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77 篇 会议
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- 2 篇 临床医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...
9 篇 理学
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- 6 篇 生物工程

主题

15 篇 兽医学
14 篇 蜱
12 篇 长角血蜱
11 篇 微小牛蜱
11 篇 流行病学
8 篇 巴贝斯虫
8 篇 流行病学调查
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6 篇 原核表达
6 篇 梨形虫
6 篇 序列分析
5 篇 吕氏泰勒虫
5 篇 分子分类
5 篇 牛
5 篇 pcr
5 篇 泰勒虫
5 篇 伯氏疏螺旋体
5 篇 昆虫病原真菌
5 篇 青海血蜱
4 篇 18s

机构

37 篇 家畜疫病病原生物...
26 篇 中国农业科学院兰...
15 篇 中国农业科学院兰...
10 篇 中国农业科学院兰...
9 篇 甘肃农业大学
8 篇 家畜疫病病原生物...
7 篇 新疆伊犁州动物疾...
7 篇 中国农业科学院兰...
5 篇 农业部草食动物疫...
5 篇 甘肃省动物寄生虫...
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 中国农业科学院兰...
4 篇 中国农业科学院兰...
3 篇 南京农业大学
3 篇 新疆维吾尔自治区...
3 篇 复旦大学
3 篇 中国农业科学院兰...
3 篇 家畜疫病病原生物...
3 篇 甘肃省动物疫病控...

作者

94 篇 殷宏
85 篇 罗建勋
64 篇 关贵全
61 篇 李有全
57 篇 任巧云
46 篇 陈泽
45 篇 刘爱红
45 篇 刘志杰
43 篇 刘光远
36 篇 牛庆丽
36 篇 杨吉飞
35 篇 马米玲
35 篇 罗金
33 篇 刘军龙
26 篇 谢俊仁
25 篇 田占成
11 篇 王素艳
10 篇 王芳芳
10 篇 孙明
9 篇 苟惠天

语言

136 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室"

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我国九省羊的巴贝斯虫分布状况调查

我国九省羊的巴贝斯虫分布状况调查

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：杨强刘爱红刘军龙李有全殷宏罗建勋关贵全家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

羊的巴贝斯虫病是一种经蜱传播的血液原虫病,由绵羊巴贝斯虫、莫氏巴贝斯、粗糙巴贝斯虫和未定种等引起,感染动物出现发热、黄疸、贫血、血红蛋白尿、甚至死亡。该病在热带、亚热带、温带均有流行,给世界畜牧业造成严重的危害。在我国,... 详细信息

羊的巴贝斯虫病是一种经蜱传播的血液原虫病,由绵羊巴贝斯虫、莫氏巴贝斯、粗糙巴贝斯虫和未定种等引起,感染动物出现发热、黄疸、贫血、血红蛋白尿、甚至死亡。该病在热带、亚热带、温带均有流行,给世界畜牧业造成严重的危害。在我国,羊巴贝斯虫病最早于十九世纪八十年代在四川和黑龙江省发现并报道。中国农业科学院兰州兽医研究所虫媒病团队分离出几株羊的巴贝斯虫,并依据真核生物核糖体18S rRNA序列比对,将这些感染羊的巴贝斯虫可分为两组,即莫氏巴贝斯虫(.Babesia motasi)和巴贝斯虫未定种(Babesia ***)。2014年兰州兽医研究所虫媒病团队利用梨形虫核糖体18S rRNA基因设计了检测绵羊、山羊和传播媒介蜱体内羊巴贝斯虫的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法。该方法在检测牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫、大巴贝斯虫和牛巴贝斯虫未定种、吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、绵羊无浆体等均呈现阴性,而在检测莫氏巴贝斯虫临潭株、莫氏巴贝斯虫宁县株、莫氏巴贝斯虫天祝株、莫氏巴贝斯虫河北株和羊巴贝斯虫未定种新疆株中出现阳性反应。因此,该方法可以特异性检测羊巴贝斯虫的感染。本实验室利用建立的PT-PCR方法对采集于中国甘肃、内蒙古、辽宁、重庆、海南、浙江、贵州和湖北9个省382份羊血液样品,其中阳性样品132份,阳性率为34.6%。其中浙江采集的42份羊血液样品感染率最高,为69.4%。辽宁检测羊血液样品45份,阳性样品出现13份,感染率为28.9%,而重庆采集的55份血液样品感染率最低,为10.9%。可见不同省份的羊巴贝斯虫感染率差异很大。本研究首次应用实时荧光定量PCR对我国羊巴贝斯虫病的流行状况进行大范围的调查,更加准确的掌握羊巴贝斯虫病的流行情况,为进一步了解我国羊巴贝斯虫的分布情况和羊巴贝斯虫病防控策略的制定提供了可靠的流行病学信息。

关键词：羊的巴贝斯虫流行病学调查 Real-time PCR

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中国地区羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究

中国地区羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究

引用

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：李倩李有全陈泽刘志杰刘军龙杨吉飞李亚琼任巧云关贵全罗建勋殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

目的羊泰勒虫病给羊养殖业带来了大量的经济损失,尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫被认为是制约我国羊泰勒虫病流行区的羊养殖业的主要因素之一。在我国一些地区,如甘肃、青海、内蒙古、河南、辽宁、湖北、浙江等地,已有泰勒虫病的相关报道,然而... 详细信息

目的羊泰勒虫病给羊养殖业带来了大量的经济损失,尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫被认为是制约我国羊泰勒虫病流行区的羊养殖业的主要因素之一。在我国一些地区,如甘肃、青海、内蒙古、河南、辽宁、湖北、浙江等地,已有泰勒虫病的相关报道,然而,对于其他省份羊泰勒虫病的情况依然知之甚少。因此,开展流行病学调查对于了解和掌握中国其他地区羊泰勒虫病患病情况是非常必要的。方法何海宁于2013年建立了间接酶联免疫吸附方法(i ELISA),已被实验证实具有高度灵敏度(97.1%)和特异度(97.9%),而且与巴贝斯虫无交叉反应。结果本研究运用该方法对中国21个省份的泰勒虫病进行了血清学阳性率调查研究。21个省份的泰勒虫患病率从0.0%到76.0%,患病率的均值是41.0%。甘肃省患病率最高,为76.0%,这与郭等(Guo et al.,2002)的报告一致。甘肃省的高患病率很可能与该地区的青海血蜱和长角血蜱的分布和密度、以及蜱的荷虫率高等因素密切相关(Luo and Yin et al.,1997)。在此之前,没有关于内蒙古的泰勒虫病患病率相关的报告,此次调查研究表明,其患病率高达40.1%。浙江省的患病率为6.8%,与通过PCR检测得到的结果一致(Ge et al.,2012)。在47个地区中,舟曲患病率为96.0%,伊犁患病率为93.2%,渭源患病率为92.0%,远高于患病率的平均水平。曹等(Cao et al.,2013)通过巢式PCR检测结果表明,吉林省头道镇患病率为24%,略高于我们的结果 11.3%。这两个结果并不矛盾,因为ELISA检测的是抗体水平(属于既往感染),而PCR检测的是感染状态。另外,在甘肃省景泰县和青海省祁连地区未检测到泰勒虫。

关键词：流行病学调查羊泰勒虫 ELISA

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羊的泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条的制备与应用

羊的泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条的制备与应用

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：卢怡竹李有全罗建勋殷宏刘志杰家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

本研究利用胶体金标记的TuIP蛋白抗原、TuIP蛋白抗原和抗TuIP多克隆抗体制备了羊的泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条。用胶体金标记TuIP抗原并喷涂于结合垫上制成胶体金垫,在硝酸纤维素膜检测线上和质控线上分别包被TuIP蛋白抗原和抗TuIP... 详细信息

本研究利用胶体金标记的TuIP蛋白抗原、TuIP蛋白抗原和抗TuIP多克隆抗体制备了羊的泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条。用胶体金标记TuIP抗原并喷涂于结合垫上制成胶体金垫,在硝酸纤维素膜检测线上和质控线上分别包被TuIP蛋白抗原和抗TuIP多克隆抗体,将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘贴在PVC垫上表面制得羊的泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条。用吕氏泰勒虫阳性血清、羊无浆体阳性血清、羊巴贝斯虫阳性血清、尤氏泰勒虫阳性血清和阴性血清对该试纸条分别进行了特异性和灵敏性的评价,结果显示,其具有较好的特异性和灵敏性。该试纸条检测30份实验样品,结果发现在动物感染尤氏泰勒虫后第14天即可检测到抗体,且在感染后第85天仍然可以检测到抗体,说明该方法可用于尤氏泰勒虫早期感染和持续感染的检测。该试纸条检测127份野外样品,检测结果与rTuIP-ELISA结果进行比较发现,两者同时检出40份阴性样品,可推算出该试纸条的阴性符合率为100%,两者共检出阳性样品87份,其中试纸条检出81份,可推算出该试纸条的阳性符合率为93.1%,说明该试纸条具有较好的检测性能。该试纸条携带方便,操作简单,能在5～20 min内完成检测,结果可肉眼判读,更适合基层工作者的使用。

关键词：泰勒虫病阳性血清免疫胶体金检测试纸制备与应用

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新疆蜱传无浆体病原的检测及分子分类研究

新疆蜱传无浆体病原的检测及分子分类研究

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：杨吉飞刘志杰牛庆丽关贵全李有全陈泽罗建勋殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

无浆体病(Anaplasma phagocytophilum)是由媒介蜱传播的一类专性细胞内寄生菌引起的疾病。目前,引起无形体病的病原主要包括6种。其中,嗜吞噬细胞无形体能够感染人和多种宿主动物;边缘无浆体、牛无浆体和中央无浆体主要感染牛,而中央无... 详细信息

无浆体病(Anaplasma phagocytophilum)是由媒介蜱传播的一类专性细胞内寄生菌引起的疾病。目前,引起无形体病的病原主要包括6种。其中,嗜吞噬细胞无形体能够感染人和多种宿主动物;边缘无浆体、牛无浆体和中央无浆体主要感染牛,而中央无浆体被认为是边缘无浆体的亚种;羊无浆体主要感染绵羊、山羊、鹿等;扁平无浆体主要感染犬类。本研究以新疆喀什、阿图什、阿克陶、叶城、皮山和和田地区采集的牛(n=125)、羊(n=125)血液样品为研究对象,基于无形体16S rRNA和Msp4基因,应用PCR方法进行检测。结果显示,羊无浆体的感染率为40.5%,牛无浆体的感染率为4.8%,而嗜吞噬细胞无形体在绵羊和牛中的感染率分别为28.8%和6.4%。绵羊中嗜吞噬细胞无形体的感染率显著高于牛(P<0.001);另外,14.4%的样品为嗜吞噬细胞无形体和羊无浆体的混合感染,而仅有1.6%的样品为嗜吞噬细胞无形体和牛无浆体的混合感染。对部分阳性样品进行测序,结果显示嗜吞噬细胞无形体可以分为三个基因型,不同基因型的菌株对宿主动物感染具有特异性:牛无浆体16S rRNA基因比较保守,其序列与已发表的菌株相似性达到100%;羊无浆体Msp4基因序列与国外AOI基因型相似性达到99.8-100%,而与国内已发表菌株序列存在差异。上述研究结果表明嗜吞噬细胞无形体、牛无浆体和羊无浆体在该地区广泛分布。另外,从牛中鉴定出一株扁平无浆体的感染,表明牛可能是扁平无浆体的宿主。本研究报道了无浆体病原在新疆牛、羊中的感染情况及其分子特征,为该地区无浆体病的防控奠定了一定的基础。

关键词：无浆体病嗜吞噬细胞无形体牛无浆体羊无浆体 PCR 流行病学分子分类

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中国地区羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究

中国地区羊泰勒虫病患病率流行病学调查研究

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

羊泰勒虫病给羊养殖业带来了大量的经济损失,尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫被认为是制约我国羊泰勒虫病流行区的羊养殖业的主要因素之一。在我国一些地区,如甘肃、青海、内蒙古、河南、辽宁、湖北、浙江等地,已有泰勒虫病的相关报道,然而,对... 详细信息

羊泰勒虫病给羊养殖业带来了大量的经济损失,尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫被认为是制约我国羊泰勒虫病流行区的羊养殖业的主要因素之一。在我国一些地区,如甘肃、青海、内蒙古、河南、辽宁、湖北、浙江等地,已有泰勒虫病的相关报道,然而,对于其他省份羊泰勒虫病的情况依然知之甚少。因此,开展流行病学调查对于了解和掌握中国其他地区羊泰勒虫病患病情况是非常必要的。何海宁于2013年建立了间接酶联免疫吸附方法(iELISA),已被实验证实具有高度灵敏度(97.1%)和特异度(97.9%),而且与巴贝斯虫无交叉反应。本研究运用该方法对中国21个省份的泰勒虫病进行了血清学阳性率调查研究。21个省份的泰勒虫患病率从0.0%到76.O%,患病率的均值是41.0%。甘肃省患病率最高,为76.0%,这与郭等(Guo et al.,2002)的报告一致。甘肃省的高患病率很可能与该地区的青海血蜱和长角血蜱的分布和密度、以及蜱的荷虫率高等因素密切相关(Luo and Ym et al.,1997)。在此之前,没有关于内蒙古的泰勒虫病患病率相关的报告,此次调查研究表明,其患病率高达40.1%。浙江省的患病率为6.8%,与通过PCR检测得到的结果一致(Ge et al.,2012)。在47个地区中,舟曲患病率为96.0%,伊犁患病率为93.2%,渭源患病率为92.0%,远高于患病率的平均水平。曹等(Cao et a1.,2013)通过巢式PCR检测结果表明,吉林省头道镇患病率为24%,略高于我们的结果11.3%。这两个结果并不矛盾,因为ELISA检测的是抗体水平(属于既往感染),而PCR检测的是感染状态。另外,在甘肃省景泰县和青海省祁连地区未检测到泰勒虫。

关键词：流行病学调查羊泰勒虫 ELISA

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2014年春季伊犁地区蜱传性病原微生物分子流行病学调查

2014年春季伊犁地区蜱传性病原微生物分子流行病学调查

引用

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：陈秋语陈荣贵赵卫东陈泽任巧云罗金王素艳李凯刘小翠卢海燕刘光远家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所新疆伊犁州动物疾病控制与诊断中心

目的:本实验于2014年春季对新疆伊犁地区五个县的牛、羊蜱传性疾病进行了调查,采集血样若干,提取基因组,运用PCR的方法在样品中检测包括巴贝斯虫、泰勒虫、无浆体、立克次体以及莱姆病螺旋体在内的共五类病原的感染情况,以了解我国新疆... 详细信息

目的:本实验于2014年春季对新疆伊犁地区五个县的牛、羊蜱传性疾病进行了调查,采集血样若干,提取基因组,运用PCR的方法在样品中检测包括巴贝斯虫、泰勒虫、无浆体、立克次体以及莱姆病螺旋体在内的共五类病原的感染情况,以了解我国新疆伊犁地区蜱传疾病的感染率以及分布情况,为该区域蜱传性疾病的防制打下基础。方法:在新疆伊犁地区选择了5个采样点,采集动物血液样品和蜱虫样本。采集的血样提取全血基因组,采集的蜱样鉴定种属后也提取基因组。在基因的保守区域设计引物,运用PCR的方法检测血液基因组样品中的以上5类病原,并对检测结果进行分析。结果:2014年在伊犁地区总共采集牛、羊血液样品共计233份,其中牛血液样品108份,羊血液样品125份。根据巴贝斯虫及泰勒虫18Sr RNA序列设计通用引物,运用套式PCR的方法检测上述样品,共检出阳性123份(其中牛21份,羊102份),测序结果经比对后正确的有102份。通过序列分析,在这102份阳性样品中泰勒虫属有三种,分别是泰勒虫OT3(Theileria ***3)71份,水牛泰勒虫(Theileria buffeli)26份以及羊泰勒虫(Theileria ovis)1份;巴贝斯虫阳性样品有4份,为莫氏巴贝斯虫(Babesia motasi)。基于无浆体16S r RNA的基因序列设计引物,运用套式PCR检测上述样品,阳性结果共计122份(其中牛13份,羊109份)。通过序列分析,共有三种结果,分别是绵羊无浆体(Anaplasma ovis)68份,嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)51份以及Uncultured Anaplasma 3份。在上述血液样品中未检出莱姆病螺旋体。值得一提的是,以立克次体gro EL为参照基因设计引物,在样品中扩增出了1份立克次体阳性样品,且序列分析后为正确结果。这也是迄今为止本实验室第一次从血液样品中扩增出的立克次体的阳性结果。结论蜱传病原对我国乃至世界家畜养殖业造成了严重的危害,因此,厘清诸如巴贝斯虫,泰勒虫以及其他蜱传性细菌病病原在家畜中的感染及流行情况,能够对这些病原的防控提供参考依据。

关键词：伊犁牛羊蜱传疾病流行病学调查

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2014年春季伊犁地区蜱传性病原微生物分子流行病学调查

2014年春季伊犁地区蜱传性病原微生物分子流行病学调查

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

本实验于2014年春季对新疆伊犁地区五个县的牛、羊蜱传性疾病进行了调查,采集血样若干,提取基因组,运用PCR的方法在样品中检测包括巴贝斯虫、泰勒虫、无浆体、立克次体以及莱姆病螺旋体在内的共五类病原的感染情况,以了解我国新疆伊犁... 详细信息

本实验于2014年春季对新疆伊犁地区五个县的牛、羊蜱传性疾病进行了调查,采集血样若干,提取基因组,运用PCR的方法在样品中检测包括巴贝斯虫、泰勒虫、无浆体、立克次体以及莱姆病螺旋体在内的共五类病原的感染情况,以了解我国新疆伊犁地区蜱传疾病的感染率以及分布情况,为该区域蜱传性疾病的防制打下基础。在新疆伊犁地区选择了5个采样点,采集动物血液样品和蜱虫样本。采集的血样提取全血基因组,采集的蜱样鉴定种属后也提取基因组。利用经典的检测基因保守区域设计引物,运用PCR的方法检测血液基因组样品中的以上5类病原,并对检测结果进行分析。2014年在伊犁地区总共采集牛、羊血液样品共计233份,其中牛血液样品108份,羊血液样品125份。根据巴贝斯虫及泰勒虫18SrRNA序列设计通用引物,运用套式PCR的方法检测上述样品,共检出阳性123份(其中牛21份,羊102份),测序结果经比对后正确的有102份。通过序列分析,在这102份阳性样品中泰勒虫属有三种,分别是泰勒虫OT3(Theileria ***3)71份,水牛泰勒虫(Theileria buffeli)26份以及羊泰勒虫(Theileria ovis)1份;巴贝斯虫阳性样品有4份,为莫氏巴贝斯虫(Babesia motasi)。基于无浆体16S rRNA的基因序列设计引物,运用套式PCR检测上述样品,阳性结果共计122份(其中牛13份,羊109份)。通过序列分析,共有三种结果,分别是绵羊无浆体(Anaplasma ovis)68份,嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)51份以及Uncultured Anaplasma 3份。在上述血液样品中未检出莱姆病螺旋体。值得一提的是,以立克次体groEL为参照基因设计引物,在样品中扩增出了1份立克次体阳性样品,且序列分析后为正确结果。这也是迄今为止本实验室第一次从血液样品中扩增出的立克次体的阳性结果。蜱传病原对我国乃至世界家畜养殖业造成了严重的危害,因此,厘清诸如巴贝斯虫,泰勒虫以及其他蜱传性细菌病病原在家畜中的感染及流行情况,能够对这些病原的防控提供参考依据。

关键词：伊犁牛羊蜱传疾病流行病学调查

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残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)生物学特性分析

残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)生物学特性分析

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：王素艳陈荣贵赵卫东田占成任巧云陈泽罗金陈秋语李凯刘光远家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所新疆伊犁州动物疾病控制与诊断中心

目的残缘璃眼蜱属于专性外吸血寄生虫,能够传播多种病原体,特别是对环形泰勒虫的传播给畜牧业造成较大的损失。目前蜱的防治越来越多的应用免疫方法,但对残缘璃眼蜱防治的研究较少,同时对媒介蜱传播环形泰勒虫的防控过程研究基本没有;因... 详细信息

目的残缘璃眼蜱属于专性外吸血寄生虫,能够传播多种病原体,特别是对环形泰勒虫的传播给畜牧业造成较大的损失。目前蜱的防治越来越多的应用免疫方法,但对残缘璃眼蜱防治的研究较少,同时对媒介蜱传播环形泰勒虫的防控过程研究基本没有;因此,本试验通过对残缘璃眼蜱中肠、唾液腺中的活性分子研究,以期筛选出有效的控蜱及蜱传病候选抗原。方法本研究以残缘璃眼蜱饥饿成蜱为模板,cys500为引物扩增得到半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)保守区域;通过5’和3’RACE c DNA末端快速扩增技术获得CP基因全长序列。将CP基因ORF PCR产物经Eco R I和Not I双酶切后连接至表达载体p ET-30a,重组质粒导入感受态细胞BL21(DE3)中,37℃、1mmol/L IPTG条件下诱导表达。利用SDS-PAGE分析CP蛋白体外表达特征,Western blotting分析CP免疫原性,实时荧光定量进行CP不同发育阶段和组织定位。结果结果显示:CP基因序列全长为1192bp,其中保守区域为507bp,包含一个999bp的开放阅读框(ORF),编码332个氨基酸,等电点为5.53。BLAST分析得知,残缘璃眼蜱CP基因序列与Gen Bank中登录的小亚璃眼蜱半胱氨酸L样蛋白酶基因序列同源性为95%,且氨基酸序列中含有保守的中间型序列(ERFNIN),因此属于半胱氨酸L样蛋白酶。利用生物学软件分析得知,CP基因在不同蜱种间有很大的种属差异,但具有一定的保守性。连接到p ET-30a载体上成功表达,重组蛋白约为45ku;SDS-PAGE和Western blotting分析显示,融合蛋白以包涵体的形式存在,并和兔抗全蜱血清有较强的免疫反应,表明该蛋白具有良好的抗原反应原性。实时荧光定量分析显示,CP基因表达具有较强的选择性,组织中仅中肠有较高的表达丰度,其他组织表达丰度很低,基本可以忽略;蜱卵中该基因表达丰度较高,蜱吸血过程中基因表达丰度出现上调现象;因此该基因可能和卵的发育、吸血及血液消化相关。动物保护性试验和RNAi结果表明:蜱的吸血、饱血程度及产卵情况受到影响,证明CP与蜱卵的发育和生长发育有关。结论通过以上实验表明半胱氨酸蛋白酶在残缘璃眼蜱中可能与蜱吸血、宿主血液消化以及卵的发育等相关,可为抗蜱及蜱传病疫苗研制提供技术和理论支持。

关键词：残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease CP) 免疫分析保护性实验

来源：评论

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残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)生物学特性分析

残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)生物学特性分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

残缘璃眼蜱属于专性外吸血寄生虫,能够传播多种病原体,特别是对环形泰勒虫的传播给畜牧业造成较大的损失。目前蜱的防治越来越多的应用免疫方法,但对残缘璃眼蜱防治的研究较少,同时对媒介蜱传播环形泰勒虫的防控过程研究基本没有;因此,... 详细信息

残缘璃眼蜱属于专性外吸血寄生虫,能够传播多种病原体,特别是对环形泰勒虫的传播给畜牧业造成较大的损失。目前蜱的防治越来越多的应用免疫方法,但对残缘璃眼蜱防治的研究较少,同时对媒介蜱传播环形泰勒虫的防控过程研究基本没有;因此,本试验通过对残缘璃眼蜱中肠、唾液腺中的活性分子研究,以期筛选出有效的控蜱及蜱传病候选抗原。本研究以残缘璃眼蜱饥饿成蜱为模板,cys500为引物扩增得到半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)保守区域;通过5'和3'RACE cDNA末端快速扩增技术获得CP基因全长序列。将CP基因ORF PCR产物经EcoR I和Not I双酶切后连接至表达载体pET-30a,重组质粒导入感受态细胞BL21(DE3)中,37℃、1mmol/L-IPTG条件下诱导表达。利用SDS-PAGE分析CP蛋白体外表达特征,Western blotting分析CP免疫原性,实时荧光定量进行CP不同发育阶段和组织定位。结果显示:CP基因序列全长为1192bp,其中保守区域为507bp,包含一个999bp的开放阅读框(ORF),编码332个氨基酸,等电点为5.53。BLAST分析得知,残缘璃眼蜱CP基因序列与GenBank中登录的小亚璃眼蜱半胱氨酸L样蛋白酶基因序列同源性为95%,且氨基酸序列中含有保守的中间型序列(ERFNIN),因此属于半胱氨酸L样蛋白酶。利用生物学软件分析得知,CP基因在不同蜱种间有很大的种属差异,但具有一定的保守性。连接到pET-30a载体上成功表达,重组蛋白约为45ku;SDS-PAGE和Western blotting分析显示,融合蛋白以包涵体的形式存在,并和兔抗全蜱血清有较强的免疫反应,表明该蛋白具有良好的抗原反应原性。实时荧光定量分析显示,CP基因表达具有较强的选择性,组织中仅中肠有较高的表达丰度,其他组织表达丰度很低,基本可以忽略;蜱卵中该基因表达丰度较高,蜱吸血过程中基因表达丰度出现上调现象;因此该基因可能和卵的发育、吸血及血液消化相关。动物保护性试验和RNAi结果表明:蜱的吸血、饱血程度及产卵情况受到影响,证明CP与蜱卵的发育和生长发育有关。通过以上实验表明半胱氨酸蛋白酶在残缘璃眼蜱中可能与蜱吸血、宿主血液消化以及卵的发育等相关,可为抗蜱及蜱传病疫苗研制提供技术和理论支持。

关键词：残缘璃眼蜱半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease CP) 免疫分析保护性实验

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青海血蜱饱血雌蜱高毒力绿僵菌菌株的筛选

青海血蜱饱血雌蜱高毒力绿僵菌菌株的筛选

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：任巧云孙明关贵全刘志杰陈泽刘爱红李有全马米玲杨吉飞牛庆丽刘军龙韩雪清殷宏罗建勋家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所中国检验检疫科学研究院

青海血蜱为我国的特有蜱种,分布在如青海、宁夏、甘肃、四川、云南和西藏等西部高原地区,是绵羊和山羊特勒虫病的传播媒介,给畜牧业造成严重的经济损失。传统的控蜱方式主要依赖于化学药物,可随着3R(抗性resistance、再增猖獗resurgenc... 详细信息

青海血蜱为我国的特有蜱种,分布在如青海、宁夏、甘肃、四川、云南和西藏等西部高原地区,是绵羊和山羊特勒虫病的传播媒介,给畜牧业造成严重的经济损失。传统的控蜱方式主要依赖于化学药物,可随着3R(抗性resistance、再增猖獗resurgence、残留residue)问题的出现使得人们不得不寻找化学药物安全有效的替代物。对温血动物无害、环境友好、不易产生耐药性且对蜱具高效杀伤作用的绿僵菌也会成为人们对蜱进行绿色防控的重要致病因子。本试验采用体外浸渍法测定了6株绿僵菌在孢子浓度分别为10～6,10～7和10～8个孢子/毫升时对青海血蜱饱血雌蜱的杀伤效果,结果显示绿僵菌菌株***08和***13对青海血蜱的致病力较高,在浓度为10～8个孢子/毫升时,对青海血蜱饱血雌蜱的致死率均达到100%。这两株菌可为防控青海血蜱的候选菌株,为绿僵菌真菌杀蜱制剂的研究及生产应用奠定了基础。

关键词：青海血蜱绿僵菌生物防控昆虫病原真菌

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