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副猪嗜血杆菌是存在于健康猪上呼吸道的一种致病菌,也是格拉泽氏病的病原。副猪嗜血杆菌生物膜的形成与其致病力的变化和造成慢性感染有直接关系,研究副猪嗜血杆菌生物膜的形成及功能对阐明致病菌的慢性感染和抗生素的耐受性具有重要的科学意义。本文就副猪嗜血杆菌生物被膜的形成机制、影响因素、功能、及其研究方法进行综述。

关键词：副猪嗜血杆菌生物被膜形成机制功能

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猪圆环病Ⅱ型及鉴别诊断技术研究进展

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贵州农业科学 2009年第7期37卷 117-120页

作者：丁耀忠刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,该病毒有2个血清型:PCV1和PCV2。PCV1广泛存在于猪体内,无致病性;PCV2能直接或间接导致一系列猪的综合性疾病,如猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),... 详细信息

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,该病毒有2个血清型:PCV1和PCV2。PCV1广泛存在于猪体内,无致病性;PCV2能直接或间接导致一系列猪的综合性疾病,如猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),猪呼吸道疾病综合征(PRDC)和成年猪皮炎肾病综合征(PDNS)等,对养猪业危害严重。为了深入了解PCV2致病因素,建立快速鉴别诊断技术,综述了PCV2的猪圆环病毒病及其相关致病因素和目前应用诊断技术研究情况,为研究探讨PCV2的发生和诊断提供借鉴。

关键词：猪圆环病Ⅱ型诊断技术猪皮炎与肾炎综合征仔猪断奶综合症

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细胞传感器检测技术研究进展

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安徽农业科学 2010年第33期38卷 18673-18674,18677页

作者：杨双马军武中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了... 详细信息

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了细胞传感器在病原体和毒素检测中的最新研究进展,分别叙述了现有的各类细胞传感器的元件构成和作用原理,并展望了细胞传感器未来研究和应用方面的发展方向。

关键词：细胞传感器病原体毒素细胞受体细胞病变

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防御素临床应用现状的研究进展

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江苏农业科学 2009年第6期37卷 26-28页

防御素是广泛存在于动植物及人体内的一类不含糖链的碱性阳离子多肽,具有广谱抗菌活性。在杀灭细菌、对抗癌症、杀伤病毒、转基因工程及食品方面有重要作用。本文从防御素的结构、生物学活性、临床应用等方面进行综述,从而为临床医学提... 详细信息

防御素是广泛存在于动植物及人体内的一类不含糖链的碱性阳离子多肽,具有广谱抗菌活性。在杀灭细菌、对抗癌症、杀伤病毒、转基因工程及食品方面有重要作用。本文从防御素的结构、生物学活性、临床应用等方面进行综述,从而为临床医学提供参考。

关键词：防御素结构生物学活性临床应用

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口蹄疫新型疫苗的研究进展

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江苏农业科学 2010年第3期38卷 277-279页

作者：刘文倩刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各... 详细信息

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行,研制和生产口蹄疫疫苗是防治口蹄疫发生与流行暴发的有效措施之一。随着分子生物学、遗传学及免疫学等学科的迅猛发展,口蹄疫新型疫苗的研究也取得了较快的进展,各种基因工程疫苗如核酸疫苗、可饲疫苗、病毒载体疫苗、基因工程亚单位疫苗和抗原表位疫苗等不断涌现,为口蹄疫新型疫苗的研究与利用带来了新的希望。

关键词：口蹄疫新型疫苗研究进展

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猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达

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畜牧与兽医 2010年第12期42卷 67-72页

作者：娄忠子杨彬兰喜李学瑞李志勇殷相平李宝玉柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪,γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-γ中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表... 详细信息

通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪,γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-γ中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV。重组质粒转染BHK-21细胞后进行Zeocin^(TM)抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-γ在BHK-21细胞中的表达。结果显示,试验中筛选出1株Zeocin^(TM)抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN-γ均在该细胞中获得稳定高效表达,这将为猪圆环病毒病的防治提供新的方法。

关键词：猪圆环病毒病 cap 干扰素基因表达载体的构建 BHK-21细胞重组真核表达载体间接免疫荧光 Cap 双表达载体基因亚克隆核衣壳蛋白质粒转染阳性细胞抗性筛选克隆载体高效表达 PCR方法 Western 细胞系

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microRNA在免疫细胞中作用的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第5期31卷 704-707,712页

作者：张学勇骆学农郑亚东中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

microRNA(miRNA)是一种非编码性单链小分子RNA,广泛存在于生物中,可与靶基因mRNA的3'非编码区(3'-UTR)结合,再通过形成沉默复合体而调控靶基因的表达。miRNA参与多种生物学过程,与细胞增殖、分化、器官形成以及免疫应答过程等... 详细信息

microRNA(miRNA)是一种非编码性单链小分子RNA,广泛存在于生物中,可与靶基因mRNA的3'非编码区(3'-UTR)结合,再通过形成沉默复合体而调控靶基因的表达。miRNA参与多种生物学过程,与细胞增殖、分化、器官形成以及免疫应答过程等都息息相关。miRNA在各种免疫细胞的产生、增殖、发育以及免疫应答过程中,通过调节相关靶基因的表达发挥着重要的调控作用。本文综述了主要免疫细胞miRNA功能调控研究,横向比较突出miRNA的网络调控作用,有助于多角度理解免疫平衡和发现免疫应答新靶点,为相关免疫疾病的防治提供新思路。

关键词： miRNA 免疫细胞靶基因调控综述

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猪γ-干扰素的克隆表达及单抗的潜在应用

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生物技术通报 2010年第1期26卷 173-179页

作者：娄忠子兰喜李建强李学瑞李志勇殷相平柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后... 详细信息

以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后IPTG诱导表达,得到大小约为36.8kD的目的蛋白。将目的蛋白检测及纯化后免疫后BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,最终筛选出3株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞。ELISA叠加试验显示,3株单抗针对相同或邻近的PoIFN-γ抗原表位,制备的腹水中单抗间接ELISA效价为1×104。选取单抗IF-2株进行单抗的潜在应用研究,Westernblotting分析结果显示单抗IF-2株能与融合表达蛋白产生特异性反应,与pET-32a(+)标签蛋白无反应;间接免疫荧光检测(IFA)发现,在采用腺病毒表达系统表达PoIFN-γ的HEK-293细胞中散在大量特异性荧光。

关键词：猪γ-干扰素融合表达单克隆抗体潜在应用

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