检索结果-内蒙古大学图书馆

甘肃畜牧兽医 2016年第1期46卷 81-82,84页

作者：李知新刘光远赵燕田进梅张学军张和平吴润甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 宁夏动物疾病预防控制中心宁夏银川750011

比较两个弓形虫抗体检测试剂盒检测结果的一致性,为流行病学调查和临床诊断筛选可合理使用的商品化试剂盒。对510份猪血清分别进行弓形虫抗体IHA和ELISA检测,应用Kappa检验比较两种试剂盒检测结果的一致性并进行分析,用x^2检验分析差异... 详细信息

比较两个弓形虫抗体检测试剂盒检测结果的一致性,为流行病学调查和临床诊断筛选可合理使用的商品化试剂盒。对510份猪血清分别进行弓形虫抗体IHA和ELISA检测,应用Kappa检验比较两种试剂盒检测结果的一致性并进行分析,用x^2检验分析差异性。两种试剂盒联合检出79份阳性,阳性符合率为67.52%,阴性符合率为95.17%,总符合率为88.82%。x^2检验差异显著(x^2=228.23,p=0.00);u检验值为15.89,两种产品的一致性为中度一致(Kappa值=0.66)。所以弓形虫病IHA检测试剂盒可作为现场收益流行病学调查,而弓形虫Ig G抗体ELISA检测试剂盒适合辅助临床检测和诊断。x^2检验比较两种试剂盒具有局限性。u检验排除偶然性造成的一致程度,与Kappa检验结合可比较一致性。弓形虫抗体检测要根据实况选择不同的试剂盒。

关键词：弓形虫 Kappa检验 x2检验 u检验 IHA ELISA

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弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：曹丽艳张德林张燕丽芦赟蔡志杰王艳华赵晋军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核... 详细信息

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接ELISA检测,小鼠免疫后产生了较高的抗体;动物保护性实验表明,虽然与对照组相比免疫组小鼠存活时间有一定的延长,但差异无显著性。结论成功构建了弓形虫SAG1重组表达质粒,SAG1蛋白疫苗诱导小鼠的免疫保护力不强。

关键词：弓形虫表面抗原1 克隆表达抗原性分析

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多头带绦虫脑多头蚴cDNA表达文库的构建及初步分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2011年第3期18卷 139-146页

作者：李文卉王建魁盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠罗建勋 RaduBlaga 付宝权甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 兰州市七里河区动物疫病预防控制中心兰州730050 UniversityofAgriculturalSciencesandVeterinaryMedicine Cluj-Napoca400372Romania

从甘肃景泰羊源脑多头蚴原头节提取总RNA，以Oligo（dT）纤维素柱纯化mRNA，利用LambdaZAPIIXR文库构建试剂盒构建了脑多头蚴eDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR，确定文库重组率和插入外源基因片段大小，鉴定文... 详细信息

从甘肃景泰羊源脑多头蚴原头节提取总RNA，以Oligo（dT）纤维素柱纯化mRNA，利用LambdaZAPIIXR文库构建试剂盒构建了脑多头蚴eDNA表达文库。从构建的原始文库随机挑选单个噬菌斑进行PCR，确定文库重组率和插入外源基因片段大小，鉴定文库质量。结果表明脑多头蚴eDNA表达文库的原始库容量为1．0×10。pfu，扩增后文库滴度为1．6×10^9pfu／mL。随机挑选的165个噬菌斑克隆中，0．25kb以上的克隆155个，重组率为93．9％，对其中0．5kb以上的115个克隆测序共获得104个表达序列标签（EST），分析后得到96个单一EST序列（UniqueEST），其中20个EST与绦虫基因有同源性，38个EST与吸虫基因有同源性，4个EST与线虫基因有同源性，17个EST与其他物种有同源性，其余17个EST没有同源基因。这些EST编码的氨基酸序列有多头带绦虫六钩蚴Tml6抗原、猪带绦虫副肌球蛋白、猪带绦虫免疫原蛋白Ts76等绦虫抗原的同源蛋白以及烯醇化酶等一些酶类、热休克蛋白、肌动蛋白、核糖体蛋白等同源蛋白。

关键词：多头带绦虫脑多头蚴 cDNA表达文库表达序列标签

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基于16S rDNA的长角血蜱不同分布区的多态性分析

基于16S rDNA的长角血蜱不同分布区的多态性分析

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第五届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：陈泽任巧云罗金李凯罗建勋殷宏刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进... 详细信息

目的调查长角血蜱在我国的分布现状，并基于16S rDNA序列对其进行多态性分析.方法用PCR技术克隆长角血蜱16S rDNA序列，其长度约为430 bp.利用Clustal X2.0.11对这些基因序列进行比对，然后用TCS 1.2.1进行不同地理分布的长角血蜱进行多态性分析.结果长角血蜱存在8种单倍型，其中Ⅰ型和Ⅱ型最为常见，分别含有21和16个个体，其次为Ⅲ、Ⅳ型分别包括4和5个个体.Ⅴ-Ⅷ型均由单一个体构成.此外，同一地区的不同个体也包括几种不同的单倍型，其中北京和贵州独山的长角血蜱多态性最大(数量分别为4和3)，其次为湖北、广西和山东(单倍型均为2种)，云南、甘肃和河北的多态性最低(1种).结论我国分布的长角血蜱的16S rDNA具有较高的多态性，并具有一定的地区特异性.

关键词： 16S rRNA基因长角血蜱多态性分析

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多头带绦虫脑多头蚴microRNA测序鉴定

多头带绦虫脑多头蚴microRNA测序鉴定

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会

作者：李文卉张念章曲自刚杨洋李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

目的脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫(脑多头蚴)寄生于牛羊等草食动物大脑,引发的一种严重的致死性寄生虫病,人也可作为中间宿主被感染,该病给社会经济和人类健康带来极大影响。小分子RNA是生物体内一类重要的特殊分子,诱导基因沉... 详细信息

目的脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫(脑多头蚴)寄生于牛羊等草食动物大脑,引发的一种严重的致死性寄生虫病,人也可作为中间宿主被感染,该病给社会经济和人类健康带来极大影响。小分子RNA是生物体内一类重要的特殊分子,诱导基因沉默,参与细胞生长、发育、基因转录和翻译等诸多生命活动的调控过程。方法本研究应用Illumina深度测序技术对多头带绦虫的幼虫脑多头蚴进行了microRNA(miRNA)测序和生物信息学分析。结果共获得11,352,405条s RNA序列,长度为21 nt的占16.78%,20 nt和22nt的序列各自分别占13.00%和13.73%。其中有1,686,847条(14.86%)能够匹配上多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)基因组。构建了miRNA表达谱,其中表达量较高的两个家族为miR-71和miR-2476。比对上Rfam(9.1)数据库中非编码RNA的小RNA,得出22613条rR NA,1662条snR NA,206条snoR NA,16,511条tR NA以及610,928条其它序列。应用Mireap软件预测到候选miRNA种数为150种,总表达量为10,288。其中长度为20 nt和21nt的候选miRNA的首位碱基各自偏向于A。结论对多头带绦虫脑多头蚴miRNA的报道将有助于更好的理解该寄生虫的复杂生物学,并对类似相关绦虫miRNA的研究提供了参考依据。

关键词：多头带绦虫多头蚴 miRNA

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绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员的鉴定及结构分析

绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员的鉴定及结构分析

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：郭爱疆张少华王帅侯俊玲李君君魏艳玲骆学农才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组成,分为stefins,cystatins and kininogens三个亚家族。研究报道线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿主免疫应答、适应寄生生活中发挥着重要作用。本研究... 详细信息

半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组成,分为stefins,cystatins and kininogens三个亚家族。研究报道线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿主免疫应答、适应寄生生活中发挥着重要作用。本研究旨在鉴定绦虫的半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族。首先,利用生物学软件在基因组数据库寻找公布的各种绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因并对其进行结构分析;其次对猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫样品分别进行RT-PCR验证;通过构建系统发育树对鉴定的半胱氨酸蛋白酶抑制剂进行分类。研究发现,绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由两个亚家族stefms和cystatins组成,同时通过克隆猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的成员验证了基因序列。除了亚洲带绦虫stefins亚家族具有两个成员(Tastefin1和Tastefin2)外,其它绦虫的stefins和cystatins家族均有一个成员组成。Tastefin2基因比其它绦虫的stefins基因在N端多出22个氨基酸,分析显示这22个氨基酸不具有信号肽的特点。所有其它绦虫的stefins基因长度和保守结构域符合典型的半胱氨酸蛋白酶抑制剂特性,不含二硫键和糖基化位点。对绦虫的cystatins序列分析发现,它们具有典型半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatins的信号肽序列、保守结构域序列(Q、QVVAG、PW)和两个保守的二硫键。但是值得关注的是带科绦虫的cystatins基因没有两个保守的二硫键,存在一个串联的重复区,而重复区没有保守的结构域。这种结构在其它物种未见报道。系统发育分析显示带科绦虫cystatins形成了一个独立的分支,说明与其它物种存在很大分子差异。通过与已解析的人stefin和鸡cystatin三级结构比较分析,发现绦虫stefms与人stefm模型具有相同的空间结构。尽管带科绦虫cystatins不具有保守的二硫键,在鸡cystatin形成第一个二硫键位置处,它们空间结构与鸡cystatin相同。在鸡cystatin形成第二个二硫键位置处,带科绦虫cystatins与鸡cystatin结构不同。通过结构分析初步推测鉴定的绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂stefins和cystatins与人的stefin、鸡的cystatin一样,具有抑制半胱氨酸蛋白酶的功能。另外根据带科绦虫cystatins的特殊结构推测可能还存在其它功能。本研究鉴定了绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员,并对其在分类、进化和功能变异方面进行了初步探讨,以上结果为下一步研究其生物学功能奠定了基础。

关键词：绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂序列分析进化三级结构

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BQP35是血清学检测莫氏巴贝斯虫临潭株感染的潜在抗原

BQP35是血清学检测莫氏巴贝斯虫临潭株感染的潜在抗原

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会

作者：关贵全罗建勋 Alain Chauvin 殷宏 Emmanuelle Moreau 刘军龙马米玲 Hélène Rogniaux 刘爱红牛庆丽李有全任巧云家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州 730046 LUNAM Université OnirisUMR 1300 BioEpARNantes F:44307France INRA UR1268 BIAPlatE-Forme BIBSNantesF:44300France

本研究应用体外培养单克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株G7株,纯化获得裂殖子,提取/纯化RNA和mRNA,构建裂殖子cDNA表达文库.以感染后第6周的羊血清,用免疫学筛选技术,自该cDNA文库中筛选获得5个具有较高相似性的EST片段(297-357bp).然后应用5... 详细信息

本研究应用体外培养单克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株G7株,纯化获得裂殖子,提取/纯化RNA和mRNA,构建裂殖子cDNA表达文库.以感染后第6周的羊血清,用免疫学筛选技术,自该cDNA文库中筛选获得5个具有较高相似性的EST片段(297-357bp).然后应用5'RACE扩增技术,扩增获得一个1140bp的基因,同源性分析表明,BQP35与牛巴贝斯虫的一个假定蛋白具有26％的相似性.结果显示,该蛋白是一个IUP蛋白,最长的无序区长105个氨基酸,总的无序区有286个氨基酸,占总蛋白长度的91.96％.最后,应用western blot和ELISA对BQP35作为检测低致病性的莫氏巴贝斯虫感染的抗原潜力进行了评价,结果显示,该抗原与我国羊的其它主要其它梨形虫和羊无浆体的阳性血清没有交叉反应,而只与低致病性的莫氏巴贝斯虫天祝株有一定的交叉反应.在ELISA中,在莫氏巴贝斯虫临潭株感染一周后的羊血清中就可以检测到抗BQP35的抗体.本研究首次在巴贝斯虫中鉴定到IUP蛋白,并对其作为血清学检测抗原的潜力进行了评价.

关键词：羊莫氏巴贝斯虫体外培养重组蛋白抗体检测血清指标

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绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员的鉴定及结构分析

绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员的鉴定及结构分析

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

目的:半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组成,分为stefins,cystatins and kininogens三个亚家族。研究报道线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿主免疫应答、适应寄生生活中发挥着重要作用。本... 详细信息

目的:半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶抑制剂组成,分为stefins,cystatins and kininogens三个亚家族。研究报道线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿主免疫应答、适应寄生生活中发挥着重要作用。本研究旨在鉴定绦虫的半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族。方法:首先,利用生物学软件在基因组数据库寻找公布的各种绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因并对其进行结构分析;其次对猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫样品分别进行RT-PCR验证;通过构建系统发育树对鉴定的半胱氨酸蛋白酶抑制剂进行分类。结果:研究发现,绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族由两个亚家族stefins和cystatins组成,同时通过克隆猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的成员验证了基因序列。除了亚洲带绦虫stefins亚家族具有两个成员(Tastefin1和Tastefin2)外,其它绦虫的stefins和cystatins家族均有一个成员组成。Tastefin2基因比其它绦虫的stefins基因在N端多出22个氨基酸,分析显示这22个氨基酸不具有信号肽的特点。所有其它绦虫的stefins基因长度和保守结构域符合典型的半胱氨酸蛋白酶抑制剂特性,不含二硫键和糖基化位点。对绦虫的cystatins序列分析发现,它们具有典型半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatins的信号肽序列、保守结构域序列(Q、QVVAG、PW)和两个保守的二硫键。但是值得关注的是带科绦虫的cystatins基因没有两个保守的二硫键,存在一个串联的重复区,而重复区没有保守的结构域。这种结构在其它物种未见报道。系统发育分析显示带科绦虫cystatins形成了一个独立的分支,说明与其它物种存在很大分子差异。通过与已解析的人stefin和鸡cystatin三级结构比较分析,发现绦虫stefins与人stefin模型具有相同的空间结构。尽管带科绦虫cystatins不具有保守的二硫键,在鸡cystatin形成第一个二硫键位置处,它们空间结构与鸡cystatin相同。在鸡cystatin形成第二个二硫键位置处,带科绦虫cystatins与鸡cystatin结构不同。通过结构分析初步推测鉴定的绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂stefins和cystatins与人的stefin、鸡的cystatin一样,具有抑制半胱氨酸蛋白酶的功能。另外根据带科绦虫cystatins的特殊结构推测可能还存在其它功能。结论:本研究鉴定了绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员,并对其在分类、进化和功能变异方面进行了初步探讨,以上结果为下一步研究其生物学功能奠定了基础。

关键词：绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂序列分析进化三级结构

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多头带绦虫甘肃分离株分子分类鉴定研究

多头带绦虫甘肃分离株分子分类鉴定研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第三次国际寄生虫学学术研讨会

作者：李文卉李永光盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林罗建勋 R.Blaga 付宝权甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine

多头带绦虫(Taenia multiceps)的成虫寄生于犬、狼、狐狸等犬科动物的小肠,其中绦期幼虫多头蚴通常寄生于绵羊、牛等中间宿主的大脑、脊髓等中枢神经系统,可以引起严重致死性的人兽共患多头蚴病。该病在非洲、美洲、欧洲及亚洲均有动物...

多头带绦虫(Taenia multiceps)的成虫寄生于犬、狼、狐狸等犬科动物的小肠,其中绦期幼虫多头蚴通常寄生于绵羊、牛等中间宿主的大脑、脊髓等中枢神经系统,可以引起严重致死性的人兽共患多头蚴病。该病在非洲、美洲、欧洲及亚洲均有动物感染及人体病例报道,在我国该病呈全国性分布,尤以西北、华北、东北等广大牧区常见

关键词：

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多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究

多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：李永光李文卉盖文燕王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林贾万忠 RaduBlaga 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃农业大学动物医学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary Medicine

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒p... 详细信息

根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRNA序列(AY728092)的一致性为96%。构建了重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠埃希菌BL21后,以异丙基-β-D-

关键词：多头带绦虫脑多头蚴硫氧还蛋白过氧化物酶重组蛋白免疫原性

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