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羊痘病毒免疫学研究进展

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动物医学进展 2009年第12期30卷 67-70页

作者：颜新敏张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

羊痘病毒是在细胞浆中复制的DNA病毒,能引起羊和牛的皮肤病变。病毒编码一系列免疫调节基因和引起宿主细胞凋亡的基因来逃避宿主先天和后天的免疫反应。病毒感染机体后,主要引起宿主的细胞免疫。羊痘病毒能增强机体对其他免疫原的免疫... 详细信息

羊痘病毒是在细胞浆中复制的DNA病毒,能引起羊和牛的皮肤病变。病毒编码一系列免疫调节基因和引起宿主细胞凋亡的基因来逃避宿主先天和后天的免疫反应。病毒感染机体后,主要引起宿主的细胞免疫。羊痘病毒能增强机体对其他免疫原的免疫反应。

关键词：羊痘病毒免疫调节细胞凋亡细胞免疫

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猪繁殖与呼吸障碍综合征检测技术的研究进展

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中国农学通报 2009年第20期25卷 12-15页

作者：马艳平张杰马丽娜陈豪泰丁耀忠刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是以母猪繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的猪病毒性传染病。其发生与流行给养猪业造成巨大的经济损失,现已成为危害养猪业较严重的病毒性疾病之一。及时、准确地检测出该病以便采取相应... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是以母猪繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的猪病毒性传染病。其发生与流行给养猪业造成巨大的经济损失,现已成为危害养猪业较严重的病毒性疾病之一。及时、准确地检测出该病以便采取相应的措施,是成功防制该病的关键。此文就从血清学、病原学、分子生物学等方面阐明了猪繁殖与呼吸障碍综合征的检测技术,从而为兽医临床诊断与治疗提供参考。

关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病原学血清学分子生物学

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DNA干扰研究进展

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动物医学进展 2009年第1期30卷 71-75页

作者：陈启伟王永录中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

DNA干扰(DNAi)即含有与体内某一基因的cDNA相同序列的DNA链,在没有启动子诱发其表达的情况下导致细胞内序列特异的基因表达被抑制。DNA干扰可参与真核生物的抗病毒侵染,阻断转座子的异常活动,调控基因表达等。随着RNA干扰技术缺陷的暴... 详细信息

DNA干扰(DNAi)即含有与体内某一基因的cDNA相同序列的DNA链,在没有启动子诱发其表达的情况下导致细胞内序列特异的基因表达被抑制。DNA干扰可参与真核生物的抗病毒侵染,阻断转座子的异常活动,调控基因表达等。随着RNA干扰技术缺陷的暴露以及人们对多种同源基因依赖性基因沉默的深入了解,DNAi有望成为最有潜力的基因干预治疗方法,并将在抵抗人类重大疾病和基因治疗方面发挥重要作用。

关键词： DNA干扰基因沉默基因阻滞

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不同类型消毒剂对口蹄疫病毒杀灭效果的试验

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畜牧与兽医 2009年第4期41卷 107-108页

作者：朱海霞张强李健颜新敏吴国华中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

1口蹄疫乳鼠组织毒的制备及稀释取本实验室保存新复壮的O型口蹄疫强毒(OPMF14,LD50=10-8·0),研磨制成1∶10的病毒悬液,加双抗置4℃浸毒24 h,3 000 r/m in离心10 m in,取上清液,用PBS做1∶500倍稀释,备用。2试验动物4日龄小白鼠由... 详细信息

1口蹄疫乳鼠组织毒的制备及稀释取本实验室保存新复壮的O型口蹄疫强毒(OPMF14,LD50=10-8·0),研磨制成1∶10的病毒悬液,加双抗置4℃浸毒24 h,3 000 r/m in离心10 m in,取上清液,用PBS做1∶500倍稀释,备用。2试验动物4日龄小白鼠由兰州兽医研究所动物场提供。3消毒剂毒性试验用去离子水将每种消毒剂分别做1∶50、1∶100、1∶200、1∶300和1∶400等不同倍数稀释,每个稀释度背部皮下注射4日龄乳鼠,每只乳鼠注射0·2 mL消毒剂稀释液,每组5只。并设阴性对照组(注射0·2 mL去离子水)和空白对照组各5只。在同一条件下观察72 h,重复试验1次。判定标准:阴性对照和空白对照组乳鼠全部健活,试验组乳鼠不死亡且接种部位无炎症或坏死等不良反应,判为该稀释度下消毒剂对试验动物安全。结果见表1。表1消毒剂毒性试验结果等消毒剂的开发和应用,在老药新用及药物协同消毒研究等方面有了较大的进展,但在实际应用中各具特色。含氯消毒剂因具有广谱、高效、低毒等特点,在兽医及生产实践中应用较广,其作用效果往往与有效氯含量有关,一般规律是浓度愈高效果愈好,但因剂型和主要成分的组成不同,对口蹄...

关键词：口蹄疫病毒杀灭效果消毒剂试验类型实验室上清液 PBS

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免疫细胞和细胞因子在口蹄疫免疫应答中的作用

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中国人兽共患病学报 2009年第10期25卷 1017-1020页

作者：杜进鑫王永录中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

口蹄疫是由小RNA病毒科口蹄疫病毒属的口蹄疫病毒(FMDV)引起的急性、热性、高度接触性的传染病。已有一百多年的历史,至今尚未在全球范围得到消灭。[第一段]

关键词：口蹄疫病毒免疫应答细胞因子免疫细胞小RNA病毒科传染病接触性

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口蹄疫病毒株AF72 VP2的结构模拟与分析

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华北农学报 2009年第4期24卷 64-69页

作者：陈启伟王永录张永光潘丽方玉珍刘力宽蒋守田吕建亮周鹏张中旺张昱张淑刚杜进鑫李正丰王刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了分析FMDV AF72VP2蛋白结构和功能的关系。以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-Teasy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和SpeⅠ、SphⅠ双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结... 详细信息

为了分析FMDV AF72VP2蛋白结构和功能的关系。以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-Teasy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和SpeⅠ、SphⅠ双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72 VP2的核苷酸序列,利用同源建模的方法建立AF72 VP2结构蛋白的3D结构,在此基础上,综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72 VP2结构蛋白的B细胞抗原表位。分析表明,口蹄疫病毒VP1,VP2,VP3和VP4在核苷酸水平上的变异率是无差异的（P〉0.05）;而他们在氨基酸水平上的变异率差异显著（P〈0.05）。该毒株与20株源于GenBank中的VP2氨基酸序列比对发现其保守区主要位于第1-23、37-51、66-76、85-101、124-142、165-199、205-219位。保守区氨基酸残基在维持VP2蛋白的空间构象和功能方面具有重要作用,其中1-10、129-140、165-176氨基酸区段是AF72 VP2结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供更有价值的参考信息。

关键词：口蹄疫病毒 VP2结构蛋白 3D结构 B细胞表位

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PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建

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中国兽医科学 2009年第3期39卷 189-195页

作者：赵娜田宏吴锦艳祁燕蓉满自萍尚佑军何生虎刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）中国代表株CH-1a的基因组序列，设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物，利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株（Lanzhou株）的ORF3和ORF5基因，并对其进行序列测定，同时与已发表的1... 详细信息

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）中国代表株CH-1a的基因组序列，设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物，利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株（Lanzhou株）的ORF3和ORF5基因，并对其进行序列测定，同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV Lanzhou株ORF3、ORF5基因分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBacHTA上，将经酶切及测序鉴定的阳性重组质粒pFastBacHTA-ORF3、pFastBacHTA-ORF5分别转化到DH10Bac感受态细胞。结果显示，ORF3、ORF5基因长度分别为765bp、603bp，发现核苷酸的同源性分别为88.0％—99.2％、87.3％—99.0％，获得了重组转座子rBacmid-ORF3、rBacmid-ORF5。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 ORF3基因 ORF5基因克隆杆状病毒表达载体

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口蹄疫病毒株AF72 VP3的结构模拟与分析

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微生物学通报 2009年第11期36卷 1716-1722页

作者：陈启伟王永录张永光潘丽方玉珍蒋守田吕建亮周鹏张中旺张昱张淑刚杜进鑫李正丰王刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

以口蹄疫病毒株AF72RNA为模板，反转录并扩增目的基因，PCR纯化产物与pGEMT—Easy载体连接并转化JM109菌株，用凝胶电泳、PCR和SpeI／SphI双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72VP3的核苷酸序列，利用同源建模的... 详细信息

以口蹄疫病毒株AF72RNA为模板，反转录并扩增目的基因，PCR纯化产物与pGEMT—Easy载体连接并转化JM109菌株，用凝胶电泳、PCR和SpeI／SphI双酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72VP3的核苷酸序列，利用同源建模的方法建立AF72VP3结构蛋白的3D结构，在此基础上，综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72VP3结构蛋白的B细胞抗原表位。分析表明，口蹄疫病毒VP1、VP2、VP3和VP4在核苷酸水平上的变异率是无差异的（P〉0．05）；而它们在氨基酸水平上的变异率差异显著（P〈0．05）。该毒株与20株源于GenBank中的VP3氨基酸序列比对发现其保守区主要位于第1～24、24～35、36～42、45～56、65～122、124～172、177～210、211～219位。AF72VP3结构蛋白三维空间结构可分为A、B和c3个结构区域，蛋白呈现较规则的空间构象，其中18～23、30～44、60～75、113～124、130～142、193～220氨基酸区段是AF72VP3结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域，该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供更有价值的参考信息。

关键词：口蹄疫病毒 VP3结构蛋白 3D结构 B细胞表位

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基因工程抗体研究进展

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生物技术通报 2009年第10期25卷 40-44页

作者：李菁林彤宋帅高闪电邵军军丛国政独军政常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,... 详细信息

随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少无关结构,从而可克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。

关键词：基因工程抗体人源化抗体小分子抗体核糖体展示

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β-防御素研究进展

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安徽农业科学 2009年第8期37卷 3561-3563页

作者：王猛马艳平刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

β-防御素在黏膜上皮细胞广泛表达,在先天免疫系统中扮演重要角色。因具有独特的抗菌机制和广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性。极难产生抗药性而日益受到人们的关注。就β-防御素的分子特征、生物学活性、抗菌机理、基因重组表达,目前科... 详细信息

β-防御素在黏膜上皮细胞广泛表达,在先天免疫系统中扮演重要角色。因具有独特的抗菌机制和广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性。极难产生抗药性而日益受到人们的关注。就β-防御素的分子特征、生物学活性、抗菌机理、基因重组表达,目前科研中存在的问题及其应用前景做了综述,为临床医学提供参考。

关键词： β-防御素生物学活性抗菌机理重组表达应用

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