检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2011年第1期33卷 76-79页

作者：李文卉盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠罗建勋 BLAGA R 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca 400372Romania

为原核表达Tm16和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头蚴原头节基因组DNA为模板分别扩增Tm16和Tm18抗原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表... 详细信息

为原核表达Tm16和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头蚴原头节基因组DNA为模板分别扩增Tm16和Tm18抗原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表达质粒pGEX-Tm16和pGEX-Tm18。转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物并进行纯化。结果显示:在大肠杆菌中表达出带有GST标签的大小约为39.6 ku和39.4 ku的重组蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖树脂纯化得到高纯度的可溶性的GST-Tm16及GST-Tm18重组蛋白,western blot分析表明重组蛋白均能够被兔抗GST单克隆抗体特异性识别。

关键词：多头带绦虫 Tm16 Tm18 原核表达

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蛋白质组学研究技术及其在弓形虫研究中的应用

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畜牧与兽医 2011年第2期43卷 91-94页

作者：周东辉赵付荣袁子国朱兴全林瑞庆华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

蛋白质组学是生命科学研究的一种重要的高通量方法,本文介绍了蛋白质组学的研究内容及主要技术,并对蛋白质组学在弓形虫研究中的应用进行了综述。

关键词：蛋白质组蛋白质组学双向电泳质谱弓形虫

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旋毛虫p53糖蛋白抗原研究进展

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动物医学进展 2011年第1期32卷 81-85页

作者：王鸿盛付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

旋毛虫p53糖蛋白是旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原的主要抗原组分之一,具有肌幼虫期特异表达特性,主要定位在肌幼虫β-杆细胞。不同旋毛虫种p53糖蛋白氨基酸序列相对保守,但抗原性有差异,在同一种内变异极少,具有种及属特异性抗原表位。论文... 详细信息

旋毛虫p53糖蛋白是旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原的主要抗原组分之一,具有肌幼虫期特异表达特性,主要定位在肌幼虫β-杆细胞。不同旋毛虫种p53糖蛋白氨基酸序列相对保守,但抗原性有差异,在同一种内变异极少,具有种及属特异性抗原表位。论文就旋毛虫p53糖蛋白抗原的分子结构、不同发育时期的特异性表达、抗原性等方面的研究进展进行综述。

关键词：旋毛虫 p53糖蛋白抗原

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非洲猪瘟病毒环介导恒温扩增快速检测技术的建立及应用

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中国动物传染病学报 2011年第4期19卷 7-12页

作者：杨吉飞关贵全刘志杰汪月凤李有全马米玲刘爱红任巧云苟惠天杜鹏飞罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室兰州730046

本研究基于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。

关键词：环介导恒温扩增技术聚合酶链式反应非洲猪瘟诊断

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驽巴贝斯虫病PCR检测方法的建立和应用

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中国畜牧兽医 2011年第7期38卷 193-195页

作者：罗金刘光远谢俊仁田占成沈辉王芳芳孙晓林陈荣贵王海军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 新疆伊犁州动物疾病控制与诊断中心新疆伊犁735000 新疆新源县畜牧兽医站新疆新源830000

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6... 详细信息

根据驽巴贝斯虫(Babesia caballi)18S rRNA基因序列设计1对特异性引物,扩增出452 bp核苷酸片段,建立了检测驽巴贝斯虫病的PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法最低能检出0.01 fg/μL驽巴贝斯虫DNA模板。特异性试验结果显示,在被检测的6个巴贝斯虫株中,仅驽巴贝斯虫株能扩增出特异性片段,马泰勒虫、双芽巴贝斯虫、莫氏巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫、大巴贝斯虫的扩增结果均为阴性。对45份马属动物血样进行检测,本研究建立的PCR方法测得驽巴贝斯虫病的阳性率为26.67%(12/45),与显微镜检测方法进行了比较,结果显示PCR检测方法可显著提高驽巴贝斯虫的检出率。

关键词：驽巴贝斯虫 PCR诊断方法应用

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一种羊无浆体环介导恒温扩增方法的建立

一种羊无浆体环介导恒温扩增方法的建立

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：马米玲刘志杰关贵全杨吉飞李有全刘爱红任巧云陈泽罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

羊无浆体是寄生于小反刍兽红细胞内的一种立克次氏体病原。环介导恒温扩增(LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,它能在等温条件下高效、快速、特异的扩增靶序列。本研究中,一种羊无浆体环介导恒温扩增方法被建立,引物设计基于它的主要表面蛋... 详细信息

羊无浆体是寄生于小反刍兽红细胞内的一种立克次氏体病原。环介导恒温扩增(LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,它能在等温条件下高效、快速、特异的扩增靶序列。本研究中,一种羊无浆体环介导恒温扩增方法被建立,引物设计基于它的主要表面蛋白4(MSP4)基因。本方法可以在65℃,30分钟完成。用几株羊无浆体分离株、边缘无浆体卢氏株、支原体、衣原体、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫及羊巴贝斯虫新疆分离株做交叉反应,发现该方法除于几株羊无浆体分离株有反应外,其它均未反应,证明了该方法特异性良好,并进一步将LAMP产物通过用EcoRⅠ酶切验证。用该方法和常规PCR检测了227份田间样品。LAMP方法检测的敏感性是94.45%,总之,该LAMP方法是一种高效、快速、特异的诊断羊无浆体感染的方法。

关键词：羊无浆体环介导恒温扩增分离株

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用不同白僵菌中国分离株对青海血蜱饱血雌蜱进行生物防控

用不同白僵菌中国分离株对青海血蜱饱血雌蜱进行生物防控

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：任巧云孙明关贵全李有全刘志杰刘爱红马米玲牛庆丽刘军龙殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室

采用浸渍法测定了七株白僵菌对青海血蜱饱血雌蜱的致死率。经过14天的观察,发现菌株***1,***5,and ***7在10～8孢子/mL时致死率达到100%。结果显示此三株菌对青海血蜱饱血雌蜱具高致病性,可作为青海血蜱生物防控的候选菌株。

关键词：青海血蜱中国分离株生物防控白僵菌

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羊泰勒clone88基因的克隆、表达及特性分析

羊泰勒clone88基因的克隆、表达及特性分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会

作者：汪月风刘志杰李有全陈泽杨吉飞殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室

我国泰勒虫病是由尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫感染绵羊和山羊引起的血液原虫病,它们的传播媒介为青海血蜱和长角血蜱。该病在我国西北地区广泛分布,危害严重。本研究从构建好的尤氏泰勒虫红细胞阶段裂殖子cDNA文库中筛选出具有潜在抗原性的... 详细信息

我国泰勒虫病是由尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫感染绵羊和山羊引起的血液原虫病,它们的传播媒介为青海血蜱和长角血蜱。该病在我国西北地区广泛分布,危害严重。本研究从构建好的尤氏泰勒虫红细胞阶段裂殖子cDNA文库中筛选出具有潜在抗原性的基因clone88为基础,利用生物信息学软件分析其功能结构域,并有目的性地对该基因进行重组表达,通过分子生物学和免疫学手段,验证其功能。发现clone88是一个潜在的抗原基因,具有信号肽,跨膜结构域,成功构建出原核表达载体在大肠杆菌中进行原核表达。通过镍柱获得纯度较高的重组蛋白,western blot分别检测其与感染尤氏泰勒虫羊的阳性血清及感染吕氏泰勒虫羊的阳性血清的反应性,结果显示前者有特异的反应条带,后者无反应性。即说明该基因具有良好的免疫原性,利用该重组蛋白作为抗原可检测羊尤氏泰勒虫的感染。

关键词：阳性血清吕氏泰勒虫 clone88 特性分析

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微小牛蜱饱血雌蜱高毒力绿僵菌菌株的筛选及应用

微小牛蜱饱血雌蜱高毒力绿僵菌菌株的筛选及应用

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会