检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2007年第5期34卷 152-155页

作者：李万坤闫鸿斌才学鹏郭福存中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院

糖原组学是研究糖类的结构及其功能特性特别是糖类发挥作用的生物学机制的一门新型学科,将成为生命科学研究中的新热点。多糖及其缀合物在生命活动过程中贮存着各种生物信息,在细胞内外之间传递各种物质。目前,β-葡聚糖的研究是该领域... 详细信息

糖原组学是研究糖类的结构及其功能特性特别是糖类发挥作用的生物学机制的一门新型学科,将成为生命科学研究中的新热点。多糖及其缀合物在生命活动过程中贮存着各种生物信息,在细胞内外之间传递各种物质。目前,β-葡聚糖的研究是该领域研究最为广泛的糖类,其中研究最早的是香菇多糖,因为它具有免疫活性和抗肿瘤作用;作者对多糖的生物学地位以及β-葡聚糖的结构及其与生物学功能的关系的研究进展作一简述。葡聚糖的生物活性与其分子量、溶解度、黏度、支化度、链构象及结晶度有关,β-葡聚糖具有多种不同的构象,一重和三重螺旋是其存在的主要高级结构形式。

关键词： β-葡聚糖生物学地位构效关系

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结核分枝杆菌的分子生物学特点

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畜牧兽医杂志 2007年第3期26卷 19-21页

作者：龚真莉陈国栋刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 兰州中农威特生物科技有限公司

结核分枝杆菌是分枝杆菌属中最重要的一种细菌,是肺结核的病原。肺结核是世界上常见的传染病之一,每年约导致二百多万人死亡和八百多万人致病,给人民生活和国家的经济建设带来了巨大损失。搞清该病原的分子生物学特点对于该病的控制及... 详细信息

结核分枝杆菌是分枝杆菌属中最重要的一种细菌,是肺结核的病原。肺结核是世界上常见的传染病之一,每年约导致二百多万人死亡和八百多万人致病,给人民生活和国家的经济建设带来了巨大损失。搞清该病原的分子生物学特点对于该病的控制及治疗都有十分重要的意义。本文对结核分枝杆菌的分类、表型特征、基因组及质粒、毒力因子、致病机制、主要保护性抗原、免疫防制等生物学特点进行论述,以对该致病因子有一个较为全面的认识,从而达到更好预防和治疗结核病的目标。

关键词：结核分枝杆菌免疫防制分子生物学特点

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猪带绦虫dUTPase基因真核载体的构建及其在BHK细胞中的表达

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动物医学进展 2007年第6期28卷 10-13页

作者：张艳乔军才学鹏景志忠骆学农王笑笑甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

采用PCR技术从重组克隆载体pGEM-dUTPase中扩增出猪带绦虫六钩蚴dUTPase基因,与表达载体pGFP-C1相连接,构建重组表达质粒pGFP-C1-dUTPase,转化大肠埃希菌DH5α,经测序证实,基因序列完全正确。用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时... 详细信息

采用PCR技术从重组克隆载体pGEM-dUTPase中扩增出猪带绦虫六钩蚴dUTPase基因,与表达载体pGFP-C1相连接,构建重组表达质粒pGFP-C1-dUTPase,转化大肠埃希菌DH5α,经测序证实,基因序列完全正确。用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR技术确定目的蛋白的表达情况。结果表明,在转染重组质粒48 h后能观察到绿色荧光,表明在BHK细胞中成功地表达了猪带绦虫dUTPase与pGFP-C1的融合蛋白,为下一步重组dUTPase酶活性的研究奠定了基础。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 dUTPase 重组质粒转染

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长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的构建

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甘肃农业大学学报 2007年第6期42卷 13-17页

作者：谢俊仁刘光远田占成李知新贾宁中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了克隆和研究具有免疫原性的长角血蜱基因。应用建库试剂盒成功构建了长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库．在无Rnase污染的环境下摘取半饱血长角血蜱雌蜱唾液腺。并从中提取RNA，进而纯化mRNA。利用oligo（dT）引物反转录合成双链cDNA... 详细信息

为了克隆和研究具有免疫原性的长角血蜱基因。应用建库试剂盒成功构建了长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库．在无Rnase污染的环境下摘取半饱血长角血蜱雌蜱唾液腺。并从中提取RNA，进而纯化mRNA。利用oligo（dT）引物反转录合成双链cDNA，并在其两端加EcoRⅠ／HindⅢ定向接头并酶切，过柱分级分离后。将cDNA分子定向连接到具有EcoRⅠ／HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中．经体外包装转染***647宿主菌，进行文库容量测定和扩增．以扩增文库的DNA为模板。利用载体通用引物检测cDNA文库中插入片断的大小和质量．经检测。所构建长角血蜱cDNA文库的基础库容量约为4．2×10^6pfu／mL，插入片段主要集中在300～2000bp之间．说明文库质量高、代表性强。

关键词：长角血蜱 cDNA表达文库构建

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微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达

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甘肃农业大学学报 2007年第1期42卷 15-19页

作者：樊瑞泉罗建勋杨孝朴殷宏高金亮关贵全刘志杰党志胜马米玲任巧云刘爱红中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm8... 详细信息

根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/*** blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.

关键词：微小牛蜱 Bm86基因克隆表达

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弓形虫自然弱毒株棒状蛋白2基因克隆及序列分析

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甘肃农业大学学报 2007年第2期42卷 13-16页

作者：祁光宇孙晓林付宝权王艳华苟惠天张德林甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

应用PCR法从弓形虫QHO株速殖子基因组DNA中扩增ROP2的基因片断,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经酶切及PCR鉴定后进行测序,并进行序列分析.结果表明,自然弱毒株的开放阅读框架(ORF)与ROP2基因已知序列(Z36906)的ORF具有97%的... 详细信息

应用PCR法从弓形虫QHO株速殖子基因组DNA中扩增ROP2的基因片断,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经酶切及PCR鉴定后进行测序,并进行序列分析.结果表明,自然弱毒株的开放阅读框架(ORF)与ROP2基因已知序列(Z36906)的ORF具有97%的同源性,氨基酸序列具有95%的同源性.

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白2基因克隆 PCR 同源性

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皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建

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动物医学进展 2007年第9期28卷 15-18页

作者：王艳华殷宏罗建勋蒋锡仕中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 西南民族大学四川成都610041

提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A(Hypodermin A,HA)基因片段,用XhoⅠ、XbaⅠ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPICZa连接并转化,... 详细信息

提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A(Hypodermin A,HA)基因片段,用XhoⅠ、XbaⅠ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPICZa连接并转化,获得重组表达质粒pPICZa-HA,经PCR、酶切、测序表明,目的基因插入位置、方向和阅读框正确。

关键词：皮蝇素A 克隆毕赤酵母表达载体

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猪瘟的流行病学特点、诊断与控制措施

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安徽农学通报 2007年第4期13卷 85-87,80页

作者：龚真莉刘光远陈国栋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 兰州中农威特生物科技有限公司甘肃兰州730046

猪瘟是一种猪的高度接触传染的病毒性疾病,严重威胁养猪事业的发展,是我国猪的四大疫病之一。我国目前猪瘟发生的原因很多,造成了巨大的经济损失。本文针对我国的疫病现状,参照欧洲等发达国家的控制措施,对猪瘟的流行病学特点、诊断及... 详细信息

猪瘟是一种猪的高度接触传染的病毒性疾病,严重威胁养猪事业的发展,是我国猪的四大疫病之一。我国目前猪瘟发生的原因很多,造成了巨大的经济损失。本文针对我国的疫病现状,参照欧洲等发达国家的控制措施,对猪瘟的流行病学特点、诊断及控制措施等方面做一较为全面系统的介绍,为有效控制猪瘟,研究改进猪瘟疫苗和认真制定执行控制和消灭猪瘟的长期规划提供资料。

关键词：猪瘟病毒流行病学特点诊断控制措施

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猪白介素18基因在BHK细胞中的表达

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甘肃农业大学学报 2007年第6期42卷 23-27页

作者：王笑笑宗瑞谦吕转萍窦永喜宋世斌景志忠甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 巴音郭棱职业技术学院生物工程系新疆库尔勒841000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

将猪白介素18(Porcine interleukin18,PIL-18)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建了重组表达质粒pEGFP-PIL-18,利用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR检测技术确定目的蛋白的表达情况.结果在转染重组质粒24 h4... 详细信息

将猪白介素18(Porcine interleukin18,PIL-18)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建了重组表达质粒pEGFP-PIL-18,利用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR检测技术确定目的蛋白的表达情况.结果在转染重组质粒24 h4、8 h后的BHK细胞中均观察到绿色荧光,转染的BHK细胞经G418筛选14 d后,用RT-PCR法检测目的基因,并扩增到长576 bpd的目的cDNA片段。表明在BHK细胞中成功地表达了PIL-18与EGFP的融合蛋白,这为下一步建立稳定表达PIL-18的细胞系奠定了基础.

关键词：猪白介素18 转染 BHK细胞真核表达

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猪带绦虫六钩蚴重组蛋白TSOL18与BSA偶连蛋白的制备

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甘肃农业大学学报 2007年第3期42卷 7-11页

作者：张少华李克生景志忠杜惠芬骆学农才学鹏甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃省医学科学研究院医学生物技术中心甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进... 详细信息

应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进行纯化;纯化后应用醋酸纤维薄膜电泳证明二者的结合情况;并用间接ELISA法检测不同摩尔比连接产物中抗原部分的活性.结果表明:TSOL18与BSA偶连摩尔比为1∶3时连接有效,且对抗原活性影响小,可满足进一步免疫的要求.

关键词：猪带绦虫 MBS TSOL18 BSA 蛋白连接

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