检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽农业科学 2009年第24期37卷 11450-11452,11463页

作者：和燕玲房永祥陈国华刘磊景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学甘肃兰州730070

[目的]获得高表达量的蛋白,为进一步研制单克隆抗体提供较好的免疫原,同时也可为TLR7胞外区该片断蛋白未知区域的结构和功能研究奠定基础。[方法]应用PCR技术从重组质粒pcDNA3.1/CT-GFP-pTLR7上扩增出编码猪TLR7基因胞外区N端第27～202... 详细信息

[目的]获得高表达量的蛋白,为进一步研制单克隆抗体提供较好的免疫原,同时也可为TLR7胞外区该片断蛋白未知区域的结构和功能研究奠定基础。[方法]应用PCR技术从重组质粒pcDNA3.1/CT-GFP-pTLR7上扩增出编码猪TLR7基因胞外区N端第27～202位氨基酸序列,利用BamHⅠ和HindⅢ酶切位点将其插入到原核表达载体PET30a中,重组质粒转化BL21(DE3)后,在不同条件下诱导表达。[结果]经SDS-PAGE分析表明,重组菌表达出约26 kD的融合蛋白,并证实主要以包涵体形式表达,其最佳诱导表达条件是37℃、0.5 mmol/LIPTG诱导6 h,表达量可接近50%;纯化的重组蛋白免疫小鼠后,间接ELISA检测抗体效价,结果该蛋白免疫BALB/c小鼠效价达105。[结论]TLR7胞外区该片断重组蛋白具有很好的抗原性,可以作为单克隆抗体研制的免疫原。

关键词：猪TLR7胞外区片段重组蛋白抗原性

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多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达

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中国兽医科学 2009年第3期39卷 251-256页

作者：李永光李文卉李航盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林贾万忠 Radu Blaga 付宝权甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室 College of Veterinary Medicine University of Agricultural Sciences and Veterinary MedicineCluj-Napoca 400372Romania

从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个... 详细信息

从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白。对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性。

关键词：多头带绦虫多头蚴硫氧还蛋白过氧化物酶重组蛋白免疫原性

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豆状囊尾蚴人工感染家兔抗体水平的消长

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中国兽医科学 2009年第4期39卷 283-286页

作者：王晓霞骆学农孙晓林于三科才学鹏西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数。同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况。结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,... 详细信息

取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数。同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况。结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,且抗体水平逐步上升,第8周达到最高水平,直至第10周扑杀时仍呈较高的阳性水平。抗体水平随感染数量的增加而升高,虫体负荷随感染强度的增加而逐步升高,感染虫体数量的多少对抗体出现的时间影响不大。研究结果为该病的流行病学调查及免疫预防奠定了基础。

关键词：家兔豆状囊尾蚴试验模型抗体水平酶联免疫吸附试验

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猪白细胞抗原复合体Ⅰ类和Ⅱ类研究进展

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生物技术通讯 2009年第6期20卷 895-900页

作者：莫斯科房永祥冯海燕景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

猪主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原复合体(SLA),是猪基因组中基因密度最高的区域之一,也是多态性最高的区域。许多研究表明SLA在抗原提呈及免疫调节等方面起着重要的作用,其基因及基因组学研究在以猪为替代模型的人-猪器官移植、... 详细信息

猪主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原复合体(SLA),是猪基因组中基因密度最高的区域之一,也是多态性最高的区域。许多研究表明SLA在抗原提呈及免疫调节等方面起着重要的作用,其基因及基因组学研究在以猪为替代模型的人-猪器官移植、癌症、变态反应、猪的生产数量性状及对感染性疾病的应答、疫苗研制等方面都是热点。我们就目前Ⅰ类和Ⅱ类SLA分子功能基因多态性及与机体免疫水平、抗病育种和生产性状的相关性作一综述。

关键词：猪白细胞抗原多态性抗病育种免疫水平

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蜱类防治研究进展

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天津农业科学 2009年第6期15卷 49-50页

作者：任巧云罗建勋殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

从化学防治、遗传防治、免疫防治和生物防治等方面介绍了蜱的防治概况。

关键词：蜱防治进展

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猪囊尾蚴rTS-CC18蛋白的原核表达、纯化及其抗原性分析

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中国病毒病杂志 2009年第3期11卷 161-164页

作者：张少华才学鹏贾万忠骆学农刘红霞赵松波景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

目的制备猪带绦虫囊尾蚴rTS-CC18抗原并对其抗原性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法用PCR方法从重组质粒pGEM-TS-CC18中扩增TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高... 详细信息

目的制备猪带绦虫囊尾蚴rTS-CC18抗原并对其抗原性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法用PCR方法从重组质粒pGEM-TS-CC18中扩增TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株。采用Ni-FF亲和层析方法提纯表达蛋白。Western blotting及间接ELISA检测重组蛋白的反应活性。结果Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.5 mmol/LIPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性rTS-CC18蛋白,其相对分子质量约16×103。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应;间接ELISA检测血清抗体结果表明:纯化的rTS-CC18蛋白与全囊虫抗原的相对特异性达100.0%,相对敏感性达84.0%,总符合率为94.3%。结论成功制备了猪囊尾蚴rTS-CC18抗原,其特异性、敏感性及稳定性良好,对诊断猪囊尾蚴病及开发诊断制剂具有潜在应用价值。

关键词：猪囊尾蚴 rTS-CC18抗原原核表达纯化抗原性

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猪囊尾蚴rTS-CC18蛋白的原核表达、纯化及其抗原性分析

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中国自然医学杂志 2009年第3期10卷 161-164页

作者：张少华才学鹏贾万忠骆学农刘红霞赵松波景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

关键词：猪囊尾蚴 rTS-CC18抗原原核表达纯化抗原性

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羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建

羊泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆及真核表达载体的构建

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：刘爱红关贵全刘军龙李有全马米玲牛庆丽任巧云殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室

提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因。并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-T Easy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切消化,与毕赤酵母分... 详细信息

提取羊泰勒虫裂殖子总RNA,用特异性引物扩增出其主要表面蛋白P32基因。并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-T Easy载体上,经PCR和EcoRⅠ酶切鉴定均为阳性的重组质粒进行了测序和分析。随后将该基因从克隆载体上双酶切消化,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-MP-SP-P32,转化大肠埃希氏菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确。

关键词：羊泰勒虫表面蛋白P32基因真核表达载体

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一株白僵菌的分离鉴定及其对微小牛蜱的致病力研究

一株白僵菌的分离鉴定及其对微小牛蜱的致病力研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：任巧云关贵全李有全马米玲刘爱红刘军龙牛庆丽罗建勋殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一类广谱性昆虫病原真菌,能侵染15个目149个科的700多种昆虫和6科、10余种蜱螨。因其有致病性强、易于培养、原料价廉易得、对温血动物无害、不污染环境等诸多优点,从而成为目前国内外研究和应用最广... 详细信息

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一类广谱性昆虫病原真菌,能侵染15个目149个科的700多种昆虫和6科、10余种蜱螨。因其有致病性强、易于培养、原料价廉易得、对温血动物无害、不污染环境等诸多优点,从而成为目前国内外研究和应用最广泛的昆虫病原真菌之一。为了得到用于防治微小牛的高毒力菌株,本实验从野外微小牛蜱(Rhipicephalus(Boophilus)microplus)饱血雌蜱体表分离出一株白僵菌,通过

关键词：微小牛蜱白僵菌昆虫病原真菌分离鉴定

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微小牛蜱4D8基因原核表达及免疫原性分析

微小牛蜱4D8基因原核表达及免疫原性分析

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：刘军龙关贵全李有全马米玲刘爱红任巧云殷宏罗建勋家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

为进行抗微小牛蜱疫苗的研究,本研究通过Gene Bank已知微小牛蜱的4D8基因核苷酸序列设计一对表达性引物。提取微小牛蜱幼蜱总RNA,反转录合成双链cDNA,用设计的表达性引物扩增出4D8基因,扩增得到的核苷酸长486bp,编码161个氨基酸,该蛋白... 详细信息

为进行抗微小牛蜱疫苗的研究,本研究通过Gene Bank已知微小牛蜱的4D8基因核苷酸序列设计一对表达性引物。提取微小牛蜱幼蜱总RNA,反转录合成双链cDNA,用设计的表达性引物扩增出4D8基因,扩增得到的核苷酸长486bp,编码161个氨基酸,该蛋白预计分子量为18KDal。将该基因亚克隆到原核表达载体p GEX4T-1,构建重组原核表达载体p GEX4T-1-4D8,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,可成功表

关键词：微小牛蜱免疫原性分析原核表达

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