检索结果-内蒙古大学图书馆

甘肃农业大学学报 2007年第5期42卷 5-8页

作者：张强马维民吴国华颜新敏李健朱海霞朱彩珠吴润刘湘涛才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

将山羊痘病毒结构蛋白P32基因从重组质粒pMD-P32中亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,用构建的重组表达质粒pGEX-P32转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导表达,细菌裂解物经SDS-PAGE检测到分子量约为58 ku的目的蛋白,与预... 详细信息

将山羊痘病毒结构蛋白P32基因从重组质粒pMD-P32中亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,用构建的重组表达质粒pGEX-P32转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导表达,细菌裂解物经SDS-PAGE检测到分子量约为58 ku的目的蛋白,与预期的产物大小一致.Western-blotting表明该重组蛋白可被山羊痘阳性血清所识别.

关键词：羊痘病毒 P32基因原核表达

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狂犬病病毒CVS株G基因和IFN-α基因的克隆及双基因真核表达载体的构建

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动物医学进展 2007年第9期28卷 11-14页

作者：李江涛殷相平柳纪省李宝玉李学瑞杨彬兰喜胡永浩中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

从狂犬病病毒CVS毒株致死的小鼠脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得G基因;以pMD18-T-α质粒为模板,PCR扩增得到IFN-α基因。两个基因和pIRES真核表达载体分别双酶切,连接构建p IRES-G/IFN-α,经PCR、双酶切鉴定和测序证明载体构建成功。... 详细信息

从狂犬病病毒CVS毒株致死的小鼠脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得G基因;以pMD18-T-α质粒为模板,PCR扩增得到IFN-α基因。两个基因和pIRES真核表达载体分别双酶切,连接构建p IRES-G/IFN-α,经PCR、双酶切鉴定和测序证明载体构建成功。测得的G基因序列长1 575 bp,与CVS株G基因氨基酸同源性为98.5%;IFN-α序列长为570 bp,与GenBank中登录号为NM 001017411的IFN-α基因氨基酸同源性为91.6%。

关键词：狂犬病痛毒CVS毒株 G基因 α干扰素 pIRES载体

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H9N2亚型禽流感病毒NA基因的原核表达及其免疫反应性分析

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甘肃农业大学学报 2008年第3期43卷 29-32页

作者：易华山侯顺利独军政胡永浩包世俊常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

采用PCR方法扩增H9N2亚型禽流感病毒A/Ck/GS/2/99株NA基因(1 400 bp),克隆至pET-28a(+)载体上,构建重组原核表达载体pET-NA,转化***21(DE3)感受态细胞,以终浓度0.8 mmol/L的IPTG诱导表达8 h.表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:... 详细信息

关键词：禽流感血凝素原核表达 H9N2 免疫反应性

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检测猪血清口蹄疫病毒非结构蛋白3AB抗体ELISA方法的建立

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甘肃农业大学学报 2008年第1期43卷 33-37页

作者：祝秀梅卢曾军胡永浩曹轶梅马江涛刘在新甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

用大肠杆菌表达的FMDV NSP 3AB经纯化后作为抗原,建立了3AB间接ELISA方法,该方法可用于判定被检动物是否感染了口蹄疫病毒.重组口蹄疫病毒非结构蛋白3AB作为检测抗原包被酶标板反应孔,以兔抗猪IgG/HRP酶结合物作为第2抗体,建立了抗非结... 详细信息

用大肠杆菌表达的FMDV NSP 3AB经纯化后作为抗原,建立了3AB间接ELISA方法,该方法可用于判定被检动物是否感染了口蹄疫病毒.重组口蹄疫病毒非结构蛋白3AB作为检测抗原包被酶标板反应孔,以兔抗猪IgG/HRP酶结合物作为第2抗体,建立了抗非结构蛋白抗体检测的方法.用该方法检测了大量不同背景的猪血清,并与3ABC-I-ELISA检测结果进行比较.结果表明:3AB-I-ELISA和3ABC-I-ELISA的总符合率为98.9%,而且3AB-I-ELISA的特异性高于3ABC-I-ELISA.

关键词： 3AB-I-ELISA 3ABC-I-ELISA 口蹄疫病毒非结构蛋白3AB

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Asia Ⅰ型口蹄疫空衣壳疫苗免疫效力实验

Asia Ⅰ型口蹄疫空衣壳疫苗免疫效力实验

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中国农学会高新技术农业应用专业委员会2009年学术研讨会

作者：李志勇殷相平易咏竹张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将携带有口蹄疫Asia Ⅰ／JQ株P1-2A、3C基因的重组病毒rBm(P12A3C)感染家蚕蚕蛹，在蚕体内获的高效表达的口蹄疫空衣壳抗原。将蚕表达抗原试制疫苗免疫牛，进行空衣壳疫苗的免疫效力实验。结果表明，空衣壳疫苗抗Asia Ⅰ型10，000 BID50... 详细信息

将携带有口蹄疫Asia Ⅰ／JQ株P1-2A、3C基因的重组病毒rBm(P12A3C)感染家蚕蚕蛹，在蚕体内获的高效表达的口蹄疫空衣壳抗原。将蚕表达抗原试制疫苗免疫牛，进行空衣壳疫苗的免疫效力实验。结果表明，空衣壳疫苗抗Asia Ⅰ型10，000 BID50 Asia Ⅰ／AKT／03株攻击的免疫效力可达到6.47 PD50／头份。

关键词：家蚕杆状病毒载体口蹄疫空衣壳疫苗免疫效力

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口蹄疫病毒抗原保护剂的筛选和优化

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浙江农业科学 2009年第5期50卷 1016-1020页

作者：李正丰王永录张永光方玉珍蒋守田潘丽刘力宽吕建亮张淑刚杜进鑫张昱张中旺周鹏陈启伟王刚中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

用三因素、三水平、双重复正交试验筛选出对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果较好的4号保护剂配方,该保护剂保存的病毒在37℃静置40 h和50 h后毒价TCID50分别为4.5和2.0,而对照组病毒则分别降至1.5和0。通过方差分析4号保护剂保存病毒测得T... 详细信息

用三因素、三水平、双重复正交试验筛选出对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果较好的4号保护剂配方,该保护剂保存的病毒在37℃静置40 h和50 h后毒价TCID50分别为4.5和2.0,而对照组病毒则分别降至1.5和0。通过方差分析4号保护剂保存病毒测得TCID50极显著的高于1、3、5、6、7、8号,显著高于2、9号。保护剂配方优化试验结果表明,加该保护剂的病毒,分别于-20℃和4℃下保存90 d、120 d、150 d,其?TCID50分别为6.0、6.0、5.8和5.3、5.0、4.5,而未加保护剂的对照病毒则为5.8、5.3、5.0和5.0、4.5、4.3;FMDV 146 s抗原含量测定结果表明,分别于-20℃和4℃下保存150 d,37℃下保存40 h,测得结果分别为1.116μ***-1、0.896μ***-1、0.888μ***-1,而未加保护剂的对照病毒则为0.846μ***-1、0.802μ***-1、0.307μ***-1;反复冻融试验表明对照组冻融6次即为临界点,病毒保护剂组达10次;通过对主要保护性抗原VP1基因,试验病毒株(O/NX/99/1)、对照病毒株(O/NX/99/2)测序比对,结果表明保护剂不会使病毒产生基因突变。试验结果说明该保护剂对FMDV有效抗原确实有较好的保护作用。

关键词：口蹄疫病毒抗原保护剂筛选优化

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动物抗菌肽新型饲料添加剂的研究进展

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中国饲料添加剂 2010年第3期 6-9页

作者：祁光宇黄银军牟克斌刘学荣王宇蒋韬中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

抗菌肽是一类具有抗微生物活性的小分子多肽，具有相对分子质量小、抗菌谱广等特点，具有广谱抗菌活性和抗病毒、真菌、寄生虫及肿瘤等生物活性，且不易产生抗药性，有良好的应用前景。本文对抗菌肽的结构特点、生物活性、作用机理及在... 详细信息

抗菌肽是一类具有抗微生物活性的小分子多肽，具有相对分子质量小、抗菌谱广等特点，具有广谱抗菌活性和抗病毒、真菌、寄生虫及肿瘤等生物活性，且不易产生抗药性，有良好的应用前景。本文对抗菌肽的结构特点、生物活性、作用机理及在饲料中的应用现状进行了综述，并指出在开发研究抗菌肽中存在的问题，对其发展作了展望。

关键词：抗菌肽结构特点生物活性作用机制应用现状

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青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查

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中国动物检疫 2010年第5期27卷 41-42页

作者：韩赟郭晗逯忠新青海乌兰县畜牧兽医工作站青海乌兰811700 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况,笔者利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示,平均阳性率为16.08%。不同地区山羊血清的阳性率从5%-20... 详细信息

为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况,笔者利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示,平均阳性率为16.08%。不同地区山羊血清的阳性率从5%-20.9%不等。从季节上看,冬春季节发病率要高于夏秋季节。结果提示青海地区的丝状支原体山羊亚种的感染率偏高,应该加强对由丝状支原体山羊亚种的防控。

关键词：丝状支原体山羊亚种抗体检测血清学调查青海省

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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

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首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会

作者：殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组，获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacI酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组... 详细信息

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组，获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacI酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次，病毒在细胞的病变时间缩短在20h以内。经测定，重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50达10-7.50/ml。用RT-PCR对重组腺病毒进行检测，可以检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段。重组腺病毒经口服免疫小白鼠，21天后用狂犬病毒CVS毒株进行脑内攻击，观察10天，免疫保护率达60％。

关键词：狂犬病毒 CVS毒株重组腺病毒生物学特性免疫保护糖蛋白核蛋白

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口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究

口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究

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2008年中国微生物学会学术年会

作者：杨彬兰喜殷相平李学瑞李宝玉方玉萍柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

用RT-PCR法获得了针对口蹄疫病毒(FMDV)基因组5’非编码区内包含病毒复制起始元件的基因片段ASCN及其VP1结构蛋白基因,将其分别克隆至双顺反子表达载体pIRES中,构建成了双表达质粒pASCN-IR-VP1,经酶切、PCR及DNA测序分析表明ASCN及VP1...

用RT-PCR法获得了针对口蹄疫病毒(FMDV)基因组5’非编码区内包含病毒复制起始元件的基因片段ASCN及其VP1结构蛋白基因,将其分别克隆至双顺反子表达载体pIRES中,构建成了双表达质粒pASCN-IR-VP1,经酶切、PCR及DNA测序分析表明ASCN及VP1基因已正确地插入到pIRES中,编码序列及插入方向均正确。用脂质体介导法将双效表达质粒导入BHK-21细胞后,经RT-PCR、实时荧光定量PCR检测表明双效表达质粒中的ASCN在细胞中得到了有效转录,

关键词：

来源：评论

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