检索结果-内蒙古大学图书馆

中国饲料添加剂 2010年第5期 12-14页

作者：祁光宇王宇李娟中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 山东省化工研究院济南250014

微生物添加剂作为无毒、无污染生物制品类饲料添加剂，在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等方面有着其它抗生素类添加剂不可替代的作用，而且随着对其作用机理研究的深入，应用效果的进... 详细信息

微生物添加剂作为无毒、无污染生物制品类饲料添加剂，在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等方面有着其它抗生素类添加剂不可替代的作用，而且随着对其作用机理研究的深入，应用效果的进一步凸显，应用也越来越广泛。本文对微生物添加剂的概念、种类、国内外研究和应用概况及应用前景进行了综述。

关键词：微生物添加剂概念种类应用前景

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一例绵羊痘的PCR诊断

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甘肃畜牧兽医 2008年第5期38卷 8-9页

作者：董建斌董建华颜新敏吴国华李健朱海霞朱彩珠张强肃南县皇城镇东滩兽医站甘肃肃南7340312 肃南裕固族自治县畜牧兽医工作站中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学开放实验室

采取临床疑似患绵羊痘病绵羊的皮肤、肺脏等组织病料,提取DNA,用建立的多重PCR方法进行检测,两对引物均从病料中扩增出了与预期片段大小一致的两条带。PCR检测快速,便捷,可在基层兽医实验室推广应用。

关键词：绵羊痘 PCR 诊断

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A型口蹄疫病毒P1基因与GFP基因的重组逆转录病毒载体构建

A型口蹄疫病毒P1基因与GFP基因的重组逆转录病毒载体构建

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：刘艳红安芳兰刘俊林李炯刘相涛尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重开放实验室(甘肃兰州 730046) 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重开放实验室 (甘肃兰州 730046) 甘肃农业大学动物科学技术学院(甘肃兰州 730070) 甘肃农业大学动物科学技术学院 (甘肃兰州 730070)

根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物，以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板，用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体pBABE-puro上。经PCR、酶切及... 详细信息

根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物，以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板，用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体pBABE-puro上。经PCR、酶切及测序鉴定表明，获得了含CFP的A型FMDV衣壳蛋基因的重组逆转录病毒表达载体，对今后用逆转录病毒载体包装系统进行FMDV的目的基因转移和表达研究，更快速筛选单克隆阳性靶细胞奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒衣壳蛋白基因重组逆转录病毒表达载体

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鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的稳定性及SPF雏鸡免疫试验

鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的稳定性及SPF雏鸡免疫试验

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中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第一届中国兽医临床大会

作者：周继章邱昌庆张小英蔺国珍曹小安张琳程淑敏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开发实验室，甘肃兰州 730046 兰州市动物检疫站，甘肃兰州 730050

禽衣原体病是由嗜性鹦鹉热衣原体感染禽类而引起的一种疾病。鹦鹉热衣原体感染大部分宠物鸟、家禽(包括火鸡、鸭、鹅、鸡以及相关的家养品种)和野鸟。在家禽中，大爆发也经常发生在火鸡场和鸭场，并且导致人的感染。目前国内外尚无商业... 详细信息

禽衣原体病是由嗜性鹦鹉热衣原体感染禽类而引起的一种疾病。鹦鹉热衣原体感染大部分宠物鸟、家禽(包括火鸡、鸭、鹅、鸡以及相关的家养品种)和野鸟。在家禽中，大爆发也经常发生在火鸡场和鸭场，并且导致人的感染。目前国内外尚无商业化疫苗预防禽衣原体病，而化药防治本病存在成本高、食品安全隐患等系列问题。因此，为了控制本病，保护人类健康，促进养禽业的发展，研究和开发高效、低廉的疫苗势在必行。本研究是将重组腺病毒质粒在HEK293细胞中连续传代21代，并用PCR法检测目的基因;结果表明重组腺病毒质粒在HEK293细胞中连续传代后，仍然用PCR检测能检测出目的基因，并且目的基因的氨基酸序列没有发生改变，说明目的基因能够在重组腺病毒活载体体中稳定传代。

关键词：鹦鹉热衣原体感染重组腺病毒稳定性免疫试验家禽禽衣原体病

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组腺病毒的构建及特性研究

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甘肃农业大学学报 2008年第1期43卷 1-6页

作者：马友记赵兴绪黄连清李发弟程小磊柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 中农威特生物科学技术股份有限公司甘肃兰州730046

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEas... 详细信息

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已得到表达.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 重组腺病毒同源重组

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狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建

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甘肃农业大学学报 2008年第6期43卷 1-5页

作者：李江涛殷相平柳纪省胡永浩中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 湖州市农业科学研究院浙江湖州313000 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.... 详细信息

通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.

关键词：狂犬病病毒G基因 IFN—a基因内部核糖体进入位点序列重组腺病毒

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痘病毒F10L基因的克隆及生物信息学分析

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西北民族大学学报（自然科学版） 2014年第4期35卷 69-74页

作者：赵银龙吴国华吴健朱海霞颜新敏赵志荀李健吴娜张强穆晓峰西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730124 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实室甘肃兰州730046 吉林农业大学吉林长春130033

将古浪山羊痘病毒的基因组DNA提取出来,并设计引物进行PCR扩增,克隆F10L基因的DNA序列.为了分析山羊痘病毒F10蛋白的分子特征,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息... 详细信息

将古浪山羊痘病毒的基因组DNA提取出来,并设计引物进行PCR扩增,克隆F10L基因的DNA序列.为了分析山羊痘病毒F10蛋白的分子特征,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对F10L基因序列进行预测分析.结果显示,F10L基因序列由1 335个核苷酸组成的开放阅读框,编码444个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值53.01 ku,理论等电点为7.14.该蛋白的二级结构中,α螺旋占12.44%,β折叠占15.73%,其余71.83%为无规则卷曲.多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株F10L序列高度保守,一致性在97%以上.此研究结果为进一步研究F10蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础.

关键词：痘病毒 F10L 基因克隆生物信息学分析

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一株H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白基因的克隆及分子特征

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浙江农业科学 2009年第3期50卷 600-603页

作者：易华山侯顺利独军政胡永浩常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 兰州军区疾病预防控制中心甘肃兰州730020

采用RT-PCR方法对H9N2亚型禽流感病毒Ck/GS/2/99株非结构蛋白NS基因进行了扩增,将其克隆到pGEM-T easy载体后进行序列测定与分析。结果表明,该株病毒NS基因开放阅读框(ORF)由890个碱基组成,编码272个氨基酸。经同源性与系统发生树分析表... 详细信息

采用RT-PCR方法对H9N2亚型禽流感病毒Ck/GS/2/99株非结构蛋白NS基因进行了扩增,将其克隆到pGEM-T easy载体后进行序列测定与分析。结果表明,该株病毒NS基因开放阅读框(ORF)由890个碱基组成,编码272个氨基酸。经同源性与系统发生树分析表明,该毒株NS基因都与Ck/NX/4/99株的核苷酸和氨基酸同源性在99%以上,与Ck/HB/31/00、Ck/SD/6/96和Sw/HK/10/98关系密切。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 A/Ckicken/Gansu/2/99 非结构蛋白序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒PA基因的克隆与序列分析

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甘肃农业大学学报 2007年第3期42卷 12-16页

作者：易华山侯顺利胡永浩独军政刘萍王光华高闪电常惠芸甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 兰州军区疾病预防控制中心甘肃兰州730020 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

对甘肃H9N2亚型的A/Chicken/GanSu/2/99(A/CK/GS/2/99)株PA基因进行了克隆、测序及分子进化分析.结果表明:该病毒PA基因开放阅读框由2 151个碱基组成,编码716个氨基酸;其与A/Quail/HongKong/NT28/99(H9N2)株和A/Duck/HongKong/Y280/97(H9N2)株的核苷酸同源性分别为98.4%和98.5%,氨基酸同源性分别为98.7%和98.7%;与A/HongKong/156/97(H5N1)和A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)的核苷酸同源性分别为89.0%和87.8%,氨基酸同源性分别为为93.9%和94.3%.

关键词：禽流感病毒(H9N2株) PA基因克隆序列分析

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兔心房来源非心肌细胞的分离培养

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兰州理工大学学报 2008年第2期34卷 70-73页

作者：袁毅君袁惠君蒲晓亚田生明柳纪省天水师范学院生命科学与化学学院甘肃天水741001 兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 甘肃省产品质量监督检验东部分中心甘肃天水741001 天水市第十中学甘肃天水741001 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验毫农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

建立一种兔心房组织来源的非心肌细胞体外培养模型,为心血管药理实验、病毒学实验及组织工程的研究提供实验平台.无菌条件下取兔心房壁组织,将组织分离成2 mm×1 mm小块,采用植块法以5行4列的形式种植于培养瓶中,加入M199或MEM培养... 详细信息

建立一种兔心房组织来源的非心肌细胞体外培养模型,为心血管药理实验、病毒学实验及组织工程的研究提供实验平台.无菌条件下取兔心房壁组织,将组织分离成2 mm×1 mm小块,采用植块法以5行4列的形式种植于培养瓶中,加入M199或MEM培养基对兔心房组织进行原代培养.待长成单层时胰酶消化收集细胞,并进行传代培养和细胞冻存.该方法获得了大量活力良好的兔心房壁组织来源的非心肌细胞,倒置镜下观察细胞多呈短梭形,以及少量的三角形、柱形和卵圆形细胞,细胞核部位隆突,胞浆均匀清亮.经体外传代培养至16代,冷冻复苏以后,细胞仍生长良好.

关键词：兔非心肌细胞体外培养

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