检索结果-内蒙古大学图书馆

野生动物棘球绦虫感染检测方法的研究进展

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中国兽医科学 2012年第1期42卷 100-106页

作者：倪兴维闫鸿斌娄忠子贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

论述了棘球绦虫野生动物宿主的种类、分布与感染情况,介绍了剖检法、粪抗原-ELISA检测方法、分子生物学检测方法等棘球绦虫感染检测方法的研究进展,并提出了存在的问题及解决途径,为野生动物棘球绦虫(蚴)病的控制与诊断提供指导。

关键词：野生动物棘球绦虫流行病学检测方法

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羊痘野毒感染与弱毒免疫iELISA鉴别诊断方法的建立

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中国兽医科学 2013年第7期43卷 701-706页

作者：李慧霞朱学亮刘振勇窦永喜李辉骆学农才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET... 详细信息

为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET-95和pET-103,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析后,用纯化的两种重组蛋白进行iELISA方法研究。结果显示,ORF95和ORF103大小分别为483bp和570bp,重组菌经1mmol/L IPTG诱导5h后,分别在30ku和35ku处有高水平的融合表达,且均以包涵体形式存在。两种目的蛋白以10ng+20ng混合作为包被抗原时,该iELISA方法检测羊痘自然感染血清、弱毒疫苗免疫羊血清和阴性血清的D450nm有明显差异,且与口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒无交叉反应。因此,该方法能有效排除羊痘弱毒疫苗免疫造成的干扰,可特异性检测羊痘野毒感染的血清样品。

关键词：山羊痘病毒绵羊痘病毒 ORF95基因 ORF103基因间接酶联免疫吸附试验

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抗菌肽Shiva 1a基因真核表达载体的构建及序列分析

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中国畜牧兽医 2011年第12期38卷 96-100页

作者：宫晓炜郑福英蔺国珍曹小安王光华周继章才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-... 详细信息

为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-Shiva 1a重组表达质粒,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染将重组质粒转染到CHO-K1细胞,荧光显微镜观察其表达情况。通过生物信息学软件对抗菌肽Shiva 1a的二级结构和三级结构进行预测分析。其结果为进一步研究Shiva 1a的抗菌活性和在动物抗病育种方面的应用奠定了基础。

关键词：抗菌肽 Shiva 1a 真核表达序列分析

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旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因TsCystatin1的克隆及序列分析

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 569-574页

作者：姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的... 详细信息

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行了预测分析。结果表明,TsCystatin1 cDNA序列含有一个由666个核苷酸组成的开放阅读框架,编码由221个氨基酸残基组成的多肽,蛋白分子质量理论值为24.3ku,理论等电点为4.44。TsCystatin1第1～25位氨基酸残基为信号肽序列,具有半胱氨酸蛋白酶抑制剂的保守序列QVVAG,其C末端具有3处N-糖基化位点以及4个链内二硫键所需的半胱氨酸残基。该蛋白的二级结构中α螺旋占18.6%,β折叠占23.5%,其余57.9%为转角。结构域分析表明,该蛋白具有一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域,属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族2,与其他线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的同源性较高。

关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂克隆序列分析

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口疮病毒B4R锚蛋白抑制细胞NF-κB信号通路的研究

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中国兽医科学 2016年第11期46卷 1412-1417页

作者：冯园贾怀杰何小兵成温玉陈国华王春燕何玉林景志忠桂林医学院微生物学教研室广西桂林541000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

为明确口疮病毒(ORFV)编码的B4R蛋白调节细胞N F-κB活化的作用,以ORFV ORF008基因编码的B4R蛋白为研究对象,构建真核表达载体p CM V-Flag008,转染293T细胞,首先,利用双荧光素酶报告基因系统分析B4R蛋白对NF-κB信号活化的调节作用;其次... 详细信息

为明确口疮病毒(ORFV)编码的B4R蛋白调节细胞N F-κB活化的作用,以ORFV ORF008基因编码的B4R蛋白为研究对象,构建真核表达载体p CM V-Flag008,转染293T细胞,首先,利用双荧光素酶报告基因系统分析B4R蛋白对NF-κB信号活化的调节作用;其次,采用W estern-blot检测B4R蛋白对NF-κB信号通路中NF-κB p65蛋白核移位和IκBα蛋白磷酸化水平的影响。结果显示,B4R蛋白对NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性有明显的抑制作用(P<0.05);B4R蛋白能阻止IκBα蛋白磷酸化降解过程而抑制细胞NF-κB p65蛋白核移位。由此可见,ORFV编码的B4R蛋白能抑制细胞NF-κB信号通路的活化。

关键词：口疮病毒 NF-κB ORF008基因 B4R蛋白

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脉冲放电杀菌技术及其应用研究进展

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动物医学进展 2010年第7期31卷 95-98页

作者：周继章宫晓炜中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

脉冲放电杀菌技术是一种利用电压瞬间发生变化而对细菌产生不可逆损失,进而导致死亡的一种非热杀菌技术。论文综述了脉冲电场的杀菌机理、特点和杀菌效果以及其在国内外应用的研究进展,提出脉冲放电杀菌技术有望取代传统的化学试剂灭活... 详细信息

脉冲放电杀菌技术是一种利用电压瞬间发生变化而对细菌产生不可逆损失,进而导致死亡的一种非热杀菌技术。论文综述了脉冲电场的杀菌机理、特点和杀菌效果以及其在国内外应用的研究进展,提出脉冲放电杀菌技术有望取代传统的化学试剂灭活病原体方法,为动物传染病病原体的灭活和疫苗的制备带来革新。

关键词：脉冲电场病原体灭活

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白的研究进展与应用

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中国农学通报 2010年第23期26卷 1-6页

作者：王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)属于动脉炎病毒科的单股正义RNA病毒。病毒基因组共有15kb,编码RNA复制酶(ORF1a和ORF1b)、糖基化蛋白(GP2-GP5)、基膜蛋白M(ORF6)和核衣壳蛋白N(ORF7)。其中每一个PRRSV的结构蛋白在病毒的感染及免疫... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)属于动脉炎病毒科的单股正义RNA病毒。病毒基因组共有15kb,编码RNA复制酶(ORF1a和ORF1b)、糖基化蛋白(GP2-GP5)、基膜蛋白M(ORF6)和核衣壳蛋白N(ORF7)。其中每一个PRRSV的结构蛋白在病毒的感染及免疫原性等的作用均不相同。笔者对PRRSV结构蛋白最新的研究进展及应用进行综述。

关键词：糖基化蛋白免疫原性小结构蛋白异源二聚体

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稳定表达外源TLR9基因的山羊胎儿成纤维细胞系的建立

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中国兽医科学 2013年第6期43卷 605-611页

作者：刘太安房永祥贾怀杰马保华何小兵管齐赛陈国华曾爽姚文娟景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为提供制备抗病转基因山羊核供体细胞,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)对山羊抗病性能的影响,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从山羊外周血单核细胞中克隆了TLR9基因,并对其遗传进化关系及分子结构特征进行了分析,... 详细信息

为提供制备抗病转基因山羊核供体细胞,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)对山羊抗病性能的影响,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从山羊外周血单核细胞中克隆了TLR9基因,并对其遗传进化关系及分子结构特征进行了分析,发现克隆的基因具有Toll样受体家族的典型结构特征,其遗传进化关系与物种亲缘关系密切相关。将克隆的山羊TLR9基因亚克隆至pIRES2-EGFP真核表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选以及阳性细胞基因组PCR鉴定和荧光观察证实,外源TLR9基因确已稳定整合入转染阳性细胞克隆基因组中并获得表达。成功建立了稳定表达外源TLR9的山羊胎儿成纤维细胞系,为培育抗病转基因山羊奠定了基础。

关键词： TLR9基因转基因山羊山羊胎儿成纤维细胞稳定表达

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口蹄疫病毒的抗原结构学的研究进展

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中国预防兽医学报 2016年第3期38卷 253-256页

作者：刘亚丽丁耀忠马小元张杰张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5... 详细信息

口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）属于小RNA病毒科口蹄疫病毒属,完整的病毒粒子由衣壳包裹着单股正链RNA构成。FMDV基因组全长约为8.5 kb,主要分为5＇端非编码区、编码区、3＇端非编码区和多聚腺苷酸（poly（A））。5＇端非编码区的5端共价连接病毒自身编码的非结构蛋白（VPg）,而且还包含有S-片段、

关键词：口蹄疫病毒 FMDV 抗原结构非结构蛋白衣壳抗原位点正链病毒科病毒粒子编码区

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羊尤氏泰勒虫病的病理学观察

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畜牧兽医学报 2008年第11期39卷 1567-1574页

作者：李有全罗建勋关贵全马米玲高金亮刘志杰党志胜刘爱红任巧云刘军龙鲁炳义陈怀涛白启魏永红牛庆丽田占成殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心... 详细信息

对尤氏泰勒虫人工感染的绵羊进行了病理学观察。主要的组织病变:淋巴结充血、出血及淋巴窦网状内皮细胞增生;肺脏出血,间质淋巴细胞和网状细胞增生,肺泡隔增厚;肾小球内皮细胞、血管内皮细胞增生,淋巴网状细胞灶状积累,甚至形成结节;心肌细胞变性、坏死,染色不均;肠道固有膜明显充血、出血;肝细胞颗粒变性,有散在细胞坏死,汇管区和小叶间有淋巴网状细胞增生;瘤胃黏膜下层有散在性出血,肌层见灶状出血。

关键词：尤氏泰勒虫实验感染病理变化

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