检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2011年第9期41卷 881-885页

作者：马米玲关贵全苟惠天杨吉飞万玉林李有全刘爱红任巧云陈泽王朝文刘志杰罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采用动物接种法将采自甘肃敦煌的15只绵羊血液混合后感染1只除脾绵羊,感染后逐日做血涂片检查。结果显示,在感染后第10天的血片上出现了1种大型巴贝斯虫。虫体形态以双梨子形、单梨子形、圆形及卵圆形为主。在感染后第12天,感染羊体温升... 详细信息

采用动物接种法将采自甘肃敦煌的15只绵羊血液混合后感染1只除脾绵羊,感染后逐日做血涂片检查。结果显示,在感染后第10天的血片上出现了1种大型巴贝斯虫。虫体形态以双梨子形、单梨子形、圆形及卵圆形为主。在感染后第12天,感染羊体温升至41.1℃。染虫率达到0.125%,之后逐渐下降。无菌采集该羊血液,提取全血基因组,用梨形虫通用引物进行PCR扩增全长18SrRNA基因,得到长约1 700bp的片段,将其克隆并测序(登录号:HQ730762),与GenBank中的其他巴贝斯虫的序列进行比较,发现其与新疆巴贝斯虫未定种的同源性最高,达到99.8%。本研究发现甘肃敦煌又是一个新疆羊巴贝斯虫未定种的疫源地。

关键词：绵羊血液巴贝斯虫染虫率 18S rRNA 聚合酶链反应

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线虫线粒体基因组全序列分析研究进展

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中国农业科学 2011年第6期44卷 1255-1265页

作者：贾万忠闫鸿斌倪兴维曹平娄忠子付宝权史万贵中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃省动物疫病控制中心

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应... 详细信息

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应用和今后发展方向做一简要综述。迄今,已完成46种线虫的线粒体基因组全序列测定和分析。线虫线粒体基因组的碱基组成、基因结构、基因变异等方面有其特点,这些分析结果为线形动物门线粒体功能基因组学研究、比较基因组学研究、分子分类学研究、虫种(株)鉴定与分类、分子系统发育和进化分析等提供了重要依据和指导作用,为线虫病诊断、分子流行病学调查等分子检测方法的建立提供参考依据。

关键词：线虫线粒体基因组基因结构分类

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基于18S rRNA基因序列的我国马梨形虫分类学地位分析

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动物分类学报 2011年第1期36卷 99-103页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁张萍中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其... 详细信息

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其他地方株梨形虫18SrRNA基因序列进行同一性分析并构建系统发生树。分析显示,之前被称作马巴贝斯虫的虫种和泰勒虫虫种有着更密切的亲缘关系,在进化发育过程中处于同一种系,而与巴贝斯虫为明显的2个分支。我国驽巴贝斯虫肇源株与西班牙分离株(AY534883.1)仅有较小差异,其同源性高达91.8%。马泰勒虫肇源株与西班牙分离株(DQ287951.1,AY150064.2)同源性均高于91.4%。以上分析显示我国马梨形虫地方株和西班牙地方株亲缘关系最近,而与其他地方株差异相对较大。因此我国肇源株马梨形虫和西班牙地方株同属于Atbara8。

关键词：马梨形虫马泰勒虫驽巴贝斯虫 18S rRNA 系统发育分类学

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蜱类毒素与蜱中毒的研究进展

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中国兽医科学 2011年第10期41卷 1085-1091页

作者：陈泽孙文敬罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013

从蜱类毒素的类型、功能、演化和来源以及蜱中毒的特点等方面进行了阐述,具体分析了该领域的研究成果、存在的不足及我国的滞后现状,旨在为深入研究蜱类毒素的功能及应用奠定基础。

关键词：蜱瘫蜱中毒毒素

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小亚璃眼蜱4D8基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

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中国兽医科学 2011年第4期41卷 375-379页

作者：赵金国刘爱红殷宏罗建勋天水市动物疫病预防控制中心甘肃天水741000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为进行抗小亚璃眼蜱疫苗的研究,采用PCR方法从重组质粒pGEM-T-pHyaa4D8中克隆了pHyaa4D8分子的基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pHyaa4D8,在毕赤酵母中进行表达,并对重组酵母菌的发酵条件进行了优化。结果表明,表达出约19ku的目... 详细信息

为进行抗小亚璃眼蜱疫苗的研究,采用PCR方法从重组质粒pGEM-T-pHyaa4D8中克隆了pHyaa4D8分子的基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pHyaa4D8,在毕赤酵母中进行表达,并对重组酵母菌的发酵条件进行了优化。结果表明,表达出约19ku的目的蛋白,诱导表达的最佳时间是72h。Western-blot分析结果显示,表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别,在19ku左右出现目的条带,说明表达的目的蛋白具有反应活性。

关键词：小亚璃眼蜱 4D8基因片段真核表达毕赤酵母

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绦虫线粒体基因组学研究进展

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中国预防兽医学报 2011年第11期33卷 910-914页

作者：贾万忠闫鸿斌娄忠子倪兴维史万贵郭爱疆詹芳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省动物疫病控制中心甘肃兰州730046

绦虫大约有1 500多种,隶属于扁形动物门（Platyhel-minthes）绦虫纲（Cestoda）,营寄生生活,由成虫及其幼虫（蚴）所致的绦虫病和绦虫蚴病严重危害人和动物的健康。绦虫线粒体基因组有许多独特的特征如基因组很小,基因位置排列相对稳定... 详细信息

绦虫大约有1 500多种,隶属于扁形动物门（Platyhel-minthes）绦虫纲（Cestoda）,营寄生生活,由成虫及其幼虫（蚴）所致的绦虫病和绦虫蚴病严重危害人和动物的健康。绦虫线粒体基因组有许多独特的特征如基因组很小,基因位置排列相对稳定等,tRNA和两个主要非编码区的二级结构、碱基组成和变异等有也其自身特点,这些特征已经在研究物种分类、基因进化、现有物种进化史等方面得到应用[1-4]。

关键词：线粒体基因组基因组学绦虫纲扁形动物门物种分类相对稳定二级结构非编码区

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基于Hsp70基因的马梨形虫分类学定位分析

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中国农业科学 2011年第17期44卷 3694-3700页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁张萍沈辉党根生中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫原病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室西安市长安区动物疾病预防控制中心

【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBan... 详细信息

【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBank中23种已知虫种的相应序列进行分析比较。【结果】该片段编码639个氨基酸,其疏水性氨基酸达到208个,极性氨基酸167个。同一性分析显示,该基因片段与报道的马巴贝斯虫Hsp70基因(*** BAF02625.1)亲缘关系最近,其次是小泰勒虫(*** XP764717.1)和环形泰勒虫(*** AAA30130.1),而与感染马属动物的另一个虫种驽巴贝斯虫(*** BAF02619.1)亲缘关系较远。【结论】马泰勒虫Hsp70基因的克隆及系统发育分析显示,之前被定名为马巴贝斯虫(***)的虫种隶属于泰勒虫虫种。本试验为马巴贝斯虫正确更名为马泰勒虫(***)的分类地位提供了又一佐证。

关键词：马泰勒虫努巴贝斯虫热休克蛋白(Hsp70) 分类学定位

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非洲猪瘟病毒环介导恒温扩增快速检测技术的建立及应用

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中国动物传染病学报 2011年第4期19卷 7-12页

作者：杨吉飞关贵全刘志杰汪月凤李有全马米玲刘爱红任巧云苟惠天杜鹏飞罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室兰州730046

本研究基于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。

关键词：环介导恒温扩增技术聚合酶链式反应非洲猪瘟诊断

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驽巴贝斯虫病PCR检测方法的建立和应用

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中国畜牧兽医 2011年第7期38卷 193-195页

作者：罗金刘光远谢俊仁田占成沈辉王芳芳孙晓林陈荣贵王海军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 新疆伊犁州动物疾病控制与诊断中心新疆伊犁735000 新疆新源县畜牧兽医站新疆新源830000

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6... 详细信息

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6个巴贝斯虫株中,仅驽巴贝斯虫株能扩增出特异性片段,马泰勒虫、双芽巴贝斯虫、莫氏巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫、大巴贝斯虫的扩增结果均为阴性。对45份马属动物血样进行检测,本研究建立的PCR方法测得驽巴贝斯虫病的阳性率为26.67%(12/45),与显微镜检测方法进行了比较,结果显示PCR检测方法可显著提高驽巴贝斯虫的检出率。

关键词：驽巴贝斯虫 PCR诊断方法应用

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一种羊无浆体环介导恒温扩增方法的建立

一种羊无浆体环介导恒温扩增方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：马米玲刘志杰关贵全杨吉飞李有全刘爱红任巧云陈泽罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

羊无浆体是寄生于小反刍兽红细胞内的一种立克次氏体病原。环介导恒温扩增(LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,它能在等温条件下高效、快速、特异的扩增靶序列。本研究中,一种羊无浆体环介导恒温扩增方法被建立,引物设计基于它的主要表面蛋... 详细信息

羊无浆体是寄生于小反刍兽红细胞内的一种立克次氏体病原。环介导恒温扩增(LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,它能在等温条件下高效、快速、特异的扩增靶序列。本研究中,一种羊无浆体环介导恒温扩增方法被建立,引物设计基于它的主要表面蛋白4(MSP4)基因。本方法可以在65℃,30分钟完成。用几株羊无浆体分离株、边缘无浆体卢氏株、支原体、衣原体、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫及羊巴贝斯虫新疆分离株做交叉反应,发现该方法除于几株羊无浆体分离株有反应外,其它均未反应,证明了该方法特异性良好,并进一步将LAMP产物通过用EcoRⅠ酶切验证。用该方法和常规PCR检测了227份田间样品。LAMP方法检测的敏感性是94.45%,总之,该LAMP方法是一种高效、快速、特异的诊断羊无浆体感染的方法。

关键词：羊无浆体环介导恒温扩增分离株

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