检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王艳华殷宏王萌叶强孟鹏付宝权张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

弓形虫是一种专性细胞寄生原虫,具有广泛的宿主群并在世界范围内流行,引起人兽共患寄生虫病。在畜牧业方面,怀孕动物尤其是牛和羊会出现流产或死胎,猪会大批死亡,给畜牧业造成巨大经济损失。早发现早治疗以及提前进行预防是使弓形虫病... 详细信息

弓形虫是一种专性细胞寄生原虫,具有广泛的宿主群并在世界范围内流行,引起人兽共患寄生虫病。在畜牧业方面,怀孕动物尤其是牛和羊会出现流产或死胎,猪会大批死亡,给畜牧业造成巨大经济损失。早发现早治疗以及提前进行预防是使弓形虫病危害最小化的最有效措施,因此建立特异、快速、灵敏的弓形虫病诊断方法和研制有效预防弓形虫病的疫苗成为迫切需要解决的问题。

关键词：代谢分泌抗原弓形虫病抗原表位

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多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

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2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第16次学术研讨会

作者：李文卉岳龙张念章刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh... 详细信息

目的:脑多头蚴病是由多头带绦虫的中绦期幼虫脑多头蚴寄生于羊等神经系统引起的一种人畜共患寄生虫病。该病可引起家畜死亡,不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且威胁着人体健康。方法:本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板,PCR扩增TmAdh基因家族成员基因组序列,获得6个含有N端信号肽和1个FnⅢ结构域的基因序列。序列预测分析发现6个TmAdh基因都由3个外显子和2个内含子组成;其蛋白序列一致性在44.9-99.2%;进化分析发现该蛋白属于带科绦虫免疫保护性抗原家族的一个新的亚类。将TmAdh1-4基因进行在pGEX4T-1表达系统成功表达出产物大小约为39.0、38.1、38.9和37.8ku的重组蛋白,并进行反应原性及细胞黏着活性检测。结果:脑多头蚴自然感染绵羊血清与TmAdh3重组蛋白反应明显,而与TmAdh1、TmAdh2和TmAdh4重组蛋白反应不明显,而且该蛋白都具有细胞黏着活性。免疫组化表明TmAdh1-4重组蛋白主要分布在脑多头蚴原头节的上皮、顶突、小钩、组织内部有零星分布。重组蛋白的动物免疫保护实验结果显示TmAdh1、TmAdh3和TmAdh4重组蛋白免疫绵羊后抗体水平都显著上升,三免后达到峰值,攻虫后抗体水平开始逐渐下降。动物免疫保护实验表明TmAdh1、TmAdh3、TmAdh4重组蛋白的减虫率分别为61.71%、53.17%、50.76%。结论:本研究为进一步研制脑多头蚴病疫苗奠定基础。

关键词：多头带绦虫 TmAdh 纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域原核表达黏着活性功能性抗原

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多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

多头带绦虫发育阶段及不同部位的比较转录组分析

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第九届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：李文卉张念章杨洋刘垠鞠闫鸿斌李立贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

引言脑多头蚴病是由多头带绦虫的幼虫(脑多头蚴)寄生于绵羊等中间宿主的中枢神经系统引起的一种绦虫蚴病,该病引起感染宿主的最终死亡,对养羊业造成巨大的经济损失,而且人也能被感染,是一种被忽视的人兽共患寄生虫病。

关键词：多头带绦虫发育阶段原头节不同部位

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旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的表达及抗原性分析

旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的表达及抗原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：盖文燕李文卉王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerPIN)基因序列设计引物,从中国河南猪旋毛虫分离株肌幼虫总RNA应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,克隆到pMD-18T载体并测序鉴定。对重组质粒pMD-18T-TsSerPIN进行限制性酶切,获取目的基因片段... 详细信息

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerPIN)基因序列设计引物,从中国河南猪旋毛虫分离株肌幼虫总RNA应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,克隆到pMD-18T载体并测序鉴定。对重组质粒pMD-18T-TsSerPIN进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-TsSerPIN,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Western-blot方法和ELISA鉴定TsSerPIN重组蛋白的抗原性。构建的重组表达质粒pET30a-TsSerPIN阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致,测序鉴定无基因突变,开放阅读框正确。含有pET30a-TsSerPIN重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为42.5kDa,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot和ELISA结果表明TsSerPIN重组抗原可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。

关键词：旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂重组抗原抗原性

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青海血蜱钙网蛋白基因的克隆与分析

青海血蜱钙网蛋白基因的克隆与分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全刘志杰李有全赵海平马米玲刘军龙刘爱红任巧云殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

与化学杀蜱剂相比,利用疫苗免疫来防制蜱的危害具有诛多优越性。但发现良好的候选抗原分子是疫苗研发的关键。之前,通过对青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选共获得了21个阳性克隆(Hq02-Hq22)。但遗憾的是这些克隆多数都不合完整的开放... 详细信息

与化学杀蜱剂相比,利用疫苗免疫来防制蜱的危害具有诛多优越性。但发现良好的候选抗原分子是疫苗研发的关键。之前,通过对青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选共获得了21个阳性克隆(Hq02-Hq22)。但遗憾的是这些克隆多数都不合完整的开放阅读框(ORF)。本研究利用5′RACE技术克隆了Hq07的全长cDNA序列。该基因含有一个长度为1233bp的ORF,编码蛋白分子量为47kDa。BLASTN/P(NCBI)分析表明编码产物为蜱的钙网蛋白。RT-PCR分析表明此基因在青海血蜱的不同发育阶段和不同组织中都表达。Western blot研究提示蜱吸血时能向其宿主体内分泌天然钙网蛋白。该基因在大肠杆菌中进行了分泌型表达,所表达的的重组Hq07蛋白能刺激绵羊产生部分抗蜱免疫保护性。

关键词：青海血蜱 Hq07 钙网蛋白

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青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

青海血蜱“隐藏”抗原肌球蛋白碱性轻链分子的克隆与分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全任巧云马米玲殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能... 详细信息

蜱叮咬动物和利用蜱研磨物免疫动物所产生的抗体之间有很大的差异。利用青海血蜱唾液腺蛋白免疫绵羊产生的抗体能与该蜱唾液腺蛋白中分子量为22kDa(P22)和37kDa(P37)的两个天然蛋白发生免疫反应,而蜱自然吸血刺激绵羊产生的抗体却不能与这两个蛋白发生反应。利用这两个天然蛋白免疫家兔产生的抗血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选获得了一个长度为1085bp的cDNA阳性克隆(Hq02)。Hq02含有483bp的开放阅读框,编码一个分子量约为18kDa的蛋白。RT-PCR分析表明此基因在青海血蜱的唾液腺、中肠、一些其它器官和该蜱的不同发育阶段表达。所预测的Hq02基因的氨基酸序列与一些已知的肌球蛋白碱性轻链蛋白有很高的同源性。该蛋白在大肠杆菌中与,17基因10蛋白得到了融合表达。Western blot分析表明此重组蛋白只能与利用P22和P37免疫家兔产生的阳性血清反应,而不能与蜱叮咬家兔产生的阳性血清发生反应,说明此阳性克隆所编码的蛋白是青海血蜱的"隐藏"抗原。利用该重组蛋白免疫绵羊产生的抗体能使青海血蜱雌蜱的饱血体重下降21.8%。这是关于蜱的肌球蛋白碱性轻链蛋白的首次报道。

关键词：青海血蜱 Hq02基因肌球蛋白碱性轻链 "隐藏"抗原

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青海血蜱隐藏抗原基因Hq05的克隆、表达及其抗蜱免疫保护性分析

青海血蜱隐藏抗原基因Hq05的克隆、表达及其抗蜱免疫保护性分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全赵海平李有全任巧云马米玲刘志杰刘爱红党志胜殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

利用兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对该蜱的cDNA表达文库进行差异筛选,获得了一个阳性克隆(Hq05)。该阳性克隆含有一个540bp的开放阅读框,编码蛋白的分子量为20kDa。生物信息学分析表明Hq05是一个新发... 详细信息

利用兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对该蜱的cDNA表达文库进行差异筛选,获得了一个阳性克隆(Hq05)。该阳性克隆含有一个540bp的开放阅读框,编码蛋白的分子量为20kDa。生物信息学分析表明Hq05是一个新发现的基因。RT-PCR分析提示此基因在青海血蜱的若蜱和成蜱阶段表达,并在成蜱的唾液腺中大量表达,而不在中肠中表达。在大肠杆菌中表达的重组Hq05蛋白只能与兔抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清发生免疫学反应,而不与兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清及阴性血清反应,说明Hq05蛋白是青海血蜱的隐藏抗原。利用重组Hq05蛋白免疫绵羊产生的保护性抗体能使蜱的产卵量下降40%,卵的孵化率下降37%。结果表明Hq05可作为研制抗青海血蜱基因工程疫苗的候选抗原。

关键词：青海血蜱差异筛选 Hq05 隐藏抗原保护性免疫

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多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核表达

多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核...

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分... 详细信息

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,TmPKA-C基因开放阅读框的长度为1032 bp,编码343个氨基酸。TmPKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的大小约42 kDa。Western-blot

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达催化亚基

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青海血蜱肌原蛋白T亚基基因全长cDNA的克隆和分析

青海血蜱肌原蛋白T亚基基因全长cDNA的克隆和分析

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：高金亮罗建勋樊瑞泉关贵全殷宏家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所

肌原蛋白T亚基在肌肉的收缩过程中发挥着重要作用。本研究克隆了青海血蜱的肌原蛋白T亚基(HqTnT)基因的全长cDNA序列。此序列含有一个长度为1170bp的开放阅读框,编码产物的分子量为46.5kDa。通过序列比对发现此基因含有两个很保守的结构... 详细信息

肌原蛋白T亚基在肌肉的收缩过程中发挥着重要作用。本研究克隆了青海血蜱的肌原蛋白T亚基(HqTnT)基因的全长cDNA序列。此序列含有一个长度为1170bp的开放阅读框,编码产物的分子量为46.5kDa。通过序列比对发现此基因含有两个很保守的结构域,一个在其序列的中部(氨基酸残基54-78),另一个靠近序列的C末端(氨基酸残基181-229)。青海血蜱的肌原蛋白的T亚基应该通过这两个结构域分别与其原肌球蛋白和肌原蛋白的I亚基相互作用。RT-PCR显示此基因在蜱的不同发育阶段和不同组织中广泛表达。利用在大肠杆菌中表达的的重组HqTnT蛋白免疫绵羊能诱导特异性抗体的产生,但该抗体无免疫保护性。本研究是对蜱的肌原蛋白T亚基的首次报道。

关键词：青海血蜱肌原蛋白T亚基

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寄生性蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

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中国动物检疫 2015年第3期32卷 57-61页

作者：盖文燕王君玮付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)是一种蛋白水解酶,广泛存在于生物体中。本文论述了丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类、结构、功能及在寄生性蠕虫中的研究进展。指出通过对Serpin的研究,有望使其作为寄生性蠕虫病诊断和疫苗的候选分子,为寄生性蠕... 详细信息

丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)是一种蛋白水解酶,广泛存在于生物体中。本文论述了丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类、结构、功能及在寄生性蠕虫中的研究进展。指出通过对Serpin的研究,有望使其作为寄生性蠕虫病诊断和疫苗的候选分子,为寄生性蠕虫病防治奠定基础。

关键词：寄生性蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂

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