检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2009年第11期36卷 1716-1722页

作者：陈启伟王永录张永光潘丽方玉珍蒋守田吕建亮周鹏张中旺张昱张淑刚杜进鑫李正丰王刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

以口蹄疫病毒株AF72RNA为模板，反转录并扩增目的基因，PCR纯化产物与pGEMT—Easy载体连接并转化JM109菌株，用凝胶电泳、PCR和SpeI／SphI双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72VP3的核苷酸序列，利用同源建模的... 详细信息

以口蹄疫病毒株AF72RNA为模板，反转录并扩增目的基因，PCR纯化产物与pGEMT—Easy载体连接并转化JM109菌株，用凝胶电泳、PCR和SpeI／SphI双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72VP3的核苷酸序列，利用同源建模的方法建立AF72VP3结构蛋白的3D结构，在此基础上，综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72VP3结构蛋白的B细胞抗原表位。分析表明，口蹄疫病毒VP1、VP2、VP3和VP4在核苷酸水平上的变异率是无差异的（P〉0．05）；而它们在氨基酸水平上的变异率差异显著（P〈0．05）。该毒株与20株源于GenBank中的VP3氨基酸序列比对发现其保守区主要位于第1～24、24～35、36～42、45～56、65～122、124～172、177～210、211～219位。AF72VP3结构蛋白三维空间结构可分为A、B和c3个结构区域，蛋白呈现较规则的空间构象，其中18～23、30～44、60～75、113～124、130～142、193～220氨基酸区段是AF72VP3结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域，该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供更有价值的参考信息。

关键词：口蹄疫病毒 VP3结构蛋白 3D结构 B细胞表位

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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建

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华北农学报 2009年第1期24卷 83-86页

作者：赵娜田宏吴锦艳满自萍尚佑军何生虎刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5... 详细信息

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF5转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF5;并成功构建了PRRSV LZH株ORF5基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因克隆杆状病毒表达

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整联蛋白αvβ3与口蹄疫病毒感染

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中国兽医杂志 2009年第9期45卷 46-48页

作者：赵建勇高闪电独军政伏小平常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一,其本质是糖蛋白、蛋白聚糖、脂类或糖脂,多数属于蛋白质。大多数病毒受体分布于细胞表面,病毒需要细胞受体的参与才能进入细胞并进行复制、转录、包装成病毒粒子。整联蛋白αvβ... 详细信息

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的主要因素之一,其本质是糖蛋白、蛋白聚糖、脂类或糖脂,多数属于蛋白质。大多数病毒受体分布于细胞表面,病毒需要细胞受体的参与才能进入细胞并进行复制、转录、包装成病毒粒子。整联蛋白αvβ3具有多种配体其主要包括:细胞间配体、[第一段]

关键词：病毒感染整联蛋白口蹄疫病毒受体细胞表面宿主特异性组织嗜性蛋白聚糖

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猪生殖与呼吸综合征病毒NX／ZhW／07株的分离鉴定及其ORF5、Nsp2基因特性分析

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中国兽医科学 2009年第6期39卷 498-502页

作者：满自萍田宏吴锦艳赵娜尚佑军杨春生何生虎刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

将2007年宁夏送检的疑似猪高热病病料处理后接种于Marc-145细胞,结果Marc-145细胞出现典型的细胞病变,应用猪生殖与呼吸综合征(PRRS)病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,将其命名为NX/ZhW/07。采用RT-PCR方法扩增该分离株的ORF5和... 详细信息

将2007年宁夏送检的疑似猪高热病病料处理后接种于Marc-145细胞,结果Marc-145细胞出现典型的细胞病变,应用猪生殖与呼吸综合征(PRRS)病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,将其命名为NX/ZhW/07。采用RT-PCR方法扩增该分离株的ORF5和Nsp2基因,并进行序列分析。结果表明,NX/ZhW/07株的ORF5基因与GXHP-5、Hainan-1、HUB1、Hunan-1、JIANGSU、Jiangxi-1、LN-5和SHH-5株的核苷酸序列的同源性分别为92%～94%,其中与CH-1a株的核苷酸序列的同源性最高,达99.2%。Nsp2基因序列分析显示,出现30个氨基酸的不连续缺失,与国内高热病分离株JXA1的缺失位置完全一致。由此推测NX/ZhW/07株属于PRRSV美洲型变异株。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 NX/Zhw/07株 ORF5基因 Nsp2基因序列分析

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复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌方法的建立及初步应用

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江西农业大学学报 2009年第1期31卷 13-17页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程逯忠新赵海燕中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立了APP、HPS复合PCR诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增APP的442 bp,和HPS的1 090 bp的特异性片段,并应用于临床检测... 详细信息

在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立了APP、HPS复合PCR诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增APP的442 bp,和HPS的1 090 bp的特异性片段,并应用于临床检测。该方法的建立对临床上进行这2种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌副猪嗜血杆菌复合PCR 应用

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宁夏地区猪生殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及其变异分析

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中国兽医科学 2009年第1期39卷 1-5页

作者：满自萍田宏吴锦艳赵娜尚佑军刘湘涛杨春生何生虎中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

参考GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）Jiangxi株和CH—la株的ORF5基N序列，设计并合成了1对引物，对宁夏回族自治区送检的18份PRRS阳性分离毒株进行RT—PCR扩增，获得约750bp的DNA片段，将其分别克隆入pMD18-T载体中，... 详细信息

参考GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）Jiangxi株和CH—la株的ORF5基N序列，设计并合成了1对引物，对宁夏回族自治区送检的18份PRRS阳性分离毒株进行RT—PCR扩增，获得约750bp的DNA片段，将其分别克隆入pMD18-T载体中，进行测序。应用DNAStar软件分析所测序列，并与ATCCVR-2332，BJ-4，RespPRRSMLV等毒株的ORF5序列进行比较，发现其核苷酸同源性为85．4％～89．0％，与CH—1a之间的核苷酸同源性为90．0％～98．2％，与欧洲代表株LV的核苷酸同源性为55．9％～56．6％。基因系统进化树分析表明，发生于宁夏回族自治区的PRRSV属于美洲型，与CH—1a遗传关系较近，归属同-基因亚型。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因变异分析

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从山羊中检测山羊支原体山羊肺炎亚种

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江苏农业学报 2009年第6期25卷 1442-1444页

作者：储岳峰赵萍高鹏程贺英郭晗逯忠新赵海燕中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasmacapricolumsub—***，Mccp）最早由MacOwan和Minette于1976年分离，是引起山羊传染性胸膜肺炎（Contagiouscap—rineplemopneumonia，CCPP）的病原体。CCPP是山羊的一种急性或慢性呼吸道传染病，以纤维素性胸膜怖炎为主要特征，被感染羊群无年龄和性别差异，发病率和死亡率都很高。该病的发生最早可追溯到1873年的阿尔及利亚，现广泛流行于非洲和亚洲养羊国家，危害极大，被世界动物卫牛组织（OIE）列入重要疾病名录。

关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种山羊传染性胸膜肺炎 PCR

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湖北省部分地区猪场副猪嗜血杆菌病的血清学调查