为实验室研究猪链球菌良好的实验动物。

关键词：猪链球菌 BALB/c小鼠模型病理变化

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C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性

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江苏农业科学 2011年第4期39卷 38-40页

作者：刘文倩王猛张奕强刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物生物技术中心四川雅安625014

利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Mod... 详细信息

利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Model 422 Electro-Eluter切胶回收目的蛋白,并进行Western-Blotting分析。结果得到50 ku左右目的条带,证实融合蛋白VP3大肠杆菌中得到以包涵体形式表达,且使用切胶回收后的蛋白能被C型口蹄疫阳性血清识别,具有良好的反应原性。

关键词： C型口蹄疫结构蛋白VP3 原核表达生物活性

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