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中国农学会高新技术农业应用专业委员会2009年学术研讨会

作者：李志勇殷相平易咏竹张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将携带有口蹄疫Asia Ⅰ／JQ株P1-2A、3C基因的重组病毒rBm(P12A3C)感染家蚕蚕蛹，在蚕体内获的高效表达的口蹄疫空衣壳抗原。将蚕表达抗原试制疫苗免疫牛，进行空衣壳疫苗的免疫效力实验。结果表明，空衣壳疫苗抗Asia Ⅰ型10，000 BID50... 详细信息

将携带有口蹄疫Asia Ⅰ／JQ株P1-2A、3C基因的重组病毒rBm(P12A3C)感染家蚕蚕蛹，在蚕体内获的高效表达的口蹄疫空衣壳抗原。将蚕表达抗原试制疫苗免疫牛，进行空衣壳疫苗的免疫效力实验。结果表明，空衣壳疫苗抗Asia Ⅰ型10，000 BID50 Asia Ⅰ／AKT／03株攻击的免疫效力可达到6.47 PD50／头份。

关键词：家蚕杆状病毒载体口蹄疫空衣壳疫苗免疫效力

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狂犬病毒核蛋白在家蚕杆状病毒中的高效表达及其在小白鼠的免疫研究

狂犬病毒核蛋白在家蚕杆状病毒中的高效表达及其在小白鼠的免疫研...

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中国农学会高新技术农业应用专业委员会2009年学术研讨会

作者：殷相平易咏竹李志勇李江涛张韵张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将狂犬病毒(rabies virus，RV)核蛋白基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-N，pVL-N与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有RV核蛋白基因的重组病毒rBmNPV... 详细信息

将狂犬病毒(rabies virus，RV)核蛋白基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-N，pVL-N与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有RV核蛋白基因的重组病毒rBmNPV(N)。将获得的重组病毒rBmNPV(N)感染家蚕蚕蛹，双抗体夹心ELISA法检测证明，目的基因在蚕蛹中获得较高水平表达，用蚕蛹表达产物作抗原制备疫苗免疫Ba1b／c小白鼠，免疫动物均产生了特异性抗体，免疫后30 d用狂犬病毒CVS攻毒株攻击，获得了50％的保护。

关键词：狂犬病核蛋白家蚕杆状病毒载体基因克隆疫苗免疫特异性抗体

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口蹄疫病毒基因组的遗传变异剖析

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中国农业科学 2008年第9期41卷 2826-2834页

作者：陈豪泰张杰孙德惠马丽娜刘湘涛刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室

【目的】明确口蹄疫病毒基因组的结构特征及其变异与结构、功能的关系以及系统发生关系。【方法】利用DNAstar和Clustalx程序进行184个口蹄疫病毒基因组序列的同源性分析、多重排比。【结果】口蹄疫病毒基因组ORF大小有所差异,范围为696... 详细信息

【目的】明确口蹄疫病毒基因组的结构特征及其变异与结构、功能的关系以及系统发生关系。【方法】利用DNAstar和Clustalx程序进行184个口蹄疫病毒基因组序列的同源性分析、多重排比。【结果】口蹄疫病毒基因组ORF大小有所差异,范围为6963～7120 nt,编码2320～2339 aa的多聚蛋白。核苷酸和氨基酸序列的同源性,7个不同血清型间>77.6%和>78.3%,本研究发现了可能和生物学功能相关的新的保守和变异区域。【结论】口蹄疫病毒RNA的变异类型丰富和多样性程度较高,自然界存在的毒株可能大于血清学和测序发现的FMDV的毒株数目。

关键词：毒株数目口蹄疫遗传变异

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口蹄疫灭活疫苗研究进展

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动物医学进展 2008年第12期29卷 43-47页

作者：张淑刚张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

灭活疫苗仍然是当前口蹄疫免疫控制的主要疫苗,研制口蹄疫灭活疫苗具有重要的现实意义,其研制方法在不断丰富和完善。文章详细描述了口蹄疫灭活疫苗研制的重要步骤及其进展,包括毒株筛选,病毒生产、灭活、抗原浓缩、纯化和配苗及疫苗的... 详细信息

灭活疫苗仍然是当前口蹄疫免疫控制的主要疫苗,研制口蹄疫灭活疫苗具有重要的现实意义,其研制方法在不断丰富和完善。文章详细描述了口蹄疫灭活疫苗研制的重要步骤及其进展,包括毒株筛选,病毒生产、灭活、抗原浓缩、纯化和配苗及疫苗的质量控制。制苗毒株的选择是研制疫苗的首要问题,直接关系到疫苗的免疫效果;病毒灭活和随后的安全试验是在制备灭活FMD疫苗中最关键的步骤;抗原浓缩纯化和配苗是保证疫苗良好免疫效果的必需。最后阐述了口蹄疫灭活疫苗在口蹄疫防控中的作用。

关键词：口蹄疫灭活疫苗研制质量控制作用

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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

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首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会

作者：殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组，获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacI酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组... 详细信息

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组，获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacI酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次，病毒在细胞的病变时间缩短在20h以内。经测定，重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50达10-7.50/ml。用RT-PCR对重组腺病毒进行检测，可以检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段。重组腺病毒经口服免疫小白鼠，21天后用狂犬病毒CVS毒株进行脑内攻击，观察10天，免疫保护率达60％。

关键词：狂犬病毒 CVS毒株重组腺病毒生物学特性免疫保护糖蛋白核蛋白

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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究

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首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛

作者：殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacⅠ酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组... 详细信息

将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacⅠ酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次,病毒在细胞的病变时间缩短在20h以内。经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID达10/ml。用RT-PCR对重组腺病毒进行检测,可以检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段。重组腺病毒经口服免疫小白鼠,21天后用狂犬病毒CVS毒株进行脑内攻击,观察10天,免疫保护率达60%。

关键词：狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫

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