检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2011年第4期41卷 433-440页

作者：曾爽何小兵陈国华房永祥贾怀杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

概述了Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的基本结构、识别的配体及亚细胞定位,重点介绍了TLRs信号转导通路的类型、作用机制以及在信号转导通路中起调控作用的关键分子,提出了对TLRs信号转导通路的研究必将有助于安全高效新型疫苗... 详细信息

概述了Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的基本结构、识别的配体及亚细胞定位,重点介绍了TLRs信号转导通路的类型、作用机制以及在信号转导通路中起调控作用的关键分子,提出了对TLRs信号转导通路的研究必将有助于安全高效新型疫苗、药物的设计和研发。

关键词： Toll样受体信号转导通路调控分子天然免疫

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线虫线粒体基因组全序列分析研究进展

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中国农业科学 2011年第6期44卷 1255-1265页

作者：贾万忠闫鸿斌倪兴维曹平娄忠子付宝权史万贵中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃省动物疫病控制中心

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应... 详细信息

线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应用和今后发展方向做一简要综述。迄今,已完成46种线虫的线粒体基因组全序列测定和分析。线虫线粒体基因组的碱基组成、基因结构、基因变异等方面有其特点,这些分析结果为线形动物门线粒体功能基因组学研究、比较基因组学研究、分子分类学研究、虫种(株)鉴定与分类、分子系统发育和进化分析等提供了重要依据和指导作用,为线虫病诊断、分子流行病学调查等分子检测方法的建立提供参考依据。

关键词：线虫线粒体基因组基因结构分类

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DNA条形码技术在兽医寄生虫学研究中的应用

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中国兽医科学 2011年第11期41卷 1206-1210页

作者：苟惠天关贵全殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃兰州730046

阐述了DNA条形码的概念、DNA条形码基因的筛选方法、DNA条形码的优势与劣势和分析方法,概述了近几年DNA条形码在兽医寄生虫方面的应用情况,旨在引起广大读者对该技术的关注。

关键词：兽医寄生虫 DNA条形码物种鉴定

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伯氏疏螺旋体外膜蛋白C的表达及抗原性分析

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中国兽医科学 2011年第7期41卷 661-665页

作者：付钰广关贵全牛庆丽杨吉飞刘志杰李有全马米玲任巧云刘爱红彭欲率罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

以伯氏疏螺旋体SZ(***)、BO23(***)、B31(*** sensu stricto)菌株的外膜蛋白OspC基因为靶基因,将PCR扩增出的目的片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中构建重组质粒进行表达,表达的蛋白用MagneGSTTMProtein Purification System纯化,之后用此3株菌株免疫羊制备的阳性血清做Western-blot,检测该重组蛋白。证明这3个基因型菌株的重组OspC具有抗原性及交叉反应性。本研究表达的重组蛋白OspC(SZ菌株)为建立羊体内伯氏疏螺旋体抗体的ELISA检测方法奠定了基础。

关键词：伯氏疏螺旋体 OspC基因克隆表达抗原性分析

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猪IL-2基因在毕赤酵母中的高效表达及生物活性分析

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畜牧兽医学报 2011年第4期42卷 551-556页

作者：陈国华贾怀杰曾爽房永祥李小庆景志忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

本研究根据密码子偏爱原则设计猪IL-2引物,克隆其基因后构建pPIC9k-IL-2重组表达载体,线性化后电转化毕赤酵母GS115,获得优化密码子的重组酵母转化子;再用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,不同条件下进行甲醇诱导表达。结果表明:... 详细信息

本研究根据密码子偏爱原则设计猪IL-2引物,克隆其基因后构建pPIC9k-IL-2重组表达载体,线性化后电转化毕赤酵母GS115,获得优化密码子的重组酵母转化子;再用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,不同条件下进行甲醇诱导表达。结果表明:经PCR鉴定IL-2基因已整合到酵母基因组中。表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现相对分子质量为16、20ku两条目的蛋白表达带,脱糖基化分析表明目的蛋白得到了适度的糖基化修饰,Western blotting分析显示表达的蛋白具有良好的免疫反应性,分子筛纯化可以获得纯度为95%的蛋白质,淋巴细胞增殖活性分析表明所得的蛋白质具有促淋巴细胞增殖的活性。毕赤酵母表达系统可以高效地表达具有生物活性的重组猪IL-2蛋白分子。

关键词：猪IL-2基因毕赤酵母活性分析

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羊源巴贝斯虫未定种甘肃敦煌株的发现

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中国兽医科学 2011年第9期41卷 881-885页

作者：马米玲关贵全苟惠天杨吉飞万玉林李有全刘爱红任巧云陈泽王朝文刘志杰罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采用动物接种法将采自甘肃敦煌的15只绵羊血液混合后感染1只除脾绵羊,感染后逐日做血涂片检查。结果显示,在感染后第10天的血片上出现了1种大型巴贝斯虫。虫体形态以双梨子形、单梨子形、圆形及卵圆形为主。在感染后第12天,感染羊体温升... 详细信息

采用动物接种法将采自甘肃敦煌的15只绵羊血液混合后感染1只除脾绵羊,感染后逐日做血涂片检查。结果显示,在感染后第10天的血片上出现了1种大型巴贝斯虫。虫体形态以双梨子形、单梨子形、圆形及卵圆形为主。在感染后第12天,感染羊体温升至41.1℃。染虫率达到0.125%,之后逐渐下降。无菌采集该羊血液,提取全血基因组,用梨形虫通用引物进行PCR扩增全长18SrRNA基因,得到长约1 700bp的片段,将其克隆并测序(登录号:HQ730762),与GenBank中的其他巴贝斯虫的序列进行比较,发现其与新疆巴贝斯虫未定种的同源性最高,达到99.8%。本研究发现甘肃敦煌又是一个新疆羊巴贝斯虫未定种的疫源地。

关键词：绵羊血液巴贝斯虫染虫率 18S rRNA 聚合酶链反应

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猪γδ T淋巴细胞亚群的研究进展

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 646-650页

作者：李玩生曾爽陈国华景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

在概述猪γδ T淋巴细胞亚群的发现、组织分布及其细胞所占比例的基础上,重点介绍了其基因结构与多样性以及细胞的功能和抗原识别的机制,以加深对猪天然免疫应答独特性的理解。

关键词：猪γδ T淋巴细胞 T细胞抗原受体组织分布基因结构天然免疫

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基于18S rRNA基因序列的我国马梨形虫分类学地位分析

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动物分类学报 2011年第1期36卷 99-103页

作者：罗金刘光远田占成谢俊仁张萍中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫原病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其... 详细信息

为从分子水平上阐明我国马梨形虫的种属分类特征。根据GenBank中登录的马梨形虫18SrRNA基因序列,在其高变区设计引物。PCR扩增获得大小分别为913bp、451bp的目的片段。将该片段克隆至pMD-18T载体后进行序列测定,并和GenBank上登录的其他地方株梨形虫18SrRNA基因序列进行同一性分析并构建系统发生树。分析显示,之前被称作马巴贝斯虫的虫种和泰勒虫虫种有着更密切的亲缘关系,在进化发育过程中处于同一种系,而与巴贝斯虫为明显的2个分支。我国驽巴贝斯虫肇源株与西班牙分离株(AY534883.1)仅有较小差异,其同源性高达91.8%。马泰勒虫肇源株与西班牙分离株(DQ287951.1,AY150064.2)同源性均高于91.4%。以上分析显示我国马梨形虫地方株和西班牙地方株亲缘关系最近,而与其他地方株差异相对较大。因此我国肇源株马梨形虫和西班牙地方株同属于Atbara8。

关键词：马梨形虫马泰勒虫驽巴贝斯虫 18S rRNA 系统发育分类学

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猪瘟病毒GSLZ株的分离与鉴定

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中国兽医科学 2011年第2期41卷 131-137页

作者：何小兵贾怀杰陈国华房永祥李玩生曾爽景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名... 详细信息

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因。经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株。对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株以及国内外分离株的同源性为83.1%～99.8%,预测的抗原表位与中国C株相比发生了漂移。将GSLZ分离株细胞培养物分别接种家兔和仔猪,结果家兔无体温变化,而仔猪可复制出典型的猪瘟临床症状和病理变化。表明,分离的GSLZ株是1株CSFV野毒株,其对仔猪有很强的毒力,但不引起家兔发病,能产生免疫反应。

关键词：猪瘟病毒分离鉴定

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旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因TsCystatin1的克隆及序列分析

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 569-574页

作者：姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的... 详细信息

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行了预测分析。结果表明,TsCystatin1 cDNA序列含有一个由666个核苷酸组成的开放阅读框架,编码由221个氨基酸残基组成的多肽,蛋白分子质量理论值为24.3ku,理论等电点为4.44。TsCystatin1第1～25位氨基酸残基为信号肽序列,具有半胱氨酸蛋白酶抑制剂的保守序列QVVAG,其C末端具有3处N-糖基化位点以及4个链内二硫键所需的半胱氨酸残基。该蛋白的二级结构中α螺旋占18.6%,β折叠占23.5%,其余57.9%为转角。结构域分析表明,该蛋白具有一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域,属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族2,与其他线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的同源性较高。

关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂克隆序列分析

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