检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第5期31卷 406-409页

作者：曲自刚付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所.家畜疫病病原生物学国家重点实验室.农业部兽医公共卫生重点开放实验室.甘肃省动物寄生虫病重点实验室.兰州730046

组织蛋白酶F(cathepsin F)是半胱氨酸蛋白酶家族木瓜蛋白酶亚家族的重要成员。寄生性蠕虫组织蛋白酶F可水解半胱氨酸蛋白酶特异性底物,降解血红蛋白等宿主蛋白作为营养物质,参与虫体入侵,且具有免疫反应性,可作为寄生虫病免疫诊断、疫... 详细信息

组织蛋白酶F(cathepsin F)是半胱氨酸蛋白酶家族木瓜蛋白酶亚家族的重要成员。寄生性蠕虫组织蛋白酶F可水解半胱氨酸蛋白酶特异性底物,降解血红蛋白等宿主蛋白作为营养物质,参与虫体入侵,且具有免疫反应性,可作为寄生虫病免疫诊断、疫苗研制和抗寄生虫药物筛选的潜在靶点,对寄生虫病防治具有重要意义。本文综述了组织蛋白酶F的结构特征、作用机制及寄生性蠕虫组织蛋白酶F的研究进展。

关键词：寄生性蠕虫组织蛋白酶F 酶活性免疫反应性

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旋毛虫组织蛋白酶B基因TsCB1的克隆与生物信息学分析

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中国兽医科学 2013年第7期43卷 661-667页

作者：谢志宙李文卉曲自刚刘静宜高小磊岳龙张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了研究旋毛虫组织蛋白酶B的功能,对GenBank中旋毛虫基因组数据库和EST数据库进行检索,获得旋毛虫组织蛋白酶B的cDNA序列并设计引物。以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后测序并进行生物信息学分析。... 详细信息

为了研究旋毛虫组织蛋白酶B的功能,对GenBank中旋毛虫基因组数据库和EST数据库进行检索,获得旋毛虫组织蛋白酶B的cDNA序列并设计引物。以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后测序并进行生物信息学分析。结果表明,成功克隆到旋毛虫组织蛋白酶B基因(TsCB1)的cDNA序列,TsCB1cDNA含有1个由1 449个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码482个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量理论值为55.1ku,理论等电点为7.66。TsCB1第1～35位氨基酸残基为信号肽序列,有2个潜在的N-糖基化位点,具有1个生长调节素B结构域和半胱氨酸蛋白酶结构域,半胱氨酸残基活性位点被丝氨酸残基所替换,同源性分析表明与其他线虫组织蛋白酶B的一致性在60%左右。

关键词：旋毛虫组织蛋白酶B 克隆生物信息学分析

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羊痘野毒感染与弱毒免疫iELISA鉴别诊断方法的建立

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中国兽医科学 2013年第7期43卷 701-706页

作者：李慧霞朱学亮刘振勇窦永喜李辉骆学农才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET... 详细信息

为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET-95和pET-103,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析后,用纯化的两种重组蛋白进行iELISA方法研究。结果显示,ORF95和ORF103大小分别为483bp和570bp,重组菌经1mmol/L IPTG诱导5h后,分别在30ku和35ku处有高水平的融合表达,且均以包涵体形式存在。两种目的蛋白以10ng+20ng混合作为包被抗原时,该iELISA方法检测羊痘自然感染血清、弱毒疫苗免疫羊血清和阴性血清的D450nm有明显差异,且与口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒无交叉反应。因此,该方法能有效排除羊痘弱毒疫苗免疫造成的干扰,可特异性检测羊痘野毒感染的血清样品。

关键词：山羊痘病毒绵羊痘病毒 ORF95基因 ORF103基因间接酶联免疫吸附试验

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羊衣原体的分离鉴定及PCR诊断方法的建立

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黑龙江畜牧兽医 2013年第12期 104-106页

作者：王光华叶成玉周继章陆艳马利青青海省畜牧兽医科学院西宁810016 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

为了研究青海省乌兰县牧户母羊流产的病因,试验采用临床症状观察、显微镜观察、鸡胚培养和PCR检测等方法对病原进行了鉴定,并建立衣原体PCR诊断方法对病原体进行了敏感性和稳定性检测。结果表明:引起母羊流产的病原为羊流产嗜性衣原体... 详细信息

为了研究青海省乌兰县牧户母羊流产的病因,试验采用临床症状观察、显微镜观察、鸡胚培养和PCR检测等方法对病原进行了鉴定,并建立衣原体PCR诊断方法对病原体进行了敏感性和稳定性检测。结果表明:引起母羊流产的病原为羊流产嗜性衣原体。说明建立的PCR方法能够对羊衣原体病原作出正确的检测,可用于羊衣原体病的实验室诊断。

关键词：羊衣原体病分离鉴定 MOMP基因

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青海牦牛BVDV E0基因的表达与抗原性检测

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中国兽医杂志 2013年第4期49卷 12-14页

作者：王光华叶成玉蔡其刚王戈平陆艳张芳芳马利青周继章青海省畜牧兽医科学院青海西宁810016 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

将青海牦牛病毒性腹泻病毒(BVDV)QHZK株的E0基因亚克隆入原核表达载体pET-32(α),构建了重组表达载体pET-32(α)-E0,然后用重组质粒转化Rosetta(DE3)感受态细胞,并利用IPTG诱导蛋白表达。表达的蛋白用His-Band镍柱进行亲合层析纯化,West... 详细信息

将青海牦牛病毒性腹泻病毒(BVDV)QHZK株的E0基因亚克隆入原核表达载体pET-32(α),构建了重组表达载体pET-32(α)-E0,然后用重组质粒转化Rosetta(DE3)感受态细胞,并利用IPTG诱导蛋白表达。表达的蛋白用His-Band镍柱进行亲合层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果显示,E0基因可在大肠杆菌中获得表达,表达产物的分子质量约为44ku,与预计的蛋白分子质量大小一致。Western-blot分析表明,该蛋白可以与BVDV标准阳性血清产生特异性结合反应,具有良好的抗原性,为BVDV亚单位疫苗的研究奠定了基础。

关键词： BVDV E0基因原核表达抗原性

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细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的研究进展

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中国兽医科学 2013年第11期43卷 1206-1210页

作者：刘全元闫鸿斌娄忠子李立史万贵刘聪暖殷宏贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球... 详细信息

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球蚴病分子流行病学调查和防治策略的制定提供理论依据和技术指导。

关键词：细粒棘球绦虫 G3基因型 cox1基因 nad1基因流行病学

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土壤中弓形虫半套式PCR检测方法的建立

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甘肃农业大学学报 2013年第5期48卷 19-23,31页

作者：孟鹏叶强王萌张德林赵晋军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

根据NCBI上公布的弓形虫RH株的529bp基因序列(登录号:AF146527)用Primer Premier 5.0设计3条特异性引物TX1、TX2和TX3,建立土壤中弓形虫的半套式PCR检测方法,并将引物TX1与TX3扩增产物克隆到pMD18-T载体上进行测序.结果表明:该方法能扩... 详细信息

根据NCBI上公布的弓形虫RH株的529bp基因序列(登录号:AF146527)用Primer Premier 5.0设计3条特异性引物TX1、TX2和TX3,建立土壤中弓形虫的半套式PCR检测方法,并将引物TX1与TX3扩增产物克隆到pMD18-T载体上进行测序.结果表明:该方法能扩增出约350bp的片段,TX1与TX3扩增片段约520bp,克隆到pMD18-T载体上的521bp片段与所选取的弓形虫RH株的目的基因序列相似性100%.该检测方法特异性强,以犬新孢子虫、牛微小隐孢子虫、牛巴贝斯虫、环形泰勒虫、牛链球菌、猪链球菌、蒙氏肠球菌基因组为模板均未扩增出条带;灵敏性高,检测极限为20fg弓形虫DNA;在22份土壤样品中检出3份阳性样品.

关键词：土壤弓形虫 529 bp基因序列半套式PCR

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幽门螺杆菌尿素酶B基因的克隆表达及活性测定

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中国兽医科学 2013年第3期43卷 283-288页

作者：蔡靓李克生杜惠芬付宝权李文卉曲自刚谢志宙甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃省医学科学研究院医学生物中心甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为研究幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B(UreB)的免疫学活性,采用PCR方法扩增Hp UreB基因,经双酶切构建表达载体pET28a-UreB,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经过IPTG诱导进行表达,用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA检测血清抗体效价,并... 详细信息

为研究幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B(UreB)的免疫学活性,采用PCR方法扩增Hp UreB基因,经双酶切构建表达载体pET28a-UreB,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经过IPTG诱导进行表达,用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blot鉴定。结果显示,扩增的Hp UreB基因序列与GenBank中的26 695标准株序列相比较核苷酸序列同源性达到96.73%,氨基酸序列同源性高达99.30%,SDS-PAGE分析发现表达的重组蛋白分子质量约为66ku,以可溶性形式存在。Western-blot结果显示重组UreB能被Hp感染患者血清特异性识别,同时,用纯化后的UreB蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,表明UreB具有很好的免疫原性。试验证明表达出具有生物活性的UreB蛋白,为Hp快速检测方法的研究奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位原核表达免疫原性

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寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第2期30卷 146-151页

作者：姚菊霞付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine protease inhibitor,CPI或cystatin)是半胱氨酸蛋白酶可逆性紧密结合的天然抑制剂。寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂不仅具有独特的半胱氨酸蛋白酶抑制活性,而且还可以调节宿主免疫反应,在寄生虫逃避宿... 详细信息

半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine protease inhibitor,CPI或cystatin)是半胱氨酸蛋白酶可逆性紧密结合的天然抑制剂。寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂不仅具有独特的半胱氨酸蛋白酶抑制活性,而且还可以调节宿主免疫反应,在寄生虫逃避宿主免疫应答,适应寄生生活中起着重要作用。本文综述了半胱氨酸蛋白酶抑制剂的基本类型、结构特征和作用机制,以及寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展。

关键词：寄生性线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂免疫调节

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牛病毒性腹泻病毒侵染细胞机制的研究进展

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畜牧兽医学报 2012年第4期43卷 503-508页

作者：宫晓炜郑福英蔺国珍曹小安王光华殷宏周继章才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是反刍动物和猪体内广泛存在的危害动物健康的重要病原体。BVDV感染牛后主要引起牛的持续性感染、免疫耐受、免疫抑制、繁殖障碍及急慢性黏膜病等临床症状,给养牛业造成重大的损失。其致病机理非常复杂,给该病的... 详细信息

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是反刍动物和猪体内广泛存在的危害动物健康的重要病原体。BVDV感染牛后主要引起牛的持续性感染、免疫耐受、免疫抑制、繁殖障碍及急慢性黏膜病等临床症状,给养牛业造成重大的损失。其致病机理非常复杂,给该病的治疗和根除带来极大的困难。随着分子病毒学研究的发展以及对猪瘟病毒和黄病毒科其他成员的研究,人们在BVDV分子水平和细胞水平的研究方面也取得了一些进展。就此,作者从BVDV入侵细胞、在细胞内的复制以及与宿主蛋白分子相互作用等方面进行综述,有助于阐明BVDV致病和在体内持续存活的机制,为该病的防治和疫苗研发提供新的思路和对策。

关键词：牛病毒性腹泻病毒病毒复制宿主细胞相互作用

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