检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2008年第7期38卷 559-562页

作者：王建东卢曾军包慧芳曹轶梅郭建宏刘湘涛何生虎杨春生刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750001

从宁夏中卫AsiaⅠ型口蹄疫疫区的无临床症状羊采集的食道咽部分泌液（OPF）中扩增得到了4个口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因3′-端483bp（VP483）片段。核苷酸和氨基酸序列比较结果表明，从4份OPF中扩增出的VP1片段，在细胞受体结合位点处的... 详细信息

从宁夏中卫AsiaⅠ型口蹄疫疫区的无临床症状羊采集的食道咽部分泌液（OPF）中扩增得到了4个口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因3′-端483bp（VP483）片段。核苷酸和氨基酸序列比较结果表明，从4份OPF中扩增出的VP1片段，在细胞受体结合位点处的关键氨基酸与目前公布的FMDVAsiaⅠ型流行毒相比均发生了改变，由RGD变成RDD。4个扩增片段的核苷酸序列与AsiaⅠ／js／WX／05株相比，同源性为96．2％～98、3％，表明与AsiaI／JS／WX／05株高度同源。蛋白结构模拟结果显示，这种改变会导致G—H环柔性减弱，这可能是AsiaⅠ／JS／WX／05FMDV适应羊体，造成持续感染后发生的一种变异。

关键词： AsiaⅠ型口蹄疫病毒羊O/P液 VPl基因序列分析

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商品疫苗对FMDVO／YNGM／97株的免疫效果评价

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中国兽医科学 2008年第10期38卷 866-870页

作者：王占伟刘力宽陈笑娟余四九王永录方玉珍潘丽蒋守田张维德杜进鑫张淑刚张中旺李正丰张昱吕建亮甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定,并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究。结果显示,该流行毒株为O型口蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.0... 详细信息

利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定,并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究。结果显示,该流行毒株为O型口蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.05 mL。VP1基因序列的比较结果显示,O/YNGM/97株与国外FMDV参考毒株O/TAI/1/92的同源性为91.4%,与国内疫苗毒株OZ/93、OA/58和OY/80的同源性分别为79.2%、83.6%和78.9%。用商品疫苗OZ株、OY株口蹄疫O型灭活疫苗和牛羊口蹄疫O-Asia1型双价灭活疫苗免疫的小鼠均可产生较高的免疫抗体,并对流行毒株O/YNGM/97的攻击具有较好的保护性。说明,使用现有商品疫苗完全可以预防该毒株在我国的流行。

关键词：口蹄疫疫苗流行毒株免疫抗体 BALB/c小鼠

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三株O型口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

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中国兽医科学 2008年第9期38卷 747-752页

作者：宋帅林彤邵军军丛国正独军政常惠芸胡永浩中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

用抗O型口蹄疫病毒(FMDV)单克隆抗体杂交瘤细胞株(4A9、4C3、9F12)制备腹水并进行纯化,经ELISA检测,单抗4A9、4C3和9F12的腹水效价分别为1∶25600、1∶102400和1∶51200,SDS-PAGE分析显示,3株纯化单抗均以IgG重链和轻链为主,其分子质量... 详细信息

用抗O型口蹄疫病毒(FMDV)单克隆抗体杂交瘤细胞株(4A9、4C3、9F12)制备腹水并进行纯化,经ELISA检测,单抗4A9、4C3和9F12的腹水效价分别为1∶25600、1∶102400和1∶51200,SDS-PAGE分析显示,3株纯化单抗均以IgG重链和轻链为主,其分子质量分别约为45ku和25ku。单抗4A9、4C3和9F12的饱和度分别为1∶40、1∶40和1∶1000,叠加试验所得增值指数分别为0.27%、13.05%、13.34%,均小于50%。Western-blotting结果显示,3株单抗均可与O型FMDV结构蛋白VP1发生特异性反应。表明,此3株单抗均识别O型FMDV VP1蛋白上的同一个抗原位点,存在干扰现象。

关键词： O型口蹄疫病毒单克隆抗体抗原位点

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口蹄疫病毒P12A^＊3C基因转化饲草玉米高效表达载体的构建

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中国兽医科学 2008年第7期38卷 549-554页

作者：张素芝潘丽荣廷昭张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室甘肃兰州730046 四川农业大学玉米研究所作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室四川雅安625014

为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接。同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3′末端添加内质... 详细信息

为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接。同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3′末端添加内质网引导肽序列等措施提高免疫原基因的表达。结果显示,高效植物表达载体pC1300P12A*3C构建正确,可以用于后续的饲草玉米可饲口蹄疫疫苗的研究。

关键词：口蹄疫病毒饲草玉米可饲疫苗高效表达载体

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O型口蹄疫病毒P1-2A3C基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

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蚕业科学 2008年第1期34卷 148-153页

作者：张韵易咏竹李志勇张志芳柳纪省甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 中国农业科学院蚕业研究所江苏镇江212018

口蹄疫是一种严重危害畜牧业生产的烈性传染病。为了促进O型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活载体疫苗的研制,选取O型FMDV编码序列中的衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因,插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组载体pVL-P1-2A3C,并... 详细信息

口蹄疫是一种严重危害畜牧业生产的烈性传染病。为了促进O型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活载体疫苗的研制,选取O型FMDV编码序列中的衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因,插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组载体pVL-P1-2A3C,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒Bm-P1-2A3C。将重组病毒感染家蚕5龄幼虫,以双抗体夹心ELISA法和间接血凝方法检测血淋巴中的表达产物:目的蛋白在感染病毒后120 h的蚕血淋巴中表达量最高,抗原表达呈阳性的最大稀释倍数为1∶128。结果显示O型FMDV的P1-2A3C基因已在家蚕体内获得表达。

关键词： O型口蹄疫病毒基因工程疫苗 P1-2A3C基因家蚕杆状病毒表达系统

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口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的可溶性表达与反应原性的鉴定

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农业生物技术学报 2008年第1期16卷 15-19页

作者：祝秀梅卢曾军胡永浩曹轶梅马江涛刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

设计特异性引物扩增得到完整的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3AB基因,定向克隆到表达载体pET-30a中,获得了重组质粒pET-3AB,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),重组菌分别在37℃和28℃条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电... 详细信息

设计特异性引物扩增得到完整的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3AB基因,定向克隆到表达载体pET-30a中,获得了重组质粒pET-3AB,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),重组菌分别在37℃和28℃条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,观察到37℃培养条件下目的蛋白形成包涵体,在28℃条件下培养目的蛋白以可溶性的形式表达。Western blot分析表明,表达的目的蛋白能与FMDV感染牛血清发生特异性反应。以纯化的3AB蛋白作为抗原,采用间接ELISA模式检测了部分FMDV感染动物血清和健康动物血清,证明表达蛋白与FMDV感染血清有很好的反应而与健康动物血清无反应。

关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白3AB ELISA

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口蹄疫病毒3C蛋白酶结构及其功能在抗病毒药物中的探讨

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中国生物工程杂志 2008年第S1期28卷 247-250页

作者：刘萍丛国正常惠芸刘学荣牟克斌黄银君卫广森中农威特生物科技股份有限公司兰州7300462 中国农业科学院兰州兽医研究所家禽疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

3C蛋白酶在口蹄疫病毒复制过程中起重要作用,尤其是对多聚蛋白的裂解作用。研究其结构、裂解机制以及切割方式,能更好的了解其在病毒复制中的作用和生物学功能。对阐明口蹄疫病毒3C蛋白酶基于其结构而进行的药物设计有重要现实意义。

关键词：口蹄疫病毒 3C蛋白酶结构和功能裂解机制抗病毒药物

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羊痘病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

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江西农业大学学报 2008年第5期30卷 860-864页

作者：吴国华张强颜新敏李健朱海霞邵长春邬向东中国农业科学院兰州兽医研究所／家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 江西农业大学动物科学技术学院江西南昌330045

用纯化的山羊痘病毒分别免疫家兔和豚鼠,制备高效价的抗血清。经方阵滴定测定捕获抗体、检测抗体、酶结合物和标准抗原的稀释倍数。通过对阴性样品的检测,确定阴阳性的判定标准,初步建立羊痘病毒间接夹心ELISA诊断方法。用建立的ELISA... 详细信息

用纯化的山羊痘病毒分别免疫家兔和豚鼠,制备高效价的抗血清。经方阵滴定测定捕获抗体、检测抗体、酶结合物和标准抗原的稀释倍数。通过对阴性样品的检测,确定阴阳性的判定标准,初步建立羊痘病毒间接夹心ELISA诊断方法。用建立的ELISA方法对31份已知背景样品进行检测,总符合率为93.5%。经特异性试验、批内重复试验和对比试验,说明建立的夹心ELISA诊断方法具有良好的特异性、重复性和敏感性。对田间样品的检测表明,该ELISA诊断方法可应用于对羊痘的鉴别诊断。

关键词：羊痘病毒夹心ELISA 诊断

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口蹄疫病毒株AF72 VP1的结构构建与B细胞表位预测

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生物技术通报 2008年第6期24卷 158-163页

作者：张昱王永录张永光潘丽方玉珍刘力宽蒋守田吕建亮张中旺张淑刚李正丰杜进鑫中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和EcoRⅠ酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72 VP1的核苷酸序列,利用同源建模的方法建立A... 详细信息

以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和EcoRⅠ酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72 VP1的核苷酸序列,利用同源建模的方法建立AF72 VP1结构蛋白的3D结构,在此基础上,综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72 VP1结构蛋白的B细胞抗原表位。结果显示,VP1结构蛋白呈现较规则的空间构象,其中5-11、24-30、43-47、82-87、132-147和196-203氨基酸区段是AF72 VP1结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供很有价值的参考信息。

关键词：口蹄疫病毒 VP1结构蛋白 3D结构 B细胞表位

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猪传染性胸膜肺炎诊断方法的研究进展

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中国畜禽种业 2008年第15期4卷 71-74页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程逯忠新赵海燕中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室 730046

猪传染性胸膜肺炎是猪呼吸道一种严重疾病,对养猪业造成了巨大的损失,本文综述了诊断方法的研究进展,旨在为预防和控制本病的流行奠定基础。

关键词：猪传染性胸膜肺炎症状诊断方法临床研究

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