检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农学通报 2009年第9期25卷 6-10页

作者：丁耀忠张杰马丽娜陈豪泰马艳平刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

口蹄疫包括七个主要的血清型,被国际兽疫局(OIE)定为一类传染病,中国农业部也将其列为一类传染病。因为近年频繁爆发,严重威胁到畜禽生产和人类自身生存安全,同时由于亚型多、抗原变异性强、宿主范围广等原因,其生态学和公共卫生学意义... 详细信息

口蹄疫包括七个主要的血清型,被国际兽疫局(OIE)定为一类传染病,中国农业部也将其列为一类传染病。因为近年频繁爆发,严重威胁到畜禽生产和人类自身生存安全,同时由于亚型多、抗原变异性强、宿主范围广等原因,其生态学和公共卫生学意义有极其重要的作用,通过对口蹄疫的感染机制和各种诊断与防制措施进行概述,从而阐述目前口蹄疫的诊断技术进展状况和进展。

关键词：口蹄疫检测技术生物传感器基因芯片

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核糖开关的研究与应用

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中国农学通报 2009年第23期25卷 38-40页

作者：王猛马艳萍刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

核糖开关被定义为一类位于mRNA3'-或5'-UTR上的能够结合小分子代谢物以调控基因的转录和翻译的mRNA顺时作用元件。这个来源于RNA世界的分子化石已经引起了越来越多的人的关注,文章就核糖开关的作用机理及其应用做一综述。

关键词：核糖开关小分子代谢物调控

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病毒受体及其研究现状

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动物医学进展 2009年第7期30卷 95-100页

作者：赵清李冬中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

受体在宿主细胞与病毒的相互作用中起着极其重要的作用。病毒受体的特性与病毒的宿主范围、组织嗜性有密切关系,是病毒致病性的主要因素之一。病毒受体的研究方法有经典的研究方法,也有现代分子生物学方法。在病毒受体的研究中,通常以... 详细信息

受体在宿主细胞与病毒的相互作用中起着极其重要的作用。病毒受体的特性与病毒的宿主范围、组织嗜性有密切关系,是病毒致病性的主要因素之一。病毒受体的研究方法有经典的研究方法,也有现代分子生物学方法。在病毒受体的研究中,通常以分离纯化的细胞膜代替活体细胞来研究病毒受体。通过对病毒与细胞受体相互作用的深入研究,人们已经发现很多受体阻断剂例如植物凝集素和肝素等物质可以阻断病毒与受体的结合,从而为病毒病的防控提供繁殖一些有效的新方法。

关键词：病毒受体阻断剂

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用口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别感染动物与疫苗免疫接种动物

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动物医学进展 2009年第10期30卷 101-104页

作者：吉艳红刘艳红中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的发生于偶蹄类动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行。疫苗接种是防控口蹄疫暴发的有效措施之一,而要控制口蹄疫的流行,首先要将病毒感染动物从疫苗接种群体中区分开来。以口蹄疫病毒非结... 详细信息

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的发生于偶蹄类动物的一种急性、热性传染病,曾多次在世界上发生过大流行。疫苗接种是防控口蹄疫暴发的有效措施之一,而要控制口蹄疫的流行,首先要将病毒感染动物从疫苗接种群体中区分开来。以口蹄疫病毒非结构蛋白(NSPs)为抗原,分别利用口蹄疫病毒非结构蛋白2C、3B、3AB和3ABC作为鉴别诊断抗原,检测动物体内的NSPs抗体,可有效的区分感染动物与疫苗免疫接种动物。目前,许多实验室已展开此项工作的研究,这为防控口蹄疫打下了良好的基础。

关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别诊断

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异构系统中检测蛋白质相互作用方法的原理及应用

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中国农学通报 2009年第22期25卷 71-74页

作者：刘文倩马艳平刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

基因组测序的完成并没有真正解释出细胞生命活动的本质。科学家们逐渐发现所有细胞功能都涉及蛋白质相互作用,许多疾病的发病也是由于蛋白质相互作用的改变,因此研究蛋白质相互作用具有重要的意义,也成为蛋白质组学研究的重点。目前已... 详细信息

基因组测序的完成并没有真正解释出细胞生命活动的本质。科学家们逐渐发现所有细胞功能都涉及蛋白质相互作用,许多疾病的发病也是由于蛋白质相互作用的改变,因此研究蛋白质相互作用具有重要的意义,也成为蛋白质组学研究的重点。目前已有许多实用且成熟的技术应用于蛋白质相互作用的检测。异构系统中检测蛋白质相互作用的方法包括细菌、酵母、哺乳动物细胞的双杂交系统和免疫共沉淀技术。文章将对这些技术的原理及应用作以综述。

关键词：异构系统蛋白质相互作用方法

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猪繁殖与呼吸综合症GP5蛋白的纯化与免疫活性分析

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安徽农业科学 2009年第21期37卷 9982-9983,9994页

作者：陈妍田宏尹双辉尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

[目的]对猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)的GPS蛋白进行纯化与免疫活性分析,为建立相应的血清学诊断方法奠定基础。[方法]用构建好的重组表达质粒pGEX-6P-5转化BL21后经IPTG诱导表达。对表达产物进行可溶性分析,再将重组目的蛋白纯化后进行SDS... 详细信息

[目的]对猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)的GPS蛋白进行纯化与免疫活性分析,为建立相应的血清学诊断方法奠定基础。[方法]用构建好的重组表达质粒pGEX-6P-5转化BL21后经IPTG诱导表达。对表达产物进行可溶性分析,再将重组目的蛋白纯化后进行SDS-PAGE鉴定和Western-blot分析,最后用重组抗原进行豚鼠免疫试验。[结果]经层析扫描分析目的蛋白含量占菌体蛋白总量30%左右,纯化后目的蛋白纯度可达80%。经Western-blot及豚鼠免疫试验对纯化蛋白进行分析后证明,表达的蛋白具有良好的反应原性和免疫原性。[结论]该研究为深入研究PRRSVORFs基因及其编码蛋白功能提供了材料,同时也为生产猪繁殖与呼吸综合症病毒基因工程产品奠定了良好基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 表达纯化免疫实验

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生物传感器在动物医学中应用的研究进展及展望

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黑龙江畜牧兽医 2009年第1期 20-22页

作者：马艳平丁耀忠金雷冯小明张继乐张杰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

生物传感器因其具有灵敏、特异、快速、准确和经济实用等特点,在工业、农业、环境监测及生物医学等领域中相继得到了开发和应用。在动物医学领域,生物传感器发挥的作用越来越大。生物传感技术为动物基础医学研究及临床诊断提供了一种快... 详细信息

生物传感器因其具有灵敏、特异、快速、准确和经济实用等特点,在工业、农业、环境监测及生物医学等领域中相继得到了开发和应用。在动物医学领域,生物传感器发挥的作用越来越大。生物传感技术为动物基础医学研究及临床诊断提供了一种快速、简便的新型方法。文章详细地综述了生物传感器的原理及在动物医学中的应用,并对生物传感器的发展前景进行了展望。

关键词：生物传感器动物医学应用

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猪生殖与呼吸综合征病毒宁夏分离株ORF5基因的克隆表达及其表达产物的活性分析

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中国兽医科学 2009年第9期39卷 774-778页

作者：陈妍田宏尹双辉尚佑军孙靖刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 吉林大学吉林长春130062

参考已发表的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因序列,设计合成了1对覆盖完整ORF5基因区段的引物,克隆了PRRSV NX/HY株的ORF5基因(登录号为EU600287),并进行了序列比较。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建了融合表达质粒p... 详细信息

参考已发表的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因序列,设计合成了1对覆盖完整ORF5基因区段的引物,克隆了PRRSV NX/HY株的ORF5基因(登录号为EU600287),并进行了序列比较。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建了融合表达质粒pGEX-6P-1-5并转化BL21,对表达蛋白进行Western-blot分析。结果表明,NX/HY分离株ORF5基因与PRRSV JX1、CH-1a株的核苷酸序列同源性分别为99.2%和95.2%,推导的氨基酸序列的同源性分别为98.5%和92.5%;层析扫描分析显示,目的蛋白的含量约占菌体总蛋白的30%,且具有良好的反应原性。GP5蛋白的表达为建立相应的血清学诊断方法奠定了基础。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白原核表达

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颗粒溶素和穿孔素真核共表达及其对A549细胞的影响

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中国生物工程杂志 2009年第10期29卷 12-17页

作者：王晚霞兰喜徐向红居军柳纪省甘肃省人民医院临床检验中心兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730070

目的:克隆人颗粒溶素和穿孔素基因并构建真核表达载体pGNLY-2A-PFP,观察其在人肺癌A549细胞中的表达情况。方法:体外分离培养外周血单个核细胞并抽提总RNA,RT-PCR扩增人颗粒溶素和穿孔素的基因片段,并将其分别插入pMD18-T进行测序,鉴定... 详细信息

目的:克隆人颗粒溶素和穿孔素基因并构建真核表达载体pGNLY-2A-PFP,观察其在人肺癌A549细胞中的表达情况。方法:体外分离培养外周血单个核细胞并抽提总RNA,RT-PCR扩增人颗粒溶素和穿孔素的基因片段,并将其分别插入pMD18-T进行测序,鉴定正确后构建pIRES-GNLY、pIRES-PFP及pGNLY-2A-PFP并转染人肺癌A549细胞,RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白表达,流式细胞Annexin V/PI检测转染后细胞凋亡情况。结果:成功获取了人颗粒溶素和穿孔素cDNA,构建了真核表达载体pIRES-GNLY、pIRES-PFP、pGNLY-2A-PFP,转染A549细胞后检测出了目的蛋白的表达,pGNLY-2A-PFP转染组细胞死亡率高于其他对照组(P<0.05),死亡细胞以凋亡为主。结论:人颗粒溶素和穿孔素基因可以在人肺癌A549细胞中表达,二者共表达能够促进细胞凋亡,这将有助于颗粒溶素和穿孔素在肿瘤治疗中应用的后续研究。

关键词：颗粒溶素穿孔素人肺癌A549细胞 FMDV2A

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C型口蹄疫病毒型特异性抗原的表达与鉴定

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安徽农业科学 2009年第35期37卷 17520-17522页

作者：高闪电独军政常惠芸丛国正邵军军林彤宋帅谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

[目的]为C型FMDV型特异性多克隆抗体、单克隆抗体的制备及FMDV定型提供理论依据。[方法]以含有C型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白基因VP1的重组质粒pGEM-CP1为模板,设计特异性表达引物,扩增VP1及其C端编码区。对C型口蹄疫病毒VP1及其C端进行... 详细信息

[目的]为C型FMDV型特异性多克隆抗体、单克隆抗体的制备及FMDV定型提供理论依据。[方法]以含有C型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白基因VP1的重组质粒pGEM-CP1为模板,设计特异性表达引物,扩增VP1及其C端编码区。对C型口蹄疫病毒VP1及其C端进行原核表达,并测定反应原性。利用纯化的C型VP1及其C端融合蛋白建立间接ELISA,分别对O、A、C、Asia 1 4型豚鼠阳性血清进行检测,确定C型VP1及其C端与其他3型FMDV抗体的型间交叉反应性。[结果]构建了pPRO-CVP1、pPRO-CVP1c重组原核表达质粒,实现了C型口蹄疫病毒VP1及其C端的高效表达,目的蛋白的分子量大小分别为33和20 kD。Western blot显示,VP1及其C端融合蛋白均可与对应血清型的豚鼠阳性血清反应。C型VP1及其C端与其他血清型的FMDV阳性血清均未发生交叉反应,且以VP1C端的型特异性最好。[结论]获得了C型FMDV特异性抗原。

关键词： C型口蹄疫病毒血清学交叉反应血清分型

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