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第五届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：任巧云陈泽罗金孙明关贵全殷宏刘光远罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

目的微小牛蜱是动物体表常见的一类体外寄生虫,可通过叮咬侵袭家畜和野生动物,有时也侵袭人,微小牛蜱给畜牧业造成严重经济损失,并且给人类健康和动物生产带来的威胁.随着人们对药物残留和环境污染等问题的关注,加之某些蜱耐药性虫株... 详细信息

目的微小牛蜱是动物体表常见的一类体外寄生虫,可通过叮咬侵袭家畜和野生动物,有时也侵袭人,微小牛蜱给畜牧业造成严重经济损失,并且给人类健康和动物生产带来的威胁.随着人们对药物残留和环境污染等问题的关注,加之某些蜱耐药性虫株的产生,人们越来越重视对蜱的生物防治等绿色防控方法的研究.方法本试验进行了13株白僵菌和7株绿僵菌对微小牛蜱饱血雌蜱的毒力测定,采用体外浸渍法将随机分组的微小牛蜱饱血雌蜱浸入不同浓度的孢子悬液中,浸渍30 s.在28℃、相对湿度85％的条件下放置15 d,每天观察微小牛蜱,每个处理设3个重复,以含0.05 ml/L吐温80的无菌水做对照.结果从中筛选出了4株高毒力菌株：3株白僵菌(BbAT01、***03、***13)和一株绿僵菌(***04),此四株菌在孢子浓度为108个孢子/ml时对蜱的致死率均达到100％.结论此4株真菌菌株可作为微小牛蜱生防制剂的候选菌株,为后续昆虫病原真菌杀蜱制剂的研究及生产应用提供了参考依据.

关键词：微小牛蜱昆虫病原真菌致病性

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基于16S rDNA的长角血蜱不同分布区的多态性分析

基于16S rDNA的长角血蜱不同分布区的多态性分析

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第五届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：陈泽任巧云罗金李凯罗建勋殷宏刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进... 详细信息

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进行多态性分析.结果长角血蜱存在8种单倍型，其中Ⅰ型和Ⅱ型最为常见，分别含有21和16个个体，其次为Ⅲ、Ⅳ型分别包括4和5个个体.Ⅴ-Ⅷ型均由单一个体构成.此外，同一地区的不同个体也包括几种不同的单倍型，其中北京和贵州独山的长角血蜱多态性最大(数量分别为4和3)，其次为湖北、广西和山东(单倍型均为2种)，云南、甘肃和河北的多态性最低(1种).结论我国分布的长角血蜱的16S rDNA具有较高的多态性，并具有一定的地区特异性.

关键词： 16S rRNA基因长角血蜱多态性分析

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长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析

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中国兽医科学 2013年第8期43卷 806-811页

作者：赵波刘光远罗金张萍田占成谢俊仁田美媛王芳芳袁小松中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了... 详细信息

为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。

关键词：长角血蜱 MESK基因生物信息学克隆真核表达

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羊口疮病的研究进展

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中国预防兽医学报 2013年第5期35卷 426-430页

作者：李慧霞朱学亮骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特... 详细信息

羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特征。该病最早发现于欧洲，

关键词：羊口疮口疮病传染性脓疱皮炎人畜共患接触性传染病病毒乳房

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甘肃、湖南和广东三省蜱体内嗜吞噬细胞无形体与伯氏疏螺旋体共感染研究(英文)

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中国人兽共患病学报 2013年第2期29卷 117-121页

作者：李雁康逢义杨吉飞孙彩琴刘志杰殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省寄生虫学重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所兰州730046 兰州园艺试验场兰州730083 兰州良种场兰州730084

目的嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体是由媒介蜱传播的引起人粒细胞无形体病和莱姆病的病原。目前,对两种病原在蜱体内共感染流行情况的研究相对较少。方法以甘肃、湖南和广东三个省采集到3个蜱种、共543份样品为研究对象,检测嗜吞噬细... 详细信息

目的嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体是由媒介蜱传播的引起人粒细胞无形体病和莱姆病的病原。目前,对两种病原在蜱体内共感染流行情况的研究相对较少。方法以甘肃、湖南和广东三个省采集到3个蜱种、共543份样品为研究对象,检测嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体在蜱体内的感染情况。结果嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体在不同地区采集到的蜱体内的感染率不同,分别为3.2%～20.0%和2.3%～19.3%。在检测的样品中,共发现有7份样品中同时感染嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体。青海血蜱、血红扇头蜱和微小牛蜱中均检测到这两种病原。结论青海血蜱、血红扇头蜱和微小牛蜱均能够携带嗜吞噬细胞无形体和伯氏疏螺旋体,可能为这两种病原在自然界的持续存在和循环提供了条件。此研究结果丰富了人粒细胞无形体病和莱姆病的流行病学信息,有利于提高这两种病的防控策略。

关键词：蜱嗜吞噬细胞无形体伯氏疏螺旋体流行

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microRNA碱基编辑特性的研究进展

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中国兽医科学 2013年第6期43卷 650-654页

作者：罗金刘光远袁小松王芳芳田占成谢俊仁王辉中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 牛津大学生态水文研究中心

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前... 详细信息

为了更好地了解microRNA分子中碱基编辑的产生机理,论述了microRNA序列碱基编辑特征,以及碱基编辑在生物组织、物种进化、神经发育等方面的特征,并就碱基编辑在microRNA中的研究方法进行了阐述。展望了碱基编辑在microRNA分子中的研究前景,以期为碱基编辑的生物学机制研究提供参考。

关键词： microRNA 碱基编辑研究进展

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细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的研究进展

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中国兽医科学 2013年第11期43卷 1206-1210页

作者：刘全元闫鸿斌娄忠子李立史万贵刘聪暖殷宏贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球... 详细信息

论述了细粒棘球绦虫G3基因型(水牛株)的分子遗传标记特征及变异情况、宿主范围、地理分布、流行病学意义,分析了G3基因型研究中存在的挑战,预测了G3基因型的未来研究方向,旨在给从事该领域研究的学者提供丰富的分子流行病学信息,为棘球蚴病分子流行病学调查和防治策略的制定提供理论依据和技术指导。

关键词：细粒棘球绦虫 G3基因型 cox1基因 nad1基因流行病学

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甘肃省景泰县羊无浆体病的诊断

甘肃省景泰县羊无浆体病的诊断

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：孙明刘志杰马米玲关贵全罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为建立羊无浆体病简便快捷的病原学检测方法,该文以马米玲等已建立的边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法,对甘肃省景泰县多地采集的219份田间样品进行羊无浆体ELISA检测,以PCR检测方法进行病原学的检测和验证.同时为进一步验证MSP... 详细信息

为建立羊无浆体病简便快捷的病原学检测方法,该文以马米玲等已建立的边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法,对甘肃省景泰县多地采集的219份田间样品进行羊无浆体ELISA检测,以PCR检测方法进行病原学的检测和验证.同时为进一步验证MSP5基因在边缘无浆体和羊无浆体之间的保守性,Western-blotting检测证实边缘无浆体重组蛋白在45 ku处与羊无浆体阳性血清反应,与羊其它疾病阳性血清均不反应.表明该重组蛋白适合作为羊无浆体病的诊断抗原.在被检的219份样品中,EL-ISA方法检测阳性率为34.7％(76/219),PCR方法阳性率为30.6％(67/219).证实该地区存在羊无浆体病,与以往调查结果相比,阳性率有所下降.利用边缘无浆体MSP5重组抗原建立的EILSA方法具有良好的特异性和敏感性,可以检测羊无浆体病,为羊无浆体病的血清学诊断及流行病学调查提供了手段.

关键词：羊无浆体病临床诊断酶联免疫吸附试验流行病学

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实验室条件下对青海血蜱生活史的观察

实验室条件下对青海血蜱生活史的观察

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：马米玲罗建勋关贵全陈泽刘志杰李有全任巧云刘爱红杨吉飞殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

研究青海血蜱的生活习性对防治蜱及蜱传病具有重要意义,笔者在实验室对其生活史作了观察.结果显示,青海血蜱生活史较长,为三宿主蜱,在实验室条件下,一个生活周期平均为176天(118～247天),一年一个世代.卵孵化的平均发育时期为34.44天;... 详细信息

研究青海血蜱的生活习性对防治蜱及蜱传病具有重要意义,笔者在实验室对其生活史作了观察.结果显示,青海血蜱生活史较长,为三宿主蜱,在实验室条件下,一个生活周期平均为176天(118～247天),一年一个世代.卵孵化的平均发育时期为34.44天;幼蜱喂养前期、喂养期、蜕皮前期分别为5.83、4.20和33.70天;若蜱的喂养前期、喂养期、蜕皮前期分别为3.88、5.30和46.50天;成蜱的喂养前期、喂养期、产卵前期和产卵期分别为2.60、11.40、8.50和19.35天.该研究结果发现饱血雌蜱的体重和卵重呈正相关关系(r=0.557,P＜0.05),雌蜱越重,产卵量越多.雌蜱生殖效率指数和生殖健康指数分别为5.49和4.98.研究结果还发现,相对较重的饱血若蜱(4.53±0.16毫克)蜕变成雌蜱,相对较轻的饱血若蜱(3.45±0.19毫克)蜕变成雄蜱(P＜0.001).青海血蜱成蜱性别比例为1:1.1(雄蜱:雌蜱).

关键词：兽医学青海血蜱实验室观察生活史

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近来在我国鉴定的一种羊巴贝斯虫血清学及血清流行病学

近来在我国鉴定的一种羊巴贝斯虫血清学及血清流行病学

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：关贵全李有全刘庆朱海殷宏罗建勋马米玲刘爱红任巧云王锦明杨吉飞李安岩刘志杰杜鹏飞家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

本研究以体外培养获得的裂殖子可溶性抗原建立了一种对本病原特异性的ELISA方法.通过应用371份阴性血清和112份阳性血清对该方法进行特异性和敏感性的评价结果显示,当阳性阈值确定为24.65％的抗体比率时,对应的特异性和敏感性为97.3％.... 详细信息

本研究以体外培养获得的裂殖子可溶性抗原建立了一种对本病原特异性的ELISA方法.通过应用371份阴性血清和112份阳性血清对该方法进行特异性和敏感性的评价结果显示,当阳性阈值确定为24.65％的抗体比率时,对应的特异性和敏感性为97.3％.同时,交叉反应实验结果显示,感染我国羊的其它主要梨形虫(莫氏巴贝斯虫、尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫)和羊无浆体的阳性血清与该可溶性抗原在western blot和ELISA中都没有交叉反应.应用两只实验感染羊的血清对该ELISA进行评价,结果显示,从感染后第二周开始,可以检测到特异性抗体,第四周后达到较高水平,高水平的抗体一直持续到第12周(实验结束时).最后,应用该建立的ELISA方法,检测了采自我国22个省份、50个县的3857份羊血清.结果显示,22个省份的阳性率存在较大差异,平均阳性率为31.66％.这些数据表明,本研究建立的ELISA方法可以用于羊巴贝斯虫未定种的血清流行病学调查,而且流调数据显示,该病原在我国大范围分布.另外,获得的血清学研究数据进一步确证,羊巴贝斯虫未定种为一新的巴贝斯虫种.

关键词：羊巴贝斯虫体外培养可溶性抗原血清流行病学

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